吳 靜,付海英,張英林,孫際童,楊 巍
(1.吉林大學白求恩醫學院免疫學系,吉林 長春130021;2.吉林大學第一醫院轉化醫學研究院,吉林 長春130021)
DNA-PKcs協同自身免疫調節因子調控小鼠腹腔巨噬細胞Toll樣受體的表達及其意義
吳 靜1,2,付海英1,張英林1,孫際童1,楊 巍1
(1.吉林大學白求恩醫學院免疫學系,吉林 長春130021;2.吉林大學第一醫院轉化醫學研究院,吉林 長春130021)
目的:探討小鼠腹腔巨噬細胞內DNA-PKcs協同自身免疫調節因子調控Toll樣受體(TLRs)的表達水平,闡明外周免疫系統中自身免疫調節因子的調控作用及其意義。方法:小鼠腹腔巨噬細胞分為pEGFPC1/m Aire轉染組、p EGFPC1/m Aire與negative control siRNA共轉染組、p EGFPC1/m Aire與DNA-PKcs siRNA共轉染組、p EGFPC1轉染組、p EGFPC1與negative control siRNA共轉染組和pEGFPC1與DNA-PKcs siRNA共轉染組,采用RT-PCR方法檢測各組小鼠腹腔巨噬細胞內TLR1~9的表達水平;采用脂質體轉染重組質粒p EGFPC1/m Aire和空載質粒p EGFPC1至小鼠腹腔巨噬細胞,采用RT-qPCR方法檢測2組細胞TLR1~9的表達水平;采用RT-qPCR方法檢測2組轉染細胞沉默DNA-PKcs前后TLRs的表達水平。結果:小鼠腹腔巨噬細胞能表達TLR1~9;與轉染pEGFPC1/m Aire組細胞比較,轉染自身免疫調節因子后巨噬細胞TLR1、3和8的表達水平增加(P<0.05),其他組TLRs表達水平無明顯變化(P>0.05);DNA-PKcs沉默后,轉染pEGFPC1/m Aire組細胞TLR1、3和8的表達水平較未沉默組明顯下降(P<0.05),而在轉染p EGFPC1的細胞內DNA-PKcs沉默前后TLR1-9表達水平均無明顯變化(P>0.05)。結論:在小鼠腹腔巨噬細胞內,自身免疫調節因子能夠調控TLR1、3和8的表達,其機制可能與DNA-PKcs協同作用有關。
自身免疫調節因子;巨噬細胞;Toll樣受體;協同分子
自身免疫調節因子(autoimmune regulator,Aire)作為一個重要的轉錄激活子,主要表達于胸腺髓質上皮……