西門子ADVIA2120全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)和主要性能評(píng)價(jià)

馬 麗

（中國(guó)人民解放軍第一五O中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南洛陽(yáng)471003）

隨著中國(guó)醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)的迅速發(fā)展，開(kāi)展臨床實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可已成為大勢(shì)所趨。因此，作者對(duì)本院的西門子ADVIA 2120全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀按照國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（ICSH）制定的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 西門子ADVIA 2120全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及原裝配套試劑、質(zhì)控品；希森美康XE－2100全自動(dòng)血液分析儀及原裝配套試劑；雅培CD－3200全自動(dòng)血液分析儀及原裝配套試劑。

1.2 樣本采集

1.2.1 校準(zhǔn)用血 本科室健康人清晨空腹采集肘靜脈全血10 mL（EDTA－K2抗凝），將血液在一個(gè)容器內(nèi)混勻后分裝成3份，第1份用于定值，第2份用于校準(zhǔn)，第3份用于校準(zhǔn)后驗(yàn)證。室溫下保存，并保證4 h內(nèi)完成檢測(cè)。

1.2.2 評(píng)價(jià)用血 本院門診及住院患者清晨空腹采集肘靜脈全血的常規(guī)樣本剩余血（EDTA－K2抗凝）。

1.3 儀器準(zhǔn)備 待校準(zhǔn)的儀器為本院西門子ADVIA 2120全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，先開(kāi)機(jī)預(yù)熱15 min，清洗至本底空白全部符合要求；參考儀器為希森美康XE－2100全自動(dòng)血液分析儀以及對(duì)比儀器雅培CD－3200全自動(dòng)血液分析儀，先開(kāi)機(jī)預(yù)熱15 min，清洗至本底空白全部符合要求；具體要求為WBC≤0.3×109／L，RBC≤0.03×1012／L，HGB≤1.0 g／L，HCT≤0.005，PLT≤10.0×109／L。

1.4 方法

1.4.1 血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù) 全血細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞分類自動(dòng)分析嚴(yán)格按照西門子ADVIA2120、雅培CD－3200和希森美康XE－2100儀器操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4.2 血細(xì)胞自動(dòng)分析性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn) 西門子ADVIA 2120測(cè)定全血細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞分類的各種性能包括：精密度、線性范圍、攜帶污染率、總重復(fù)性和可比性，均嚴(yán)格按照ICSH制定的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，分析所有結(jié)果均采用配對(duì)t檢驗(yàn)，回歸分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 精密度測(cè)定 （1）批內(nèi)精密度測(cè)定：選用本院住院患者常規(guī)樣本剩余新鮮全血并已知是高、中、低值的樣本各1份，將其充分混勻，在西門子ADVIA 2120全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀用全血模式手動(dòng)測(cè)定方式，連續(xù)測(cè)定10次，按精密度＝標(biāo)準(zhǔn)差／均值×100%計(jì)算，結(jié)果滿足1／4美國(guó)臨床檢驗(yàn)修正法規(guī)（1／4CLIA′88），WBC≤3.50%，RBC≤1.50%，HGB≤1.75%，HCT≤1.50%，PLT≤6.25%）要求。經(jīng)計(jì)算各參數(shù)批內(nèi)精密度均滿足要求，見(jiàn)表1。（2）批間精密度測(cè)定：取西門子ADVIA 2120原裝中值質(zhì)控品1支，每日充分混勻在西門子ADVIA2120全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀用全血模式自動(dòng)測(cè)定方式，測(cè)定1次。滿10d后按精密度＝標(biāo)準(zhǔn)差／均值×100%計(jì)算，結(jié)果應(yīng)滿足1／3 CLIA′88（WBC≤5.00%，RBC≤2.00%，HGB≤2.30%，HCT≤2.00%，PLT≤8.30%）要求。經(jīng)計(jì)算得到WBC＝3.25%，RBC＝1.56%，HGB＝1.89%，HCT＝1.39%，PLT＝5.26%，各參數(shù)批間精密度均滿足要求。

