膠體金法與ELISA法檢測豬瘟抗體結果對比分析

摘要：為了比較膠體金法與ＥＬＩＳＡ法檢測豬瘟抗體的結果符合率，以了解膠體金法的特異性與敏感度，用膠體金法和ＥＬＩＳＡ法平行檢測受檢豬血清標本豬瘟抗體滴度。結果表明，膠體金法和ＥＬＩＳＡ法檢測豬瘟抗體的結果符合率為８６．６％，用膠體金法檢測豬瘟抗體存在漏檢及誤診（即假陰性、假陽性）。說明膠體金法較ＥＬＩＳＡ法敏感度、特異度低，用膠體金法檢測豬瘟抗體滴度存在一定程度的漏檢率及誤診率，膠體金法只能初步篩查豬瘟抗體，有一定技術力量的縣級獸醫實驗室使用ＥＬＩＳＡ法檢測豬血樣的豬瘟抗體滴度更為合適，對于膠體金法篩查陰性的豬血樣，建議用ＥＬＩＳＡ法復檢以防漏檢。

關鍵詞：豬瘟抗體；膠體金法；ＥＬＩＳＡ法檢測；特異性；敏感性

中圖分類號：Ｓ８５４．４＋３ 文獻標識碼：A 文章編號：１００７－２７３Ｘ（２０12）08-0004-02

近幾年來，隨著各級政府對動物疫病監測工作的日益重視，尋求一種快速、方便、敏感的實驗方法檢測豬瘟抗體滴度就顯得至關重要。膠體金法是一種膜載體的免疫檢測法，具有快速、簡便的特點，非常適合基層獸醫防疫人員及規模戶使用。同樣，ＥＬＩＳＡ法檢測雖然對實驗室設施有一定要求，也因出結果快、靈敏度高而在縣級獸醫實驗室大量采用。為了了解這兩種檢測方法檢測豬瘟抗體的敏感性、特異性和準確性。２０１２年４月２３日，筆者結合宜都市春防抗體監測用膠體金法和ＥＬＩＳＡ法同時檢測送檢的１１２份豬血清標本中的豬瘟抗體水平，現將其報告如下。

１ 材料與方法

１．１ 樣本來源

２０１２年４月宜都市１０個鄉鎮春防抗體監測送檢豬血清樣本１１２份。

１．２ 試劑和儀器

試劑：豬瘟抗體快速檢測試劑盒（膠體金法）和豬瘟病毒抗體檢測試劑盒（ＥＬＩＳＡ法）均為深圳市康百得生物科技有限公司生產。

儀器：瑞士帝肯產Ｓｕｎｒｉｓｅ酶標儀。

１．３ 方法

１１２份豬血清樣本以膠體金法和ＥＬＩＳＡ法平行檢測豬瘟抗體滴度，操作均按試劑盒說明書進行。對于ＥＬＩＳＡ法檢測陽性、膠體金法檢測陰性的血清標本，再用ＥＬＩＳＡ法雙孔復檢，其中任一孔Ｓ／Ｃｏ≥１即確定為陽性。

２ 結果

膠體金法和ＥＬＩＳＡ法檢測１１２份豬血清豬瘟抗體結果見表１、表２、表３。

由表１可見，１１２份豬血清，用膠體金法檢測豬瘟抗體，陽性９６份，陽性率為８５．７％；用ＥＬＩＳＡ法檢測豬瘟抗體，陽性１０９份，陽性率為９７．３％。

由表２可見，兩種方法檢測結果不相符的有１５份。其中，１４份ＥＬＩＳＡ法檢測為陽性，膠體金法檢測為陰性；１份ＥＬＩＳＡ法檢測為陰性，膠體金法檢測為陽性。膠體金法檢測相對ＥＬＩＳＡ法有一定漏檢和誤診現象存在。

由表３可見，相對ＥＬＩＳＡ法檢測，膠體金法檢測陽性（ａ）為９５份，陰性（ｄ）為２份，假陽性（ｂ）為１份，假陰性（ｃ）為１４份。膠體金法檢測靈敏度＝ａ／（ａ＋ｃ）×１００％＝８７．２％；特異度＝ｄ／（ｂ＋ｄ）×１００％＝６６．７％；漏檢率＝ｃ／（ａ＋ｃ）×１００％＝１２．８％；誤診率＝ｂ／（ｂ＋ｄ）×１００％＝３３．３％；診斷符合率＝（ａ＋ｄ）／（ａ＋ｂ＋ｃ＋ｄ）×１００％＝８６．６％。

３ 小結與討論

膠體金法和ＥＬＩＳＡ法檢測均屬于免疫學檢測范疇，方法特異，敏感性好。ＥＬＩＳＡ法是目前應用最廣而且發展最快的一種免疫測定技術。膠體金法與ＥＬＩＳＡ法相比，具有快速、靈敏、操作更加簡便等優點，可最大限度地避免試驗過程中各種因素對結果的影響并減輕實驗室人員的工作強度。另外也可用于檢測單個樣本，特別適用于基層防疫員和規模戶，大大方便了畜病的快速診斷。本試驗１１２份豬血清樣本中，ＥＬＩＳＡ法檢測出陽性樣本１０９份，陽性率為９７．３％，膠體金法檢測出陽性樣本９６份，陽性率為８５．７％。兩種方法同時檢測豬瘟抗體滴度，盡管符合率較高，膠體金法還是有漏檢、誤診現象存在，分析１４例漏檢及１例誤診原因，可能是膠體金法較ＥＬＩＳＡ法靈敏性、特異性低造成的，漏檢率為１２．８％，誤診率為３３．３％。對于沒有良好ＥＬＩＳＡ設備的獸醫實驗室，用膠體金法檢測豬瘟抗體時應選擇靈敏度高、質量好的膠體金法快速檢測試劑盒。膠體金法只能初步篩查豬瘟抗體，適用于快速檢測的需要，但縣級獸醫實驗室不宜使用膠體金法檢測豬瘟抗體滴度，對于膠體金法篩查陰性的血樣，建議用ＥＬＩＳＡ法復檢，以防漏檢。