【摘要】 目的 探討甲苯胺紅不加熱血清學試驗,TP-ELISA和TPPA試驗在孕產婦梅毒檢測中的適應情況。對3600例樣本先進行TP-ELISA檢測陽性標本進行TPPA試驗確證并進行TRUST試驗。TP-ELISA檢出陽性標本29例陽性率0.81%。TP-ELISA,TPPA都為陽性28例符合率96.5%TPPA試驗陽性而TRUST試驗陰性7例,未檢出率24.0%。結論 ELISA法可作為梅毒大量檢測篩選方法,TPPA法為確證方法,而TRUST法僅應做為判斷病情和療效的觀察。
【關鍵詞】 TPPA;TP-ELISA;TRUST
TRUST試驗,顧名思義,就是用正常牛的心肌的心類脂(Cardiolipin二磷酸酰甘油衍生物)作為抗原,不能用螺旋體作為抗原代替,以此來測定病人血清中的反應素(非特異性抗體——抗心磷脂抗體)。這種方法可以用來初步篩查梅毒螺旋體感染情況。反應素在初期梅毒病灶出現后1-2周就可測出,因此在二期梅毒滴度最高,然而三期梅毒較低。因此所用抗原不具有特異性,但是除梅毒病人外,一些非梅毒疾患也可暫時或長期地存在反應素。
梅毒syphilis是指由梅毒螺旋體引起的慢性、系統性性傳播疾病(VD,STD)。其中以性途徑傳染為甚,在臨床實踐中我們把它分為:一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒以及潛伏的梅毒。梅毒在《中華人民共和國傳染病防治法》中,被列為乙類防治管理的病種。故而是一種感染引起的慢性感染性疾病,梅毒的陽性率有所增加,形勢十分嚴峻,合理的梅毒篩查、和對妊娠梅毒進行規范的治療及隨訪,應引起關注。有針對性地開展孕產婦梅毒天性梅毒發生。而未經治療的早期梅毒孕產婦100%預防和控制工作,梅毒母嬰垂直傳可以引起不良妊娠后果。陽性的孕產婦大多數是無法跟蹤治療和隨訪,她們不愿意讓他人知道。有的產婦是住院檢查才知道得了梅毒的。近年來有發病持續上升趨勢為評價不同檢測方法的適應意義,為更好地做好孕產婦的梅毒防治工作,分別對來我院免費篩查的孕產婦進行了梅毒常用的TP-ELISA,TPPA,TRUST,三種方法檢測.并對三種方法進行比較分析,現總結如下:1 材料與方法
1.1 檢測對象 自2011年6月以來到我院免費梅毒篩查的孕產婦3600例。
1.2 檢測儀器 微量震蕩旋轉儀、KHST-36酶標儀、KH96W型洗板機。
1.3 檢測試劑 TRUST試劑(英科新創),TP-ELISA(英科新創),TPPA(日本富士)。
1.4 三種檢測方法嚴格按照試劑說明書操作。2 結 果
2.1 3600份樣本TP-ELISA檢出29份,檢出率0.81%。陽性樣本再用TPPA和TRUST試驗檢測,其中TPPA陽性28例,TRUST陽性22例。3 討 論
梅毒螺旋體明膠凝集試驗(TPPA)TPPA是以梅毒螺旋體為抗原檢測血清中特異性抗體。其特異性和敏感性高,而且干擾因素少。試劑穩定,批間差小。是目前公認的確證方法,但結果判定靠肉眼觀察,較主觀,又不能保存原始結果,也難實現自動化。
梅毒螺旋體酶聯免疫吸附試驗(TP-ELISA)以梅毒螺旋體抗原包被聚丙乙烯板,再加入待檢血清以及酶標記抗原,形成雙抗原夾心,同時檢測IgG和IgM抗體。少數試劑采用間接法,使用酶標記抗人IgG或IgM,分開檢測IgG或IgM。敏感性和特異性較高,而且價格較低,并適合于對大量樣品的篩查可實現操作的自動化、客觀化。
TRUST試驗是利用類脂質作為抗原,檢測血清中的類脂質抗體。為梅毒非特異性抗體。特異性差,在多種疾病,如急性病毒性感染、自身免疫性疾病、結締組織病、腫瘤、靜脈吸毒者、老年人以及懷孕婦女中均可出現反應素,所以此類試驗有時會出現假陽性反應。反應素是指Tp侵入人體以及破壞組織后組織中的磷脂在螺旋體表面形成復合抗原,從而使機體產生抗磷脂的自身抗體,這種抗體稱為反應素。感染梅毒后反應素的出現時間晚于特異性梅毒螺旋體抗體,因此非梅毒螺旋體抗原血清試驗對一期梅毒的漏檢率較高。TRUST有時出現弱陽性或陰性結果,而臨床上又像二期梅毒,此時應將此血清稀釋后做定量試驗,如出現陽性結果,則為抗體過量引起的“鉤狀效應”,1-2%的二期梅毒病人可出現此現象而發生假陰性反應。此外,晚期梅毒反應素轉陰率高,再加上這類試驗對隱性梅毒也不太敏感,因此用此類試驗進行梅毒篩查時,存在著相當數量的漏檢。但非梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性的患者往往是梅毒現癥感染者,非梅毒螺旋體抗原血清試驗表現為滴度隨成功的治療而逐漸下降,故可以作為療效觀察的指標。
綜上所述,3種梅毒檢測方法應使用ELISA法作為篩選方法,TPPA法為確證方法,而TRUST法僅應做為判斷病情和療效的觀察。通過三種方法合理檢測梅毒,可以最大程度地降低母嬰傳播率。因此產婦要增強產前保護意識自覺參與梅毒免費篩查項目,以便有效阻斷梅毒母嬰傳播。