表1 西門子ADVIA 2120測(cè)定批內(nèi)精密度測(cè)定結(jié)果（%）

2.2 攜帶污染率 按照ICSH推薦方法，樣本制備。選本院住院患者常規(guī)樣本剩余新鮮全血并已知高值和低值樣本各1份，將高值樣本混勻后在西門子ADVIA 2120全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀用全血模式自動(dòng)測(cè)定方式，連續(xù)測(cè)定3次，記錄為I1、I2、I3，然后立即取低值樣本混勻后在西門子ADVIA 2120全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀用全血模式自動(dòng)測(cè)定方式，測(cè)定3次，記錄為J1、J2、J3，然后按公式：攜帶污染率（CO%）＝（J1－J3）／（I3－J3）×100%，分別計(jì)算攜帶污染率。見(jiàn)表2。

表2 西門子ADVIA 2120測(cè)定攜帶污染率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.3 線性范圍（即稀釋效果） 將選用本院門診患者常規(guī)樣本剩余新鮮全血并已知是高濃度的樣本1份，移去部分血漿后充分混勻，用西門子ADVIA 2120稀釋液對(duì)倍稀釋成100%、80%、60%、40%、20%、10%共6個(gè)稀釋濃度，混勻后由低濃度至高濃度分別進(jìn)行測(cè)定，每個(gè)濃度各測(cè)定3次，取后2次結(jié)果的平均值作為測(cè)定值。以100%濃度樣本的測(cè)定值×稀釋度為期望值，并將WBC、RBC、HGB、HCT、PLT的測(cè)定值與期望值間作線性回歸分析得到相關(guān)系數(shù)（r），要求r≥0.995。經(jīng)計(jì)算測(cè)定值與期望值的相關(guān)性良好，符合要求。見(jiàn)表3。

表3 西門子ADVIA 2120測(cè)定線性范圍實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.4 總重復(fù)性

2.4.1 選用本院住院患者常規(guī)樣本剩余新鮮全血并已知是高、低值的樣本各5份，中值樣本10份，按常規(guī)方法全血模式自動(dòng)測(cè)定方式測(cè)定，記錄結(jié)果，再將樣本室溫放置2、4 h后再測(cè)定，記錄結(jié)果。按下列公式計(jì)算：（1）SSQ＝∑（各測(cè)定值）2－∑（各樣本三次合計(jì)）2／n；（2）CV%＝均值｝×100%；結(jié)果需滿足1／4CLIA′88要求。

2.4.2 經(jīng)計(jì)算得到WBC＝3.15%，RBC＝0.89%，HGB＝1.12%，HCT＝0.79%，PLT＝4.56%，各項(xiàng)參數(shù)總重復(fù)性均符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

表4 西門子ADVIA 2120與希森美康XE－2100以及雅培CD－3200的相關(guān)性

表5 西門子ADVIA 2120與希森美康XE－2100的r值比較

2.5 可比性分析[1]每天按比例隨機(jī)選取本院門診及住院患者常規(guī)樣本剩余新鮮全血樣本8份，收集后2 h內(nèi)，分別在西門子ADVIA 2120、希森美康XE－2100以及雅培CD－3200采用全血模式自動(dòng)測(cè)定方式，按1號(hào)至8號(hào)再8號(hào)至1號(hào)的順序測(cè)定，取2次結(jié)果均值，共測(cè)定5 d。使用統(tǒng)計(jì)軟件分析西門子ADVIA 2120與希森美康XE－2100的40次結(jié)果的相關(guān)性，以及西門子ADVIA 2120與雅培CD－3200的40次結(jié)果的相關(guān)性，要求r≥0.975。經(jīng)計(jì)算5個(gè)測(cè)定參數(shù)均有良好的相關(guān)性，見(jiàn)表4。

