氣相色譜-質譜法對食用油中17種鄰苯二甲酸酯的測定

王鵬功，高明星*，程 剛，馬緒麗，劉潤珠，李 璐

(中國檢驗認證集團山東檢測有限公司，山東 青島 266023)

氣相色譜-質譜法對食用油中17種鄰苯二甲酸酯的測定

王鵬功，高明星*，程 剛，馬緒麗，劉潤珠，李 璐

(中國檢驗認證集團山東檢測有限公司，山東 青島 266023)

采用乙腈液-液萃取法對鄰苯二甲酸酯類物質進行提取，通過弗洛里硅土固相萃取柱去除樣品雜質，經旋轉蒸干后定容，選擇氣相色譜-質譜聯用技術進行測試，建立食用油中17種鄰苯二甲酸酯的檢測方法。該方法操作簡單、準確可靠、重現性良好，各種鄰苯二甲酸酯化合物的方法檢出限為20～60μg/L，加標回收率為83.20%～102.09%，相對標準偏差為2.73%～5.77%，能夠滿足食用油中鄰苯二甲酸酯類化合物含量的測定。

氣相色譜-質譜；食用油；鄰苯二甲酸酯；測定

2011年5月底曝光的臺灣“起云劑”事件，讓增塑劑再次成為人們關注的熱點話題，而增塑劑的主要成分為鄰苯二甲酸酯類(phthalie acid esters，PAEs)化合物。PAEs一般為無色油狀黏稠液體，難溶于水，易溶于有機溶劑，常溫不易揮發，主要用作塑料增塑劑，增加塑料等高分子的可塑性和柔軟性等[1]。此外，該類增塑劑，在涂料、染料、紡織品和化妝品等方面己得到了廣泛的應用[2-7]。然而，研究表明PAEs是一類環境激素，能通過呼吸、飲食和皮膚接觸，進入人體，在人體內會發揮類似雌性激素的作用，引發激素內分泌失調，對人體特別是嬰幼兒的生殖系統造成極大的危害[8-10]。

在日常生活中，人們經常直接或間接食用塑料包裝的產品，如食用油，為了便于存儲及運輸，早期的散裝油已被塑料瓶(桶)裝油取代，但因塑料包裝材料中物質組分復雜，存在遷移溶出有害物質的隱患，所以食用油是否被塑料中常見的鄰苯二甲酸酯類化合物污染，同時如何快速有效地對其安全性進行準確判斷，不斷被社會各界所關注[11-15]。因食用油基體復雜，樣品前處理過程較為繁瑣，有效地測試方法有限，本實驗擬采用氣相色譜-質譜連用技術建立同時測定食用油中17種鄰苯二甲酸酯的方法。

1 材料與方法

1.1 材料

玉米油、大豆油、菜籽油、花生油 市售。

1.2 試劑與儀器

鄰苯二甲酸二甲酯(D M P)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二異丁酯(DIBP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯(DMEP)、鄰苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯(BMPP)、鄰苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯(DEEP)、鄰苯二甲酸二戊酯(DPP)、鄰苯二甲酸二己酯(DHP/DHXP)、鄰苯二甲酸丁基芐基酯(BBP)、鄰苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯(DBEP)、鄰苯二甲酸二環己酯(DCHP)、鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二苯酯(diphenyl phthalate)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、鄰苯二甲酸二壬酯(DNP)、鄰苯二甲酸二丙酯(DPRP)標準品 德國Dr.Ehrenstorfer公司；乙腈、正己烷、丙酮(均為色譜純) 美國J.T.Bakerg公司；無水硫酸鈉(分析純) 天津市標準科技有限公司；弗洛里圭土 上海國際集團化學試劑有限公司。

GC-MS-QP2010 Plus氣相色譜-質譜聯用儀 日本島津公司；旋轉蒸發儀 日本GL Sciences公司；Mili-Q超純水系統 美國Millipore公司；移液槍 德國Eppendorf公司；KQ-100DE超聲清洗器 昆山市超聲儀器有限公司；LDZ5-2離心機 北京京立離心機有限公司。

