冷脅迫對冷凍干燥羅伊氏乳酸桿菌細胞膜流動性的影響

李寶坤，田豐偉，劉小鳴，趙建新，張 灝，宋元達，陳 衛(wèi)，*

(1.江南大學食品學院，食品科學與技術國家重點實驗室，江蘇無錫214122; 2.石河子大學食品學院，新疆石河子832000)

冷脅迫對冷凍干燥羅伊氏乳酸桿菌細胞膜流動性的影響

李寶坤1，2，田豐偉1，劉小鳴1，趙建新1，張 灝1，宋元達1，陳 衛(wèi)1，*

(1.江南大學食品學院，食品科學與技術國家重點實驗室，江蘇無錫214122; 2.石河子大學食品學院，新疆石河子832000)

以DPH(1，6－二苯基－1，3，5－己三烯)為熒光探劑，優(yōu)化了測定羅伊氏乳酸桿菌細胞膜流動性的條件，其最佳測定條件為:激發(fā)波長360nm，發(fā)射波長430nm，菌濃度OD 0.8，30℃孵育時間為20min。同時研究冷脅迫處理對冷凍干燥存活率。細胞活力及細胞膜流動的影響，研究表明冷脅迫能改善乳酸菌的冷凍干燥存活率，同時在一定的條件下，凍干后細胞的流動性也有所改變，說明經(jīng)過一定的冷脅迫處理后，增加了細胞的抗性，從而提高細胞的冷凍存活率。

冷脅迫，羅伊氏乳酸桿菌，DPH，細胞膜流動性，冷凍干燥

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

羅伊氏乳酸桿菌(Lactobacillus reuteri) 本實驗室保存;培養(yǎng)基 MRS;1，6－二苯基－1，3，5－己三烯DPH，Aldrich公司;四氫呋喃、其他試劑 均為分析純。

650－60熒光分光光度計 日本，日立有限公司;冷凍干燥機 美國，LABCONCO有限公司;2450紫外－可見光分光光度計 島津國際貿(mào)易(上海)有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 脅迫處理 菌體培養(yǎng)18h(穩(wěn)定前期)后，經(jīng)過離心濃縮，加入15%蔗糖(w/v)作為保護劑，分裝為9份，其中1份立即在－80℃預凍，其余分別放在4℃與10℃進行冷脅迫處理，經(jīng)過1、2、3、4h處理后，放入－80℃預凍后進行冷凍干燥

1.2.2 凍干存活率計算 將凍干后的菌粉用PBS復水至凍干前相同體積，采用MRS倒平板法，37℃下培養(yǎng)48h，計數(shù)。……