馬銀花種子萌發(fā)試驗

楊 華，宋緒忠，余家中，趙彩芳，柳新紅

（1.浙江省林業(yè)科學(xué)研究院，浙江 杭州 310023；2.浙江省淳安縣富溪林場，浙江 淳安 311701）

杜鵑花是杜鵑花科（Ericaceae）杜鵑花屬（Rhododendron）植物的總稱，全世界約有 1 000種，我國約有542種，常綠杜鵑亞屬250種，有鱗杜鵑花亞屬近200種，馬銀花亞屬l2種，羊躑躅亞屬1種。全國除新疆和寧夏外，南北各地區(qū)均有分布，其中云南、西藏、四川 3省種類及特產(chǎn)種較多[1]。杜鵑花是我國傳統(tǒng)十大名花之一，被譽為“花中西施”，近年來，杜鵑花在園林綠化、室內(nèi)陳設(shè)等方面的廣泛應(yīng)用，促進了國內(nèi)杜鵑花產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，野生杜鵑引種馴化工作有所增加[2～3]。引種栽培主要有下山移栽、扦插繁殖和播種繁殖等方法，引種幼苗能使利用期提前，但它的適應(yīng)性較種子育苗差，并且因一些野生杜鵑花資源非常有限，引種馴化以播種繁殖為主，另外在育種和嫁接用砧木時也會用到播種苗，關(guān)于杜鵑花的種子繁殖技術(shù)研究報道也不少[4～8]。

馬銀花（R.ovatum）是一類常綠灌木，為杜鵑花屬中的中國特有種。其花色有淡紫色、紫色、粉白色，花量大，花色雅，有淡香，觀賞價值極高。同時，馬銀花具有耐修剪，萌枝能力強、抗污染的優(yōu)點，適合在城市公園、道路等環(huán)境栽培，開發(fā)利用潛力較大。目前還未有關(guān)于其種子繁殖方面的報道。本文從種子形態(tài)的描述和不同培養(yǎng)基質(zhì)、不同貯藏時間、不同培養(yǎng)溫度對萌發(fā)率的影響等方面開展研究，為指導(dǎo)馬銀花的引種馴化工作提供資料，促進其在園林綠化領(lǐng)域的應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1 材料

部分馬銀花果實于2011年11月20日采自杭州植物園，自然放置，于11月28日放入4℃恒溫箱中貯藏。部分馬銀花果實于2011年10月20日采自浙江省林業(yè)科學(xué)研究院苗圃。

1.2 方法

1.2.1 種子觀察 用奧林巴斯顯微鏡BX51觀察種子形態(tài)，放大5.6倍。數(shù)100粒黃色種子，重復(fù)5次，用萬分之一電子天平稱重，換算成千粒重。

1.2.2 不同培養(yǎng)基質(zhì)的萌發(fā)試驗 選取剛采集的生長飽滿的果實（采自苗圃），取出黃色種子50粒，散在不同的基質(zhì)中，放入光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)條件：25℃，950 lux光照，溫度有±0.5℃的變動。基質(zhì)種類：放有濾紙的培養(yǎng)皿、腐殖土、泥炭、腐熟菌棒基質(zhì)。每天對基質(zhì)澆水一次，培養(yǎng)皿培養(yǎng)的則視濾紙干燥程度適時灑水。子葉出現(xiàn)的時間以第一株出現(xiàn)計算（以下同）。幼苗子葉期統(tǒng)計萌發(fā)率（以下同）。另有一部分種子直接播種在露天的腐殖土上，無采取其它措施。重復(fù)3次（以下同）。

1.2.3 不同貯藏時間的萌發(fā)試驗 果實貯藏0、1、2.5、5、6個月后，選取生長飽滿的果實，取出黃色種子50粒，散在放有濾紙的培養(yǎng)皿中，放入光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)條件：26℃，12 h，1 100 lux光照；夜晚24℃，12 h，700 lux光照，溫度有±0.5℃的變動。視濾紙干燥程度適時灑水。種子萌發(fā)率測定方法采用GB2772-1981規(guī)定辦法，以胚根突出種皮的長度與種子直徑相等為萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)（以下同）。種子萌發(fā)出現(xiàn)的時間以第一株出現(xiàn)計算（以下同）