1.3 標準溶液的配制

單標儲備液的配制：分別準確稱取標準品(精確至0.1mg)，用正己烷溶解，分別配制成質量濃度為1000mg/L的標準儲備液，待用。

混合標準儲備液的配制：分別準確移取所需的標準儲備液，用正己烷配制成質量濃度為10mg/L的混合標準液。置于－1 8℃以下冷凍保存，待用。

1.4 樣品前處理

稱取2.0g樣品于玻璃試管中，加入3.0mL乙腈，渦旋10s后超聲萃取10.0min，離心，取上層液于雞心瓶中，重復上述步驟，使樣品進行3次液液萃取。雞心瓶內液體經旋轉蒸發至干后，分兩次加入正己烷(4.0mL＋1.0mL)復溶，依次倒入自制弗羅里硅土SPE柱，用3mL正己烷淋洗棄去，再用5mL丙酮進行洗脫，收集洗脫液于雞心瓶中旋蒸至干，用正己烷定容至2.0mL，轉移至進樣瓶中待測(注：本方法所涉及玻璃器皿在使用前均用正己烷充分洗滌浸泡)。

SPE柱制備過程：稱取1.0g弗羅里硅土于小玻璃管中，并加入少量無水硫酸鈉，使用前用正己烷活化(活化及洗脫時通過柱下附加的注射器針頭使流速恒定)。

1.5 測試條件

Inert Cap PESTICIDES毛細管色譜柱(30m×0.25mm，0.25μm)；載氣：He；進樣口溫度：250℃；柱溫：60℃(1min)，以20℃/min升至200℃(1min)，以5℃/min升至280℃(8min)；進樣量1μL；不分流進樣；柱流速：1.0mL/min；離子源溫度：200℃；Interface溫度：280℃。

2 結果與分析

2.1 總離子流色譜圖

圖1 17種鄰苯二甲酸酯的總離子流色譜圖Fig.1 Chromatogram of mixed 17 PAE standards

表1 17種PAEs的保留時間以及定性和定量選擇離子Table 1 Retention time and qualitatively and quantitatively selected ions for 17 PAEs

在測試條件下采用全掃描模式對17種標準組分標樣進行測試，其混合溶液的總離子流色譜圖如圖1所示。由圖1可知，各組分色譜峰的分離效果良好，僅DNP因存在異構體，沸點高且沸程寬，形成簇峰，對其采用特征離子色譜峰峰面積加和的方式進行定量分析，17種PAEs全掃描的保留時間及定性和定量選擇離子詳見表1。

2.2 方法線性

在空白食用油中分別添加不同量的混合標準儲液，使其最終質量濃度為10、20、50、100、250、500、1000、2000μg/L，在確定的GC-MS條件下進行測試分析，以峰面積對被測組分的質量濃度進行線性回歸分析，并以3倍信噪比計算該方法條件下各組分的檢出限，結果如表2所示。各種鄰苯二甲酸酯化合物的方法檢出限為20～60μg/L，由線性方程的決定系數R2可知線性關系良好，同時方法檢出限較低，能夠滿足樣品測試的相關標準及要求。

表2 17種鄰苯二甲酸酯類化合物的方法標準曲線測試結果Table 2 Calibration curves of 17 phthalates

2.3 方法回收率與精密度

通過在2.0g空白食用油中添加100μL質量濃度10mg/L的混合標準儲備液，按照1.4節方法進行前處理后，在該條件下進行測試，同時做玉米油空白樣及6個平行樣測試，計算回收率，結果如表3所示。由表3可知，樣品加標回收率均在83.20%～102.09%，相對標準偏差為2.73%～5.77%，能夠滿足樣品測試要求。

2.4 樣品測定結果

本實驗室隨即選購3類市售食用油(塑料瓶裝)作為樣品進行測試，結果如表4所示。3種樣品均檢出一定量的鄰苯二甲酸酯，而DBEP在各樣品油中均有檢出且含量較高。本實驗的分析結果僅表明測試樣品中是否存在鄰苯二甲酸酯，為市售樣品的測試等提供方法參考。此外，對部分塑料油桶進行檢測，結果表明D B E P、DBP、DIBP、DEHP等有較高檢出，結合鄰苯二甲酸酯類化合物具有脂溶性，由此推斷食用油中PAEs可能來自于包裝材料，還有待進一步分析研究。

表3 樣品添加回收率實驗結果(n=6)Table 3 Recovery rates of 17 phthalates in spiked blank samples (n=6)

表4 3種市售樣品的測試結果Table 4 Results obtained for determination of 17 phthalates in three types of commercially available samplesmg/kg

3 結 論

本實驗建立了通過液-液萃取、氣相色譜-質譜聯用技術同時測定食用油中17種鄰苯二甲酸酯類化合物的測試方法，同時結合固相萃取技術能夠很好的消除基質干擾，提高測試的靈敏度及結果的可靠性。該方法重現性及回收率良好、樣品前處理簡單，且方法線性范圍和檢出限均可滿足食用油中鄰苯二甲酸酯類物質定性定量測試分析的相關要求，能夠用于實際樣品的測試分析，對食用油質量的監控檢測有十分重要的意義。

[1] 石萬聰, 石志博, 蔣平平, 等. 增塑劑及應用[M]. 北京: 北京工業出版社, 2002: 198-278.

