噠螨靈在枸杞中的殘留動態(tài)研究

胡曉嵐，虞英明，張 蓉

(1.杭州澳醫(yī)保靈藥業(yè)有限公司，浙江杭州310022; 2.寧夏農林科學院植物保護研究所，寧夏銀川750002)

噠螨靈在枸杞中的殘留動態(tài)研究

胡曉嵐1，虞英明1，張 蓉2

(1.杭州澳醫(yī)保靈藥業(yè)有限公司，浙江杭州310022; 2.寧夏農林科學院植物保護研究所，寧夏銀川750002)

采用3種施藥方式:推薦劑量(150mg·L－1)一次施藥、加倍劑量(300mg·L－1)一次施藥和推薦劑量(150mg ·L－1)二次施藥，在枸杞田噴施15%噠螨靈乳油，于施藥后不同時間采集鮮果，采用氣相色譜法對果實樣品進行分析。結果表明，在一次施藥的田塊，在推薦劑量和加倍劑量下，噠螨靈的24h降解率分別達到66.0%和68.5%，7d后分別達到99.1%和99.4%。經計算，藥劑的降解半衰期分別為0.65、0.63d。在同為推薦劑量的條件下，二次施藥可以明顯提高噠螨靈在枸杞中的殘留量。與現有的最高殘留限量(Maximum residue limit，MRL)值相對照，在推薦劑量一次施藥和加倍劑量一次施藥的田塊，鮮果的采集可以分別在施藥的24h和3d后進行;在推薦劑量二次施藥的田塊，鮮果的采集可以在第二次施藥7d后進行。

噠螨靈，枸杞，殘留動態(tài)

枸杞屬于茄科(Solanaceae)枸杞屬(Lycium)，是一種多年生落葉灌木。枸杞的籽、花、葉、根、皮都可入藥。其果實具有滋補肝腎、益精養(yǎng)血、明目消翳、潤肺止咳的作用。枸杞在中國各地均有分布，但主要集中在西北地區(qū)，且逐漸成為栽培品種。在栽培條件下，枸杞的各個生長時期都有蟲害發(fā)生，主要害蟲有蚜蟲、癭螨、銹螨、癭蚊，次要害蟲包括木虱、負泥蟲、跳甲等。枸杞的果實、葉、花，甚至嫩梢都會受到危害，因此不可避免地需要使用殺蟲劑。噠螨靈(pyridaben)屬于觸殺性殺螨劑，對害螨的各個發(fā)育階段均有防效，并且與傳統殺螨劑無交互抗性。噠螨靈單劑及混劑在果園、棉田以及蔬菜地害螨的防治中有著廣泛應用。人們也曾嘗試以噠螨靈作為枸杞害螨的防治藥劑［1－4］。但是相應的殘留動態(tài)，國內外迄今未見公開報道。本文以15%噠螨靈乳油(EC)作為受試藥劑，以栽培枸杞作為受試植物，采用推薦劑量(150mg·L－1)一次、加倍劑量(300mg·L－1)一次和推薦劑(150mg·L－1)量二次3種不同的方式施藥，于施藥后不同時間采集鮮果樣品，采用氣相色譜法檢測樣品中的噠螨靈殘留，為安全用藥提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

噠螨靈標準品 純度99.8%，德國 Dr. Ehrenstorfer GmbH;乙酸乙酯、丙酮、石油醚(60～90℃)、氯化鈉、無水硫酸鈉、弗羅里硅土(60～100目)等試劑 均為分析純;弗羅里硅土 用前在馬福爐中600℃灼燒4h，使其活化;無水硫酸鈉 用前在馬福爐中300℃灼燒2h，使其徹底脫水;噠螨靈乳油西安常隆正華作物保護有限公司。

HP6890氣相色譜儀，2FEC－85A旋轉蒸發(fā)儀，玻璃層析柱(30×?1.0cm)，高速組織勻漿機，分液漏斗，容量瓶，國際型振蕩器等。

1.2 田間實驗設計

實驗于2007年夏季在寧夏農林科學院蘆花臺枸杞研究所實驗基地進行。枸杞品種為寧杞1號，樹齡5年。受試藥劑為15%噠螨靈乳油。實驗共包含3個施藥區(qū)，施藥區(qū)1:推薦劑量(150mg·L－1)一次施藥，施藥區(qū)2:加倍劑量(300mg·L－1)一次施藥，施藥區(qū)3:推薦劑量(150mg·L－1)二次施藥。每個施藥區(qū)設3個重復小區(qū)，每個小區(qū)包含9個植株，分別掛牌標記。施藥日期為7月3日。對于施藥區(qū)3，第一次施藥7d后進行第二次施藥。

對于施藥區(qū)1和施藥區(qū)2，施藥后1h，1、3、5、7、14、21、28d采集成熟鮮果。每個小區(qū)采樣0.5kg。采集的樣品置于－20℃低溫冰柜內冷藏待測。對于施藥區(qū)3，第二次施藥后7、14、21d采樣。每個小區(qū)采樣0.5kg。采集的樣品置于－20℃低溫冰柜內冷藏待測。

