正交試驗優(yōu)選復(fù)方魚腥草顆粒中連翹揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合工藝

宋寧寧，許揚彪（廣西壯族自治區(qū)食品藥品檢驗所，南寧 530021）

正交試驗優(yōu)選復(fù)方魚腥草顆粒中連翹揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合工藝

宋寧寧＊，許揚彪（廣西壯族自治區(qū)食品藥品檢驗所，南寧 530021）

目的：研究β-環(huán)糊精（β-CD）對復(fù)方魚腥草顆粒中連翹揮發(fā)油的包合工藝。方法：以β-CD與揮發(fā)油的配比、包合時間、包合溫度、加水量為考察因素，以揮發(fā)油收得率和包合率的綜合評分為評價指標(biāo)，采用正交試驗優(yōu)選工藝。結(jié)果：優(yōu)選的工藝為揮發(fā)油與β-CD的比為10mL∶80g、包合時間為4h、包合溫度為60℃、加水量為β-CD的8倍。結(jié)論：所選工藝簡單、可行，可有效地防止揮發(fā)油有效成分的散失。

復(fù)方魚腥草顆粒；連翹揮發(fā)油；β-環(huán)糊精；正交試驗；包合工藝

復(fù)方魚腥草顆粒由魚腥草、黃芩、板藍根、金銀花、連翹5味中藥組成，其中魚腥草、連翹、金銀花3種中藥均含揮發(fā)油。連翹含揮發(fā)油3.8%[1]，魚腥草含揮發(fā)油0.0049%[2]，干品金銀花含揮發(fā)油小于0.3%[3]。由于魚腥草、金銀花的揮發(fā)油含量過低（均小于0.5%），故本試驗僅對連翹提取揮發(fā)油。原工藝是將揮發(fā)油噴灑在顆粒上悶放一定時間，然后密封包裝，這樣的成品在貯藏過程中較易損失有效成分而影響療效。將中藥的揮發(fā)油與β-環(huán)糊精（β-CD）制成包合物防止其散失的技術(shù)已廣泛應(yīng)用[4～10]，為了提高揮發(fā)油在制劑中的穩(wěn)定性，筆者用β-CD對復(fù)方魚腥草顆粒中的連翹揮發(fā)油進行包合，采用正交試驗選擇包合工藝的最佳條件。

1 儀器與試藥

GC-14BC氣相色譜（GC）儀、C-R6A色譜數(shù)據(jù)處理儀（日本島津公司）；6511電動攪拌機（上海地理模型廠）。

連翹購自廣西南寧市藥材批發(fā)站，經(jīng)廣西壯族自治區(qū)食品藥品檢驗所韋家福副主任藥師鑒定為真品；β-CD（廣東郁南縣環(huán)糊精廠，純度：98%）；其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 揮發(fā)油的提取

取連翹藥材粗粉適量，按2010年版《中國藥典》（一部）附錄揮發(fā)油測定法項下方法提取揮發(fā)油經(jīng)無水硫酸鈉脫水，即得。

2.2 包合物制備方法

稱取一定量的β-CD，加入相應(yīng)量的蒸餾水，水浴加熱使溶解，將溶液降溫至60℃后，恒溫電動攪拌，緩緩加入經(jīng)無水乙醇溶解的連翹揮發(fā)油，攪拌一定時間后，置冰箱冷藏24h，抽濾，用少量水洗，抽干，收集濾渣，置40℃干燥箱中干燥4h，即得包合物成品。包合率按下式計算：包合率＝包合物實際量（g）/（β-CD量（g）+揮發(fā)油投入量（mL）×揮發(fā)油相對密度）×100%。

2.3 揮發(fā)油收得率的測定

2.3.1 包合物中揮發(fā)油的含量測定 稱取一定量包合物，置500mL燒瓶中，加入蒸餾水300mL，按2010年版《中國藥典》（一部）附錄揮發(fā)油測定法項下甲法測定包合物實際含油量。

2.3.2 揮發(fā)油空白回收率和收得率的測定 精密量取連翹揮發(fā)油1mL，同“2.3.1”項下方法操作，按下式計算揮發(fā)油空白回收率和收得率：揮發(fā)油空白回收率＝收集揮發(fā)油量（g）/加入揮發(fā)油量（mL）×100%；揮發(fā)油收得率＝包合物中實際含油量（mL）/（揮發(fā)油投入量（mL）×空白回收率）×100%。試驗中揮發(fā)油空白回收率為90%。