[2] 張文娟, 陳琳, 陳勁文, 等. 超聲萃取-GC-MS法測定紡織品中鄰苯二甲酸酯[J]. 印染, 2010(15): 38-41.

[3] 牛增元, 葉曦雯, 房麗萍, 等. 固相萃取-氣相色譜法測定紡織品中的鄰苯二甲酸酯類環境激素[J]. 色譜, 2006, 24(5): 503-507.

[4] 周相娟, 趙玉琪, 李偉, 等. 氣相色譜-質譜法測定化妝品中16種鄰苯二甲酸酯[J]. 日用化學工業, 2010, 40(2): 148-152.

[5] 陳如, 蔣曉琪, 王建平. 鄰苯二甲酸酯及其生態毒性[J]. 印染助劑, 2010, 27(9): 52-56.

[6] 鄭向華, 林立毅, 方恩華, 等. 固相萃取-氣相色譜-質譜法測定食品中23種鄰苯二甲酸酯[J]. 色譜, 2012, 30(1): 27-32.

[7] 劉芃巖, 高麗, 申杰, 等. 固相微萃取-氣相色譜法測定白洋淀水樣中的鄰苯二甲酸酯類化合物[J]. 色譜, 2010, 28(5): 517-520.

[8] 曹國洲, 肖道清, 朱曉艷. 食品接觸制品中鄰苯二甲酸酯類增塑劑的風險評估[J]. 食品科學, 2010, 31(5): 325-327.

[9] 蔡晶, 柴麗月, 胡球輝. 食品中鄰苯二甲酸酯的檢測及安全評價[J].食品科學, 2005, 26(12): 242-245.

[10] 劉慧杰, 舒為群. 鄰苯二甲酸酯類化合物的毒理學效應及對人群健康的危害[J]. 第三軍醫大學學報, 2004, 26(19): 1778-1781.

[11] 肖乃玉, 陸杏春, 郭清兵, 等. 塑料食品包裝中鄰苯二甲酸酯類增塑劑遷移研究進展[J]. 包裝工程, 2010, 31(11): 123-127.

[12] GB 9685—2008 食品容器、包裝材料用添加劑使用衛生標準[S].

[13] GB/T 21911—2008 食品中鄰苯二甲酸酯的測定[S].

[14] 柴麗月, 辛志宏, 蔡晶, 等. 食品中鄰苯二甲酸酯類增塑劑含量的測定[J]. 食品科學, 2008, 29(7): 362-365.

[15] 李明元, 胡銀川, 徐錦, 等. 食用油中PAEs的RHPLC測定方法研究[J]. 西華大學學報: 自然科學版, 2011, 30(1): 21-23.

Determination of 17 Phthalates in Edible Oil by Gas Chromatography-Mass Spectrometry

WANG Peng-gong，GAO Ming-xing*，CHENG Gang，MA Xu-li，LIU Run-zhu，LI Lu
(Shandong Test Co. Ltd., China Certification & Inspection Group, Qingdao 266023, China)

An analytical method to determine 17 phthalates in edible oil was presented using liquid-liquid extraction and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The sample pretreatment before GC-MS analysis was achieved by liquid-liquid extraction with acetonitrile, removal of unwanted impurities using a Florian silica solid phase column, rotary evaporation until dryness, re-dissolution. The presented method was simple, accurate, reliable and reproducible. The limits of detection of this method for 17 phthalates tested were in the range of 20－60 μg/L. The average spike recovery rates of these phthalates from blank edible oil samples varied from 83.20% to 102.09% with relative standard deviation of 2.73%－5.77%. This method could meet the requirements for the determination of phthalates in edible oil.

gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS)；edible oil；phthalate acid esters；determination

TS201.6

A

1002-6630(2012)18-0246-04

2011-08-23

王鵬功(1982—)，男，助理工程師，學士，研究方向為食品安全與檢測。E-mail：wangpenggong@163.com

*通信作者：高明星(1984—)，男，助理工程師，碩士，研究方向為生態紡織品與食品檢測。E-mail：mingxinggao@126.com