1.3 樣品前處理

1.3.1 提取 將枸杞樣品用高速組織勻漿機粉碎，用電子天平稱取20.00g，置于250mL具塞平底燒瓶中，加入60mL丙酮，蓋上塞子，在振蕩器上以150r/min的速度振蕩30min。將混合液轉入離心管，在3000r/min轉速下離心3.0min。離心后獲得的上清液轉入平底燒瓶，沉淀用50mL丙酮懸浮，重復一次上述操作，合并上清液于平底燒瓶中。將合并后的液體在旋轉蒸發(fā)儀上以不高于40℃濃縮至約50mL。轉移濃縮液到預先注入200mL 10%NaCl的500mL分液漏斗中，再加入50mL石油醚，劇烈振蕩3min，靜置分層。收集位于上層的石油醚萃取液，使其經過裝有無水Na2SO4的三角漏斗，收集濾液置于250mL平底燒瓶中，位于下層的水相用50mL石油醚再次萃取，合并萃取液，在40℃以下減壓濃縮至約2mL，室溫下用N2吹干，用5mL洗脫液A(乙酸乙酯∶石油醚=5∶95，v/v)溶解殘留物。待下一步凈化。

1.3.2 凈化 柱層析法:取內徑1cm的玻璃層析柱，其中依次填入2cm無水Na2SO4、5g活化的弗羅里硅土、2cm無水Na2SO4，用橡皮錘輕輕敲實，用30mL石油醚預淋。當預淋液到達下端的無水Na2SO4時，提取液上柱。先用20mL洗脫液A淋洗(棄去濾出液);再注入50mL洗脫液B(乙酸乙酯∶石油醚= 15∶85，v/v)，收集濾液于100mL梨形燒瓶中，40℃以下減壓濃縮至約2mL，室溫下用N2吹干，用石油醚定容至2mL，待測。

1.4 樣品檢測

噠螨靈在柑桔、蘋果、蔬菜、茶葉等農作物中的殘留分析方法已有報道。所用的分析手段包括氣相色譜(GC)、高效液相色譜(HPLC)、氣質聯用(GCMS)、液質聯用(LC－MS)等［5－11］。根據樣品特點和實驗室的條件，本文采用劉冬梅等［5］的分析方法并稍做調整。具體如下。

1.4.1 色譜條件 檢測器:電子捕獲檢測器(ECD);色譜柱:HP－5石英毛細管柱(30m×?0.32mm，0.25μm);柱溫:起始溫度80℃，以50℃/min的速度上升到230℃，停留1min，再以20℃/min的速度上升到260℃，停留7min;進樣口溫度:260℃;檢測器溫度:260℃;衡壓模式進樣(壓強:10.04psi);進樣量: 1μL;定量方法:外標法(峰面積)。

1.4.2 標準曲線 取噠螨靈標準品儲備液，用丙酮稀釋配制成2.0、1.0、0.5、0.2、0.1μg·mL－1的工作液，按照“1.4.1”規(guī)定的色譜條件進行檢測，記錄不同進樣量對應的峰面積。以標準溶液濃度為自變量(X)，以峰面積為應變量(Y)，采用DPS建立線性回歸方程。

1.4.3 添加回收 稱取20g空白樣品置于平底燒瓶中，分別加入濃度為0.100、1.00、10.0mg·L－1的噠螨靈標準溶液，制成藥劑含量分別為0.0050、0.0500、0.5000mg·kg－1的加標樣品，按“1.3”規(guī)定的方法進行樣品前處理，再按“1.4.1”所設定的條件進行殘留分析。

2 結果與討論

2.1 方法靈敏度及線性范圍

在本文設定的色譜條件下，樣品的LOD(3倍S/N)和LOQ(10倍S/N)分別為4.0×10－4mg·kg－1和1.3×10－3mg·kg－1，樣品的最小檢出量為4×10－12g。符合國家農業(yè)部對于農藥殘留最小檢出量的要求(1.0×10－9g)［5］。標準品的氣相色譜圖見圖1。

圖1 標準品氣相色譜圖Fig.1 GC chromatogram of a standard

測定結果表明，噠螨靈色譜峰的峰面積(Y)與進樣量(X)在所測范圍內有良好的線性關系，線性方程為Y=30483.2X+2550.7，r=0.9979。

2.2 添加回收率

在0.005～0.500mg a.i.·kg－1的加標范圍內，噠螨靈的添加回收率介于84.4%～96.5%之間，RSD介于5.7%～7.5%之間(見表1)。檢測方法符合農藥殘留分析要求。

表2 噠螨靈在施藥區(qū)的殘留動態(tài)Table 2 Residue trend of pyridaben in field

表3 噠螨靈的降解方程Table 3 Equation for degradation of pyridaben

表1 噠螨靈在枸杞中的添加回收率Table 1 Fortified recovery of pyridaben in fruit of Lycium barbayum L.