1.2.4 不同培養(yǎng)溫度的萌發(fā)試驗 果實貯藏6個月后，選取生長飽滿的果實，取出黃色種子50粒，散在放有濾紙的培養(yǎng)皿中，放入光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)條件是950 lux光照，溫度分別為16、20、25、28℃，溫度有±0.5℃的變動。視濾紙干燥程度適時灑水。

1.2.5 統(tǒng)計分析 統(tǒng)計分析使用Excel2003及SPSS11.0軟件。

2 結(jié)果

2.1 種子特征

馬銀花種子呈紡錘形，扁平，無翅，被細條紋，種皮呈棕黃色。種子細小，長1.16 mm，寬0.41 mm，種子千粒重為0.052 8 g。

2.2 不同培養(yǎng)基質(zhì)的萌發(fā)結(jié)果

從表1可以看出，不同培養(yǎng)基質(zhì)對種子萌發(fā)速度影響不大，基本培養(yǎng)11 d后部分種子的子葉長出，同時種子進入快速萌發(fā)期，大量種子萌發(fā)。腐熟菌棒基質(zhì)相對萌發(fā)時間較長，需要多2 d，且萌發(fā)率相對較低，達不到50%。經(jīng)方差分析，不同培養(yǎng)基質(zhì)種子萌發(fā)率差異極顯著(P<0.01)。LSD多重對比顯示，培養(yǎng)皿、腐殖土、泥炭中的萌發(fā)率間無差異，但與腐熟菌棒的萌發(fā)率都呈極顯著差異。腐殖土、泥炭、腐熟菌棒三種基質(zhì)萌發(fā)的種子還未長出真葉就陸續(xù)死亡。

表1 不同培養(yǎng)基質(zhì)馬銀花種子萌發(fā)情況Table1 Germination time of R.ovatum seed on different culture media

2.3 不同貯藏時間的萌發(fā)結(jié)果

從表2可以看出，不同貯藏時間對種子萌發(fā)速度影響不大，培養(yǎng)8 d就有種子開始萌發(fā)，11 d子葉長出，同時種子進入快速萌發(fā)期，大量種子萌發(fā)。經(jīng)方差分析，不同貯藏時間種子萌發(fā)率無顯著差異。

表2 不同貯藏時間萌發(fā)結(jié)果Table2 Germination rate of R.ovatum seed treated with different storage time

2.4 不同培養(yǎng)溫度的萌發(fā)結(jié)果

從圖1可以看出，隨著培養(yǎng)溫度的升高，種子萌發(fā)時間和子葉長出時間逐漸縮短，28℃時萌發(fā)時間與25℃時相同，但子葉長出時間縮短了2 d。16℃時種子萌發(fā)時間是25℃和28℃的2倍。16 ～ 28℃溫度范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，萌發(fā)率逐漸降低，其中16 ～ 25℃溫度范圍內(nèi)變化較小，28℃時下降明顯，基本無發(fā)芽種子，25℃和28℃兩種溫度條件下的萌發(fā)率相差12.7倍。經(jīng)方差分析，不同培養(yǎng)溫度種子萌發(fā)率差異極顯著（P < 0.01）。LSD多重對比顯示，16、20、25℃時萌發(fā)率間無差異，但與28℃時的萌發(fā)率都呈極顯著差異。

圖1 不同培養(yǎng)溫度馬銀花種子萌發(fā)情況Figure1 Germination rate of R.ovatum seed with different culture temperature

