木瓜蛋白酶水解馬鈴薯蛋白水解條件的研究

高丹丹，徐紀(jì)平，李貞子

(西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院，甘肅蘭州730030)

木瓜蛋白酶水解馬鈴薯蛋白水解條件的研究

高丹丹，徐紀(jì)平，李貞子

(西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院，甘肅蘭州730030)

采用馬鈴薯渣為原料提取馬鈴薯蛋白，用木瓜蛋白酶對其進(jìn)行水解。研究水解時間、溫度、pH和酶與底物濃度比(E/S)四個因素對水解過程的影響。以水解度(DH)為評價指標(biāo)，在單因素實驗的基礎(chǔ)上，采用Box－Benhnken響應(yīng)面分析法，優(yōu)化木瓜蛋白酶水解馬鈴薯蛋白質(zhì)的工藝條件。結(jié)果表明，在酶與底物濃度比為6000U/g時，最佳的水解條件為:溫度為64.70℃、pH為7.41、水解反應(yīng)時間3.12h。在此條件下，水解度為20.19%。

木瓜蛋白酶，馬鈴薯蛋白質(zhì)，水解度(DH)，響應(yīng)面，Box－Benhnken

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

馬鈴薯渣 甘肅省蘭州市榆中縣金芋淀粉廠提供;木瓜蛋白酶(500U/mg) 北京中生瑞泰科技有限公司;TCA、茚三酮、正丁醇、氫氧化鈉、鹽酸等其他試劑 均為分析純。

FE220型中型粉碎機(jī) 北京科偉永興儀器有限公司;3K18型高速冷凍離心機(jī) 德國Sigma公司; PB－10型精密pH計 Sartorius公司;GL－3250B型控溫磁力攪拌器 江蘇其林貝爾儀器制造有限公司; MP－500B型電子天平 上海天平總廠;Labconco Freezoneil型臺式凍干系統(tǒng) 照生公司;HH－SH－4型電熱恒溫水浴鍋 北京長安科學(xué)儀器廠;6010型紫外分光光度計 惠普有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 馬鈴薯蛋白的提取工藝［6］馬鈴薯渣粉20g→加600mL蒸餾水→用1mol/L的NaOH溶液調(diào)節(jié)體系的pH→浸提4h→4000r/min離心15min→分離出上清液→用1mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)上清液的pH為4.5→8000r/min離心15min→得到蛋白質(zhì)凝乳沉淀→冷凍干燥→馬鈴薯蛋白粉(蛋白質(zhì)含量91.07%)。

1.2.2 馬鈴薯蛋……