2.3 樣品殘留動態(tài)

對采自施藥區(qū)1～3的樣品做殘留分析，其結果見表2。圖2和圖3分別顯示空白樣品和實驗樣品的氣相色譜圖。從表2可以看出，噠螨靈在施藥區(qū)1和施藥區(qū)2的初始殘留(即施藥后1h的殘留)分別為0.528mg·kg－1和1.770mg·kg－1。施藥24h后，降解率分別為達到66.0%和68.5%，7d后分別為達到99.1%和99.4%。藥劑殘留水平之所以下降較快，一方面由于噠螨靈的揮發(fā)和光解作用，另外果實的生長稀釋效應也是一個重要原因。從表2還可以看出，同屬一次施藥的田塊，施藥區(qū)2的殘留量總是明顯高于施藥區(qū)1。這與前者的施藥量(300mg·L－1)高于后者(150mg·L－1)有關。值得注意的是，藥劑殘留量的差異顯著性在施藥區(qū)1和2之間比較，與3個施藥區(qū)一起比較，其結果有所不同。后一種比較顯示施藥區(qū)1和施藥區(qū)2的殘留量差異不顯著，但它們均明顯低于施藥區(qū)3。這說明增加施藥次數比提高用藥量對殘留水平的影響更大。

從表3可以看出，在一次施藥的條件下，噠螨靈的降解動態(tài)能夠較好地吻合一次動力學方程，降解半衰期在推薦劑量下為0.65d，加倍劑量下為0.63d。兩者差別不大。

2.4 安全間隔期

圖2 空白樣品氣相色譜圖Fig.2 GC chromatogram of a blank sample

圖3 實驗樣品氣相色譜圖Fig.3 GC chromatogram of a test sample

我國目前尚未制定噠螨靈在枸杞中的最高殘留限量(MRL);英國和歐盟給出的MRL值均為0.3mg/kg［12－14］。按照上述 MRL標準，在推薦劑量(150mg·L－1)一次施藥的田塊，鮮果的采集可以在施藥24h后進行;在加倍劑量(300mg·L－1)一次施藥的田塊，鮮果的采集可以在3d后進行;在推薦劑量(150mg·L－1)二次施藥的田塊，第二次施藥7d后采集的果實是安全的。如果藥農采集果實的時間點在上述安全間隔期以內，所采果實中的噠螨靈殘留量有可能高于MRL，即殘留超標。需要注意的是，安全間隔期與施藥量和施藥次數相對應。改變施藥方式，安全間隔期也相應發(fā)生改變。另外，本實驗在西北地區(qū)干旱長日照的氣候條件下進行，依據本實驗結果提出的安全間隔期對該地區(qū)的藥農有較強的指導意義。在其他氣候區(qū)帶，噠螨靈的降解速率或快或慢，本文提出的安全間隔期僅可供相關地區(qū)藥農作為參考。

3 結論

噠螨靈屬于田間降解速率較快的農藥。根據本實驗的結果，在推薦劑量(150mg·L－1)和加倍劑量(300mg·L－1)下，其降解半衰期分別為0.65d和0.63d。在推薦劑量一次施藥、加倍劑量一次施藥和推薦劑量二次施藥的田塊，采集鮮果的安全間隔期分別為24h、3d和7d。

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［14］Security and Health Excutive－Chemicals Regulation Directorate－ MRL database［EB/OL］ .https://secure. pesticides.gov.uk/MRLs/search.asp.

Research of residue level of pyridaben in fruit of cultivated wolfberry Lycium barbayum

HU Xiao－lan1，YU Ying－ming1，ZHANG Rong2
(1.Hangzhou Aoyipollen Pharmaceutical Co.，Ltd.，Hangzhou 310022，China; 2.Institute of Plant Protection，Ningxia Academy of Agriculture and Forestry Sciences，Yinchuan 750002，China)

Field experiments were conducted to study residual trend of pyridaben in fruit of Lycium barbayum L. Emulsifier concentration(EC)of pyridaben of 15%was applied in field of cultivated wolfberry Lycium barbayum in three patterns，one application at recommended rate(150mg·L－1)，one application at double rate(300mg·L－1)，and two applications at recommended rate(150mg·L－1).The fruit was collected several times after the applications，and the residues of pyridaben were analyzed by GC.Result of the study indicated that 24h degradation of the insecticide in field of one application at recommended rate and double rate were detected to be 66.0%and 68.5%，respectively，and the degradation rate 7d after the applications rose up to 99.1%and 99.4% respectively.The half－lives were calculated to be 0.65 and 0.63d，respectively.The second application significantly increased the residue level of pyridaben in case the insecticide was applied in recommended rate.It was reasonable say based on the current value of maximal residual limit(MRL)that in the field of one application at recommended rate and that of one application at double rate the fruit could be collected after 24h and 3d，respectively，and that in field of two application at recommended rate，the fruit could be collected 7d after the second application.

pyridaben;Lycium barbayum L.;residue

TS207.5+3

A

1002－0306(2012)10－0055－04

2011－09－26

胡曉嵐(1966－)，女，工程師，研究方向:食品藥品分析。

國家科技支撐計劃(2006BAI09B04－11)。