銀杏類黃酮O-甲基轉移酶活性的高效液相色譜分析

仲月明，張傳麗，陳 鵬，*，沈丹紅，吳秋月，周長遠

(1.揚州大學園藝與植物保護學院，江蘇揚州225009; 2.揚州大學生物科學與技術學院，江蘇揚州225009)

銀杏類黃酮O-甲基轉移酶活性的高效液相色譜分析

仲月明1，張傳麗2，陳 鵬1，*，沈丹紅1，吳秋月1，周長遠1

(1.揚州大學園藝與植物保護學院，江蘇揚州225009; 2.揚州大學生物科學與技術學院，江蘇揚州225009)

首次明確了銀杏葉片類黃酮生物代謝關鍵酶O－甲基轉移酶(flavonoid O－methyltransferase，FOMT)活性的HPLC測定技術與方法。采集揚州大學銀杏種質資源圃銀杏雄株成熟葉片，提取粗酶液，根據FOMT催化反應生成S－腺苷－L－高半胱氨酸(SAH)的原理，以山奈酚、槲皮素和異鼠李素等3種黃酮苷元為反應底物，采用優化的HPLC體系檢測樣品中FOMT催化反應生成的SAH峰面積，通過標準曲線求得不同反應底物的FOMT相對活性。FOMT活性反應生成物SAH在1.5～20μg/mL內呈良好的線性關系，RSD為2.1%(n=5)，建立了FOMT活性測定優化體系。不同反應底物的FOMT活性表現不同，山奈酚與異鼠李素顯著高于槲皮素。FOMT活性HPLC測定方法準確、快速、可靠、靈敏度高。

銀杏，雄株，葉片，類黃酮O－甲基轉移酶(FOMT)活性，高效液相色譜

銀杏(Ginkgo biloba L.)素有“活化石”之稱，集食用、保健、藥用、生態和觀賞等價值于一體。其葉片已得到規模化開發利用并發展成為集約化、標準化經營的國際性重大產業［1－3］。銀杏葉中類黃酮是次生代謝產物，是銀杏葉的主要功能性成分。其主要包括單黃酮、雙黃酮和兒茶素等3類。其中具有生物活性的單黃酮類化合物主要由山奈酚(kaempferol)、槲皮素(quercetin)和異鼠李素(isorhamnetin)等黃酮苷元及其與有關糖類結合而成的糖苷組成(圖1)。……