西尼羅河病毒E蛋白結構域Ⅲ基因的原核表達
2012-12-31 00:00:00魏艷鳴朱碧波曹勝波
湖北農業科學 2012年12期
摘要：根據已發表的西尼羅河病毒（ＷＮＶ）的ＤＮＡ序列設計合成一對特異性引物，用聚合酶鏈式反應（ＰＣＲ）擴增Ｅ蛋白結構域Ⅲ（Ｅ－ＤⅢ）的基因。將ＰＣＲ產物克隆至ｐＥＴ２８ａ原核表達載體上，獲得重組表達質粒ｐＥＴ２８ａ－Ｅ－ＤⅢ。將該質粒轉化ＢＬ２１（ＤＥ３），經ＩＰＴＧ誘導后提取包涵體，純化融合蛋白，通過ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法證實Ｅ－ＤⅢ的基因可以在大腸桿菌中高效表達。
關鍵詞：西尼羅河病毒；Ｅ蛋白結構域Ⅲ；原核表達
中圖分類號：Ｓ８５２．６５＋９．６；Ｑ７８６ 文獻標識碼：Ａ 文章編號：0439－８114（２０12）12－2593-03
