Reprimo基因多態性與肺癌的研究進展

【關鍵詞】 Reprimo；基因多態性；癌；綜述

肺癌是臨床上最常見的惡性腫瘤之一，約占癌癥死亡者的1/3。據WHO統計，全球每年肺癌新發病人超過120萬，死亡110萬。在美國，2009年預計肺癌死亡人數和發病人數分別為16萬和22萬［1］；在我國，肺癌發病率及患病絕對人數均占全世界的第一位。肺癌早期發現、早期診斷仍然是醫學界的一個重大難題。

病因學研究顯示，暴露于相同環境致癌因素(如吸煙)的人群中只有一部分人會發生肺癌，說明不同個體對煙草等中致癌物的易感性不同；分子流行病學研究還發現，遺傳傾向在大多數肺癌中可能充當一個重要角色，家族性研究表明發展成肺癌的危險性有一個巨大的遺傳組分在終生不吸煙者、年輕個體中［2］；研究還表明人群中的許多基因都存在遺傳多態性，這種多態性為個體腫瘤易感性的重要決定因素［3］。1 抑癌基因Reprimo

抑癌基因Reprimo是細胞周期調控蛋白，基因定位于人類染色體2q23，人類和小鼠Reprimo蛋白同源性高達97%，均由109個氨基酸組成，相對分子質量在12kDa，為一種定位在細胞漿中的糖基化蛋白［4］。Reprimo基因可由X線照射后的細胞中分離出，是p53基因的下游靶基因，其功能與抑制細胞周期密切相關，異位表達的p53可誘導Reprimo mRNA表達，過表達Reprimo引起細胞周期停滯于G2期，使細胞不能增殖，其機制可能是通過抑制Cdc2活性以及Cdc2/cyclinB1復合物核轉位的途徑來發揮對細胞周期的調節［4］。2 抑癌基因Reprimo異常與癌癥

抑癌基因Reprimo異常與機體癌癥發生具有相關性。Bernal C.等［5］在胃癌血漿發現Reprimo甲基化的樣品很多，與無癥狀對照組比較有統計學意義(P<0.001)，認為異常甲基化的Reprimo可作為胃癌早期發現的潛在生物標志物。Sato N［6］等發現Reprimo異常甲基化檢測在胰腺癌移植瘤和原發性胰腺癌占60%（75/125），reprimo甲基化檢測在胰腺上皮內瘤變（PANIN）占30%（19/63）。reprimo甲基化與p53基因突變狀態無關，與遺傳不穩定性增加程度（P=0.04）相關。此外，在主要的胰腺癌Reprimo甲基化患者比那些Reprimo非甲基化的患者在預后惡化有顯著性不同（P=0.007）。相比之下，在胰腺癌中的其它甲基化目標（SPARC和CXCR4）預后卻沒有相關性。這些結果表明，Reprimo異常甲基化在胰臟癌是一種常見的現象，并與遺傳不穩定和手術切除后的不良后果具有相關性。Hamilton JP，［7］等發現Reprimo甲基化在NE為0（0/19），在ESCC為13%（6/45），在BE為36%（9/25），在HGD為64%（7/11），在EAC.為63%（47/75），Barrett食管（BE；P=0.001），高度異型增生（HGD，P=0.001），與食管腺癌（EAC；P=0.00003）中Reprimo甲基化頻率均明顯高于正常食管（NE），在BE和EAC，HGD和EAC，或者NE和食管鱗狀細胞癌（ESCC）之間沒有統計學顯著性差異。表明Reprimo甲基化可作為食管腫瘤的早期檢測潛在的生物標志物。

Takahashi T，［8］等檢測645名腫瘤患者（代表16個腫瘤類型的腫瘤）Reprimo異常甲基化。Reprimo啟動子甲基化在胃癌為79%，在膽囊癌癥為62%，在淋巴瘤為57%，在大腸癌為56%，在食管腺癌為40%，在乳腺癌為37%，在白血病為31%。卵巢癌，膀胱癌，宮頸癌，腦瘤，惡性間皮瘤和兒科腫瘤中的甲基化頻率都很低（0-20%）。在良性組織很少檢測到reprimo甲基化（0-11%），胃黏膜上皮細胞除外。大腸息肉也經常檢測到甲基化（27%），而慢性膽囊炎標本卻很少（4%）。而且我們未能確定Reprimo在大腸癌和胃癌細胞系和50個主要大腸癌的基因突變。所以Reprimo異常甲基化與表達的缺失是一種常見的現象，并可能是導致某些類型的人類惡性腫瘤的發病機制。

Suzuki M，等［9］檢測Reprimo異常甲基化在非小細胞肺癌（NSCLC）的細胞株為32%（6/19），在小細胞肺癌（SCLC）的細胞株為6%（1/16），在原發腫瘤為31%（51/167）。甲基化在正常淋巴細胞缺失，在相應的非惡性肺組織很少缺失（7%；4/57）。在細胞株，Reprimo表達缺失和異常甲基化之間的整體一致性為94%（33/35）。Reprimo表達缺失的五個細胞株經甲基化劑5-氮雜-2''-脫氧胞苷處理后reprimo表達恢復。在細胞株p53基因狀態和Reprimo甲基化之間沒有顯著相關性。這些數據表明，Reprimo甲基化在肺癌頻繁發生并獨立于p53，Reprimo甲基化可能在肺癌的發病機制中發揮一定的作用。