3 討論

（1）有研究發(fā)現(xiàn)地床播種杜鵑花種子不僅萌發(fā)時間長、發(fā)芽率低、死苗嚴(yán)重（成苗率低），且幼苗后期生長較差，可能與地床的地溫低、排水不良、土壤板結(jié)等有關(guān)。本研究在10月底播種于露天腐殖土上的種子無一萌發(fā)，與外界氣溫低、晝夜變化大、土壤易板結(jié)有關(guān)，在種子萌發(fā)前可能已完全失去活性。在野外，自然更新的馬銀花小苗較少，也許與萌發(fā)條件不適宜有關(guān)。同時種在腐殖土和泥炭中的種子，發(fā)芽后生長近1個月后全都死亡，可能是基質(zhì)越來越板結(jié)，發(fā)芽種子難以繼續(xù)生長，成苗率低。張樂華等研究認為杜鵑播種繁殖以“腐殖土”基質(zhì)的發(fā)芽率最高，但基質(zhì)易板結(jié)，不利于幼苗生長，成功率較低。“腐殖土+苔蘚”基質(zhì)雖出苗率略低，但基質(zhì)保水保濕性強，成苗率高，幼苗生長健壯，抗逆性強，且雜草及病蟲害少，管理方便，是一種較理想的杜鵑播種育苗基質(zhì)[9]。

（2）張樂華等人研究發(fā)現(xiàn)隔年播種，種子萌發(fā)時間長（30 d，為采種后第二年播種的2倍），出苗率低（36%～ 37%，約為第二年播種的一半），說明杜鵑種子不耐儲藏，跨年度播種將影響種子的活力[9]。而耿興敏認為杜鵑花種子適宜在－18℃和4℃條件下進行貯藏，在這兩種溫度條件下貯藏4 ～ 5 a后發(fā)芽率并無顯著變化[10]。本研究將馬銀花果實置于4℃條件下貯藏0、1、2.5、5、6個月，發(fā)現(xiàn)對種子萌發(fā)時間、子葉長出時間、萌發(fā)率無明顯影響。但貯藏1 a以上是否有影響，則需進一步試驗研究。

（3）通過不同培養(yǎng)溫度的萌發(fā)試驗可以看出，隨著培養(yǎng)溫度的升高，種子萌發(fā)的時間和子葉長出的時間逐漸縮短，16 ～ 28℃溫度范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，萌發(fā)率逐漸降低，28℃時下降明顯。16 ～ 25℃溫度范圍內(nèi)無顯著差異。考慮萌發(fā)時間，本研究認為以25℃培養(yǎng)種子效果好。張樂華等人用泥盆播種47個杜鵑屬植物種子，以腐殖土為基質(zhì)，露天種植，3 ～ 30℃晝夜變化，從播種—種子萌發(fā)、萌發(fā)—子葉的平均時間分別為13.98、9.53 d[9]。并且他們提出種子的萌發(fā)速度與物種的系統(tǒng)位置有很大關(guān)系，在比較的幾個亞屬中馬銀花亞屬最慢（薄葉馬銀花、紅馬銀花、鹿角杜鵑為研究對象）[11]。本研究中，種子處在25℃左右的較為穩(wěn)定的溫度環(huán)境下，種子從播種—種子萌發(fā)、萌發(fā)—子葉的平均時間分別為8、11 d，馬銀花的萌發(fā)速度比他們的研究結(jié)果提早了6 d，說明適當(dāng)?shù)母邷夭⑶覝囟确€(wěn)定可以促進馬銀花萌發(fā)。部分杜鵑屬植物種子萌發(fā)研究結(jié)果也顯示[12]，種子萌發(fā)適宜溫度多為25℃，恒溫條件下萌發(fā)勢和萌發(fā)率均優(yōu)于變溫處理，適當(dāng)光照可促進種子萌發(fā)和幼苗健壯生長。但溫度太高，種子活性明顯下降，本研究中25℃和28℃時馬銀花的萌發(fā)率相差12.7倍，這與杜鵑屬植物喜冷涼忌高溫的習(xí)性相符合。

（4）杜鵑種子極小，種子萌動過程中必須經(jīng)常噴水保濕，確保種子濕潤和活力[13]。本研究用培養(yǎng)皿培養(yǎng)馬銀花種子，萌發(fā)率較高，與培養(yǎng)皿中濕度較高有關(guān)系。而其它基質(zhì)每天澆水一次，濕度從高到低的一天變化對種子萌發(fā)有一定的影響。但種子萌發(fā)后，濾紙的濕度應(yīng)保持在剛好浸潤的程度，否則新生長的根尖容易腐爛受損。

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