2.6 準(zhǔn)確性 隨機(jī)選取本院門診及住院患者常規(guī)樣本剩余新鮮全血樣本40份，相同條件下，同一操作人員，分別采用全血模式自動(dòng)測(cè)定方式在西門子ADVIA 2120和參考儀器希森美康XE－2100上測(cè)定，各測(cè)定1次，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，配對(duì)t檢驗(yàn)，r值均能達(dá)到儀器出廠前的實(shí)驗(yàn)值，WBC、RBC、HGB、HCT、PLT 5項(xiàng)參數(shù)結(jié)果比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表5。

3 討 論

按照ISO15189要求，臨床實(shí)驗(yàn)室在建立或?qū)υ蟹治鱿到y(tǒng)進(jìn)行改進(jìn)時(shí)，必須對(duì)分析方法的分析性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。加之環(huán)境如運(yùn)輸、搬動(dòng)和安裝過(guò)程變化的影響，儀器進(jìn)樣系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)以及其他部件都有可能發(fā)現(xiàn)變化，導(dǎo)致其準(zhǔn)確度降低、偏差加大，實(shí)驗(yàn)室在使用前應(yīng)通過(guò)對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)的性能評(píng)價(jià)和校準(zhǔn)，檢測(cè)結(jié)果能達(dá)到臨床實(shí)驗(yàn)需求[2]，方可投入使用。用能夠溯源的配套校準(zhǔn)品，校準(zhǔn)本實(shí)驗(yàn)室的參考儀器XE－2100和某醫(yī)院的比對(duì)儀器CD－3200作為溯源參考檢測(cè)系統(tǒng)，對(duì)本實(shí)驗(yàn)室用于常規(guī)檢測(cè)的血細(xì)胞分析儀進(jìn)行比對(duì)和必要的校準(zhǔn)[3]。用“定值”的健康人新鮮全血進(jìn)行儀器的溯源傳遞，為保證多臺(tái)儀器測(cè)定結(jié)果之間的可比性提供了一條可行的途徑[4]。新鮮全血樣本作為校準(zhǔn)物和質(zhì)控物理論上很適合，但穩(wěn)定性差，為了保證校準(zhǔn)和性能評(píng)價(jià)的有效性、樣本的均一性和穩(wěn)定性，作者把檢測(cè)時(shí)間控制在4 h內(nèi)[5]，這樣可以保持樣本的新鮮，避免因固定、保存處理所帶來(lái)的檢測(cè)誤差。

通過(guò)本次用臨床新鮮全血系統(tǒng)評(píng)價(jià)西門子ADVIA 2120全自動(dòng)血液分析儀可以發(fā)現(xiàn)[5]，本機(jī)自動(dòng)沖洗系統(tǒng)良好，各參數(shù)均具有良好的線性（r≥0.995），且攜帶污染率均小于1.00%；其總重復(fù)性滿足CLIA′88要求；批內(nèi)精密度均滿足1／4 CLIA′88要求，同時(shí)批間精密度均滿足1／3 CLIA′88要求；在與雅培CD－3200以及希森美康XE－2100可比性實(shí)驗(yàn)中，各參數(shù)差異均有良好的相關(guān)性；在與希森美康XE－2100準(zhǔn)確性實(shí)驗(yàn)中，各參數(shù)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。綜上可見(jiàn)西門子ADVIA 2120各項(xiàng)評(píng)價(jià)試驗(yàn)均達(dá)到評(píng)價(jià)要求，能滿足臨床診斷預(yù)后及治療的需要，可以投入使用。

[1]彭黎明，蔣能剛.多臺(tái)血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)方法的建立[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2005，28（5）：539－542.

[2]王文娟，李雪芬.新鮮血比對(duì)方法在血液分析儀室內(nèi)質(zhì)量控制中的應(yīng)用[J]，浙江大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2008，37（1）：88－92.

[3]王華梅.應(yīng)用新鮮全血對(duì)血液分析儀質(zhì)控檢測(cè)溯源性傳遞的評(píng)價(jià)[J].福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，43（4），331－334.

[4]葉應(yīng)嫵.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：141.

[5]高原，楊劍敏.應(yīng)用新鮮全血對(duì)多臺(tái)血液分析儀比對(duì)的臨床應(yīng)用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2008，23（3）：295－297.