船舶壓載艙中環境因子對夜光藻生長的影響研究

王洪超，嚴志宇

（1.燕山大學 環境與化學工程學院，河北 秦皇島 066004；

2.大連海事大學 環境科學與工程學院，遼寧 大連 116026）

船舶壓載艙中環境因子對夜光藻生長的影響研究

王洪超1，嚴志宇2

（1.燕山大學 環境與化學工程學院，河北 秦皇島 066004；

2.大連海事大學 環境科學與工程學院，遼寧 大連 116026）

采用正交實驗法分別從氣液接觸面積與液體體積比、溫度和初始濃度3個影響因子4個水平對夜光藻的生長變化率進行研究。研究結果表明，在實驗范圍內，氣液接觸面積與液體體積比為0、溫度為17℃、初始濃度為10×106cell/L時，藻細胞濃度遞減速率最大；影響夜光藻細胞濃度變化速率因素的強弱順序是:初始濃度＞氣液接觸面與體積比＞溫度。

壓載艙；環境因子；夜光藻；赤潮；外來物種

船舶為了保證在海上安全航行而在壓載艙中注入的海水被稱為壓載水[1]。據統計，世界范圍內每年排放的壓載水約120億t。然而，隨著船舶航行速度的提高，壓載水往往也是打破地理性隔離造成外來物種入侵的重要載體。已經證實平均每天由船舶而傳播的物種約有4 500種，已經確認約有500種生物物種是由船舶壓載水傳播的[2]。赤潮生物作為壓載水中外來物種之一，不但打破了當地原有的生態平衡，也增加了發生赤潮的風險。

壓載水引發外來生物入侵是當今生物入侵領域的研究熱點，同時外來赤潮種作為典型的外來入侵生物也漸漸成為人們的研究對象，但目前國內的大部分研究主要集中在如何通過物理、化學、生物的方法處理壓載水中的外來生物，而國內對于海洋生物的研究又局限于模擬自然條件對海洋生物的影響，對壓載艙中環境因子對外來生物生長影響的研究還屬空白[3-7]。

本文主要研究藻類在無光的環境條件下，壓載艙環境因子對藻細胞濃度變化的影響大小。選取大連附近海域常見赤潮藻夜光藻作為研究對象。藻種由大連海事大學提供；將藻液導入不同環境條件下的容器中，采用黑布對容器進行遮光處理，每天搖晃容器2次，采用顯微鏡計數的方法測定藻細胞的濃度，并作記錄。

1 材料與方法

1.1 藻種及培養

所用的藻類為鏈狀亞歷山大藻，由大連海事大學環境科學與工程學院提供。采用f/2營養液配方，培養條件為（18±1）℃，明暗周期為12 h，光照強度約為2 000 Lx，在整個培養過程中，各操作步驟均進行滅菌處理。

1.2 實驗方法

本實驗的設計采用正交實驗法，具體實驗設計方案如表1所示。

表1 實驗設計方案

1.3 測量與計算方法

藻細胞濃度計算公式為:

式中，Y為藻細胞濃度，cells/L；N為10μL中的藻細胞數；N×102×103為1 L溶液中的藻細胞數。

2 結果與討論

2.1 實驗結果

2.1.1 三因子對夜光藻細胞生長的影響

氣液接觸面積與液體體積比、溫度、藻的初始濃度在不同條件組合下對夜光藻細胞的生長變化有顯著影響。如圖1所示，藻細胞的初始濃度為 10×106cells/L、 5×106cells/L、 1×106cells/L、0.5×106cells/L時分別在第8天、第7天、第5天和第3天濃度為0；圖中存在波動性較大的點，如實驗1的第0天、第1天、第2天，實驗5的第1天、第2天，實驗9的第8天。實驗1的第2天濃度遠遠高于第0天濃度，這可能是由于高濃度藻溶液稀釋時搖晃不均勻造成的。實驗5、實驗9的個別點的波動性不是很大，可能是采樣不均勻或者顯微鏡計數時的誤差造成的造成的。

如圖2所示，藻細胞濃度的變化率都位于0點以下，即負數；第0天和第1天之間藻細胞濃度的變化率的數值變化較大，第1天以后變化趨于平緩，最終趨于0。圖中，實驗1曲線的變化率位于最下端（氣液接觸面積與液體體積比為0，實驗溫度為17℃，初始濃度為10×107cells/L）。

2.1.2 藻細胞濃度變化的極差分析

本文采用極差分析方法對實驗結果進行分析，壓載艙中各環境影響因子對藻細胞濃度變化率的影響通過極差值R的大小表示，R值越大對藻細胞濃度變化率的影響就越大；反之，對藻細胞濃度變化率的影響就越小。統計及分析結果如圖3、表2所示，當氣液接觸面積與液體體積比為0時，細胞變化率最大為-1.135；當溫度為17℃時，細胞變化率最大為-1.096；初始濃度為10×106cell/L時，細胞變化率最大為-2.081。這表明實驗范圍內，壓載艙環境中夜光藻細胞變化率最大條件為:氣液接觸面積與液體體積比0，溫度17℃，初始濃度10×106cell/L。細胞環境因子的極差值由大到小分別為:R初始濃度＞R氣液接觸面與體積比＞R溫度。這表明壓載艙環境下影響夜光藻細胞濃度變化率的主要因子是藻細胞的初始濃度，其次是氣液接觸面與液體體積比，最后是溫度。

