膠質母細胞瘤干細胞的分離、培養及其生物學特性

齊 玲，李蘊潛，金 宏，丁麗娟，于洪泉，溫 娜，劉 威

（1.吉林醫藥學院病理學教研室，吉林 吉林132013；2.吉林大學第一醫院神經外科，吉林 長春130021；3.吉林醫藥學院實驗中心，吉林 吉林132013）

膠質母細胞瘤干細胞的分離、培養及其生物學特性

齊 玲1，李蘊潛2，金 宏3，丁麗娟2，于洪泉2，溫 娜3，劉 威3

（1.吉林醫藥學院病理學教研室，吉林 吉林132013；2.吉林大學第一醫院神經外科，吉林 長春130021；3.吉林醫藥學院實驗中心，吉林 吉林132013）

目的：從人膠質母細胞瘤SC 326和SC 189細胞株分離培養干細胞，研究其自我更新、增殖和分化等生物學特性。方法：用無血清培養基培養人膠質母細胞瘤SC 326和SC 189細胞，檢測細胞形成神經球的能力。對培養3代以上的細胞（GSC）進行神經球細胞單細胞克隆形成率實驗；用第3代和第7代的細胞評價神經球單細胞克隆形成率；免疫熒光染色法檢測神經球細胞的干細胞標記物表達及多向分化能力。結果：無血清培養基培養24 h時SC 326、SC 189形成神經球樣細胞團，1周時神經球內細胞可達數百個，3代內神經球細胞SC 326的增殖率為（2.10±4.33）%、（4.03±4.14）%和（6.91±5.12）%，SC 189為（12.79±2.32）%、（15.78±3.25）%和（37.91±4.58）%；單細胞克隆形成率 GSC 326和 GSC 189分別為5.56%和8.33%，次級單細胞克隆形成率分別為9.89%和14.58%；GSC 326 P3和P7神經球克隆形成率最大值為（12.67±2.86）%和（20.44±1.73）%，GSC 189 P3和P7神經球克隆形成率最大值為（32.00±1.00）%和（42.67±5.03）%。免疫熒光染色，干細胞表面標記物CD133和神經巢蛋白呈強陽性表達，分化標記物膠質纖維酸性蛋白（GFAP）和神經元特異性類β－微管蛋白Ⅲ（β－TubulinⅢ）表達極弱。分化誘導后分化標記物GFAP和β－TubulinⅢ的表達呈陽性。結論：早期原代膠質母細胞瘤細胞株中存在少量具有自我更新、增殖和多向分化能力的細胞，這些細胞具有明顯的干細胞特性?！?br>