2.4 正交試驗優(yōu)選最佳包合工藝

2.4.1 因素水平的選擇 選擇β-CD與揮發(fā)油的配比（A）、包合時間（B）、包合溫度（C）、加水量（相當(dāng)于β-CD量的倍數(shù)，D）為考察因素，每個因素設(shè)計3個水平，采用正交試驗優(yōu)選工藝。因素水平見表1。

表1 因素水平Tab 1Factors and levels

2.4.2 正交試驗結(jié)果 按“2.2”、“2.3”項下方法計算正交試驗中各包合物的包合率和揮發(fā)油收得率，以二者的綜合評分為評價指標(biāo)，權(quán)重系數(shù)分別定為0.5和0.5。正交試驗結(jié)果見表2；方差分析結(jié)果見表3。

表2 正交試驗結(jié)果Tab 2Results of orthogonal design

表3 方差分析結(jié)果Tab 3 Results of analysis of variance

由表2、表3可知，各因素的影響大小依次為B＞C＞D＞A，且B、C因素對工藝有顯著性影響，而A、D因素影響不顯著，最佳包合工藝為A2B3C3D1。為節(jié)省材料，A取最小因素，即揮發(fā)油與β-CD的比為10mL∶80g。故優(yōu)化后的工藝確定為A1B3C3D1，即揮發(fā)油與β-CD的比為10mL∶80g；包合時間為4h，包合溫度為60℃，加水量為β-CD的8倍。

2.4.3 工藝驗證試驗 按上述優(yōu)選工藝對連翹揮發(fā)油進行3次包合，按“2.2”、“2.3”項下方法計算得包合率分別為83.2%、81.6%、83.8%，揮發(fā)油收得率分別為93.2%、92.8%、95.7%。這與正交試驗結(jié)果相符合，表明優(yōu)選條件合理。

2.5 包合物的組分分析

2.5.1 供試品溶液的制備 分別取“2.1”項下連翹揮發(fā)油（包合前揮發(fā)油）、“2.4.3”項下的包合物并按“2.3.1”項下方法蒸餾出的揮發(fā)油（包合后揮發(fā)油），作為供試品溶液。

2.5.2 GC分析 色譜柱：CBP1-M25-025石英毛細管柱（25m×0.2mm，0.25μm）；柱溫：60℃→240℃（6℃·min－1，30min）；氫氣：40mL·min－1；空氣：400mL·min－1；檢測室、氣化室溫度均為270℃；載氣：氮氣；流速：1.0mL·min－1；檢測器：火焰離子化檢測器；進樣量：0.5μL。將包合前、后揮發(fā)油分別進樣檢測，所得圖譜顯示主要色譜峰基本一致，表明經(jīng)β-CD包合后的連翹揮發(fā)油其組分沒有明顯的變化，基本上保持了原揮發(fā)油的組分。

3 討論

經(jīng)GC法對包合物的組分進行分析，表明揮發(fā)油包合前、后的主要成分基本一致，未改變原揮發(fā)油的質(zhì)量。

穩(wěn)定性試驗表明[11]，包合物的抗光解性、熱穩(wěn)定性和濕穩(wěn)定性明顯高于揮發(fā)油直接噴灑在顆粒上悶放一定時間的混合物?？梢姡?CD的包合物可有效地防止連翹揮發(fā)油的散失，提高其穩(wěn)定性和利用率。

整粒后加入包合物會造成顆粒色澤有差異，將連翹包合物與其他物料制成軟材后制粒，可得色澤均勻的顆粒。經(jīng)包合后的揮發(fā)油穩(wěn)定性好，利于制劑的貯藏。

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Optimization of the β-cyclodextrin Inclusion Technology for Essential Oil of Forsythia suspensa in Compound Yuxingcao Granules by Orthogonal Test

SONG Ning-ning，XU Yang-biao（Guangxi Institute for Food and Drug Control，Nanning 530021，China）

OBJECTIVE：To study the inclusion technology for the essential oil of Forsythia suspensa in Compound yuxingcao granules using β-cyclodextrin.METHODS：The inclusion technology was optimized with ratio of β-CD to oil，inclusion time，inclusion temperature and ratio of water to β-CD as factors using the yield of essential oil and clathration percentage as index.RESULTS：The optimal condition：ratio of essential oil to β-CD was 10mL∶80g；the process lasted for 4hours at 60℃；8times of water respect to β-cyclodextrin was added.CONCLUSION：The technology is proved to be simple，feasible and effective to the dissipation of avoid active gradients from essential oil.

Compound yuxingcao granules；Essential oil of Forsythia suspensa；β-cyclodextrin；Orthogonal test；Inclusion technology

R284.2；R283.62

A

1001-0408（2012）11-0997-02

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2012.11.15

2011-05-06

2011-09-05）