圖1 不同培養條件下夜光藻細胞的生長曲線

圖2 不同培養條件下的夜光藻細胞變化率

圖3 藻細胞濃度變化率

表2 正交實驗結果

3 結論

實驗結果表明，不同的實驗條件下，藻細胞濃度的變化速率不同；藻細胞的初始濃度不同，濃度趨于0的時間也不同。實驗條件下，夜光藻的最不適宜環境條件是液接觸面積與液體體積比為0時，溫度為17℃，初始濃度為10×106cell/L；3個影響因子中藻細胞的初始濃度對藻細胞濃度變化率影響最大，其次是氣液接觸面與液體體積比，最后是溫度。藻細胞的初始濃度為10×106cells/L、5×106cells/L、 1×106cells/L、 0.5×106cells/L 時分別在第8天、第7天、第5天和第3天濃度為0，這與胡嵐嵐、徐曉曼等人[8-11]的研究結論相吻合，即船舶航行時間小于10天時船舶壓載水為高風險。但是，夜光藻并不同于壓載水中總的生物量，實驗條件下，它的平均風險天數小于8天。由于現實中影響壓載水中赤潮藻類存活的因素不只上述3個方面，還包括生物天敵、生物本身的生物特性等方面的綜合作用。針對具體船舶壓載艙內壓載水中其它生物對夜光藻細胞濃度變化的影響有待于進一步研究。

[1]劉瑀，胡嵐嵐，宋成文.船舶壓載水風險評估[A].中國航海學會2007年度學術交流會優秀論文集，2007:10-113.

[2]胡承兵.阻止“搭乘”于壓載水中的外來生物入侵者[J].交通環保，1999，20（ 4） :35-39.

[3]薛曉紅，白敏菂，楊波，等.羥基自由基殺滅壓載水赤潮入侵生物試驗研究[J].交通環保，2004，25（ 6）:1-3.

[4]韓笑天，顏天，鄒景忠，等.夜光藻（Amphidiniumcarterae Hulburt)形態特征及其生長特性研究[J].海洋與湖沼，2004，35（3）:279-283.

[5]徐曉曼.全球壓載水管理項目風險評估活動情況介紹[J].交通環保，2002，23（ 4）:39-41.

[6]龍華.船舶壓艙水引入外來藻類的危害及監測[J].植物檢疫，2005，19（ 5） :289-291.

[7]王寧，白敏冬，黃桂兵，等.解決壓載水微生物入侵性傳播研究的國際動態[J]. 交通環保，2003，24（ 5）:37-40.

[8]龍華，周燕，余駿，胡益峰，等.2001～2007年浙江海域赤潮分析[J]. 海洋環境科學，2008，27（ S1） :1-4.

[9]徐輝，王日東.大連灣海域赤潮狀況及預測模式研究[J].科技咨詢導報，2007（ 16）:87.

[10]黃姿，朱白婢，孫建波，等.赤潮的生物防治及其研究進展[J].安徽農學通報，2008，14（ 15）: 82-84，130.

[11]文世勇，趙冬至，陳艷攏，等.基于AHP法的赤潮災害風險評估指標權重研究[J]. 災害學，2007，22（ 2）:9-14.

Environmental Factors' Effects of the Ship's Ballast Tank on the Grow th of Noctiluca Scientillans

Wang Hongchao1，Yan Zhiyu2
（1.School of Environmental and Chemical Engineering，Yan Shan University，
Qinhuangdao Hebei 066004， China；
2.College of Environmental Science and Engineering，Da Lian Maritime University，DaLian Liaoning 116026， China）

The paper researched the growth rate of Noctiluca which is caused by gas-liquid contact area and liquid volume ratio， temperature and initial concentration by Orthogonal experimental method.It has three factors and four levels.The results showed that decreasing rate of algal cell concentration is maximum when gas-liquid contact area and liquid volume ratio is 0，temperature is 17 ℃ and the initial concentration is 10×106cell/L.The factor's order that affect Noctiluca cell concentration is the initial concentration，gas-liquid contact area and liquid volume ratio and temperature.

ballast tank； environment factor； noctiluca； red tide； alien species

X835

A

1008-813X（2012）01-0062-04

10.3969/j.issn.1008-813X.2012.01.019

2011-08-25

王洪超（1984-），男，黑龍江省綏化市人，畢業大連海事大學環境科學與工程專業，碩士研究生，助理實驗師，主要研究船舶壓載水風險評價。