朱 婧,王青艷,,劉演景,申乃坤,陳桂光,梁智群,*
(1.廣西科學院國家非糧生物質能源工程技術研究中心,廣西南寧530007; 2.廣西大學生命科學與技術學院,廣西南寧530005)
響應面法分析優化米曲霉產β-葡萄糖苷酶液體發酵培養基
朱 婧1,王青艷1,2,劉演景2,申乃坤1,陳桂光2,梁智群2,*
(1.廣西科學院國家非糧生物質能源工程技術研究中心,廣西南寧530007; 2.廣西大學生命科學與技術學院,廣西南寧530005)
利用快速有效的響應面分析法對米曲霉ASPE0485產β-葡萄糖苷酶的發酵培養基進行優化,利用Plackett-Burman顯著因子實驗和Box-Behnken響應面分析優化了β-葡萄糖苷酶產生菌的發酵培養基,確定搖瓶發酵的最佳培養基組成為(%,w/v):玉米芯3.8%、大豆蛋白胨0.5%、KH2PO40.5%、MgSO4·7H2O 0.05%、CaCl20.05%、吐溫-80 0.27%和接種量5.3%;在此條件下發酵,得到酶活為21.1U/mL比原始酶活(17.65U/mL)提高了19.55%。
米曲霉,β-葡萄糖苷酶,響應面分析法
米曲霉ASPE0485(Aspergillus oryzae ASPE0485)廣西大學生命科學與技術學院食品與發酵工程研究所篩選并保藏;斜面培養基 10%(w/v)麩皮水煮30min,4層紗布過濾,濾液中添加2%葡萄糖,2%瓊脂,pH自然;種子培養基 50mL Mandels[4]微量元素鹽溶液中加入1%(W/V)植物蛋白胨,pH自然[5];基礎搖瓶培養基 3%(W/V)玉米芯,0.2%(W/V)植物蛋白胨,0.4%(W/V)KH2PO4,0.04%(W/V)CaCl2,0.04%(W/V)MgSO4,pH自然,定容至50mL[4]。

表2 PB設計及其實驗結果Table 2 Experimental design and results of the PB

表3 PB設計的回歸分析結果Table 3 Results of the PB regression analysis
1.2.1 培養方法 種子液培養方法:250mL三角瓶裝液量50mL,每瓶種子培養基的接種量為1×106個孢子,培養溫度為28℃,搖床轉速為160r/min,培養時間為12h。
發酵培養方法:250mL三角瓶裝液量50mL,種子液以2%(V/V)的接種量接入發酵培養基,培養溫度為28℃,搖床轉速為160r/min,培養時間為4d。
1.2.2 酶活力的測定
1.2.2.1 酶活力……