轉基因植物REAL-TIME PCR方法檢出限和定量限的研究

隋志偉，王 晶，*，李 亮，謝田法

(1.中國計量科學研究院，北京100013;2.北京工業大學，北京100124)

轉基因植物REAL-TIME PCR方法檢出限和定量限的研究

隋志偉1，王 晶1，*，李 亮1，謝田法2

(1.中國計量科學研究院，北京100013;2.北京工業大學，北京100124)

目前Real－time PCR(Rt－PCR)方法在轉基因植物定量檢測中應用最為廣泛。有關該方法的檢出限和定量限的計算并沒有達成統一。本文采用統計模型對三種轉基因植物進行實時熒光定量PCR方法檢出限和定量限的研究。實驗結果表明:轉基因玉米NK603檢出限5拷貝，定量限14拷貝;轉基因棉花Mon15985檢出限5拷貝，定量限12拷貝;轉基因油菜Oxy235檢出限4拷貝，定量限9拷貝。是利用統計學方法對轉基因植物熒光定量PCR方法檢出限和定量限研究的一個積極嘗試，可用于其他轉基因植物檢測中檢出限和定量限的確定。

轉基因植物，檢出限，定量限，統計容忍限

近年來，隨著基因工程技術越來越多地應用于農作物改良，轉基因作物逐漸在全世界范圍內發展起來。轉基因作物在全球范圍的迅猛發展也使其食用安全和環境安全問題引起了各國政府和相關國際組織的高度重視。紛紛出臺的轉基因生物安全管理相應的法規對轉基因生物從生產到上市的各個環節進行嚴格規范和監控［1］。轉基因產品檢測不但需要定性，還需要準確定量。目前采用Rt－PCR是轉基因植物檢測的金標準，確定此方法的檢出限和定量限顯得尤為重要。截止1995年，國際上出現了大量關于檢出限和定量限這方面的概念。就檢出限而言，不同術語的確切含義也有一定的差異。……