國內也有王海等［10］胃癌與Reprimo，羅峻等［11］胃腺癌與Reprimo，姜蕊等［12］肺癌與Reprimo之間具有相關性的報道。

由此可見，Reprimo異常甲基化與這些癌癥有統計學相關性，與患者轉移、預后等有一定關系。3 Reprimo基因多態性表達

Ye等［13］利用美國國立生物技術信息中心(NCBI)的表達標簽系列(EST)數據庫，采用BLAST(Basic Local Alignment Search Tool)程序檢索數據庫中抑癌基因Reprimo的EST序列，發現Reprimo基因3''非翻譯區的位于824位點和839位點均存在G/C多態性，隨后用Hardy-weinberg平衡（HWE）檢驗在高加索人群中得到證實，該位點基因型和等位基因頻率分布均符合遺傳平衡狀態。Beasley等［14］選擇健康組、憩室病組和大腸癌組3組人群為研究對象，觀察Reprimo基因3''非翻譯區824位點G/C多態性與大腸癌的關系，結果發現健康組和大腸癌組該位點基因型和等位基因頻率分布均符合遺傳平衡狀態，但是憩室病組不符合該規律，且824位點G/C多態性與大腸癌不存在相關性。目前，關于Reprimo基因多態性的報道很少。鑒于報道有限且遺傳多態性存在較強地域和人種因素，我們顯然不能得出籠統認為Reprimo基因多態性與其他組織來源的腫瘤無關，即使是大腸癌與Reprimo基因多態性有無關系仍需要擴大樣本在不同地域、不同人種中進一步證實。

由上可見，Reprimo基因多態性表達與肺癌的關系探討仍屬空白，研究其關系對于肺癌發生的分子機制以及評估肺癌的發生、發展及預后具有重要意義。

參考文獻

［1］ Nici L.The role of pulmonary rehabilitation in the lung cancer patient ［J］.Semin Respir Crit Care Med，2009，30(6)：670-674.

［2］ Liu G，Zhou W，Christiani DC.Molecular epidemiology of non-small cell lung cancer.Semin Respir Crit Care Med，2005，26(3)：265-272.

［3］ Fasching PA，Gayther S，Pearce L，et al.Role of genetic polymorphisms and ovarian cancer susceptibility［J］.Mol Oncol，2009，3(2)：171-181.

［4］ Ohki R，Nemoto J，Murasawa H，et al.Reprimo，a New Candidate Mediator of the p53-mediated Cell Cycle Arrest at the G2 Phase［J］.Biol Chem，2000，275(30)：22627-22630.

［5］ Bernal C，Aguayo F，Villarroel C，Vargas M，Díaz I，Ossandon FJ，Santibáez E，Palma M，Aravena E，Barrientos C，Corvalan AH.Reprimo as a potential biomarker for early detection in gastric cancer.Clin Cancer Res，2008 Oct 1，14(19)：6264-9.

［6］ Sato N，Fukushima N，Matsubayashi H，Iacobuzio-Donahue CA，Yeo CJ，Goggins M.Aberrant methylation of Reprimo correlates with genetic instability and predicts poor prognosis in pancreatic ductal adenocarcinoma.，2006 Jul 15，107(2)：251-7

［7］ Hamilton JP，Sato F，Jin Z，Greenwald BD，Ito T，Mori Y，Paun BC，Kan T，Cheng Y，Wang S，Yang J，Abraham JM，Meltzer SJ.Reprimo methylation is a potential biomarker of Barrett''s-Associated esophageal neoplastic progression.Clin Cancer Res，2006 Nov 15，12(22)：6637-42.

［8］ Takahashi T，Suzuki M，Shigematsu H，Shivapurkar N，Echebiri C，Nomura M，Stastny V，Augustus M，Wu CW，Wistuba II，Meltzer SJ，Gazdar AF.Aberrant methylation of Reprimo in human malignancies.Int J Cancer，2005 Jul 1，115(4)：503-10.

［9］ Suzuki M，Shigematsu H，Takahashi T，Shivapurkar N，Sathyanarayana UG，Iizasa T，Fujisawa T，Gazdar AF.Aberrant methylation of Reprimo in lung cancer.Lung Cancer，2005 Mar，47(3)：309-14.

［10］ 王海，等.5-AzadC聯合TSA對人胃癌SGC-7901細胞生長及 Reprimo基因表達的影響.安徽科技大學學報，2012，47(1)：1-4

［11］ 羅峻，等.S100A2、Reprimo在胃腺癌中的表達及其臨床意義.中華實驗外科雜志，2008，25（6）：754-755.

［12］ 姜蕊，于世英.非小細胞肺癌中Reprimo以及14-3-3 Σ基因啟動子異常甲基化檢測.腫瘤防治研究，2009，36（2）：106-109.

［13］ Ye Z，Parry JM.Identification of polymorphisms in the human Reprimo gene using public EST data.Teratog Carcinog Mutagen［J］，2002，22(6)：485-493.

［14］ Beasley WD，Beynon J，Jenkins GJ，et al.Reprimo 824 G>C and p53R2 4696 C>G single nucleotide polymorphisms and colorectal cancer：a case-control disease association study［J］.Int J Colorectal Dis，2008，23(4)：375-381.