替硝唑聯(lián)合維生素C對牙周炎大鼠血清IgG₁和IgG_2a的影響

[摘要] 目的 探討替硝唑聯(lián)合維生素C對牙周炎大鼠的治療作用及對血清IgG1和IgG2a的影響。 方法 給予牙周炎大鼠替硝唑聯(lián)合維生素C處理（研究組），并與單純給予維生素作對照，分析處理后不同時間點(diǎn)的牙齦指數(shù)（gingival index，GI）、牙周附著喪失（attachment loss，AL）及血清IgG1和IgG2a水平。 結(jié)果 ①除2周的GI和AL外，兩組治療后各觀察點(diǎn)的指標(biāo)均優(yōu)于治療前；②研究組4周、6周和8周的AL和IgG2a水平低于對照組；③研究組6周和8周的GI低于對照組，IgG1水平高于對照組。 結(jié)論 聯(lián)合治療對牙周炎癥狀的改善效果優(yōu)于單純處理，并能糾正紊亂的IgG1和IgG2a水平。

[關(guān)鍵詞] 替硝唑；維生素C；牙周炎；血清IgG1；血清IgG2a

[中圖分類號] R781.4 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673—9701（2012）26—0004—02

Effect of tinidazole combined with vitamin C on serum IgG1 and IgG2a of periodontitis rats

CHEN Zhouhua

Department of Stomatology， Zhoushan Maternal and Child Health Hospital in Zhejiang Province， Zhoushan 316000， China

[Abstract] Objective To explore the improvement effects of tinidazole combined with vitamin C on rats with periodontitis and the effects on serum IgG1 and IgG2a. Methods The rats with periodontitis were treated by combination therapy of tinidazole and vitamin C （research group）， while the control group was treated only with vitamin C. The following items at different treat time point were analyzed such as gingival index， attachment loss， serum IgG1 and IgG2a levels. Results ①Except the GI and AL at 2nd week， the other items at different time points of two groups were better than the condition before treatment； ②AL and IgG2a level at 4th， 6th and 8th week after treatment of research group were lower than control group； ③GI level at 6th and 8th week of research group were lower than control group， while the IgG1 were higher than control group. Conclusion The combination therapy of tinidazole and vitamin C show a better improvement effect than the pure vitamin C treatment with a possible mechanism to correct disorders of the IgG1 and IgG2a levels.

[Key words] Tinidazole； Vitamin C； Periodontitis； Serum IgG1； Serum IgG2a

牙周疾病是常見的口腔慢性炎癥，可侵犯和破壞牙齦和牙周組織，導(dǎo)致患者的生活質(zhì)量下降，甚至牙齒喪失[1]。牙周病主要是由革蘭氏陰性厭氧菌侵襲牙周組織造成的，而繼發(fā)的炎癥以及免疫反應(yīng)均是牙周疾病的主要發(fā)病原因[2]。研究表明，牙周炎發(fā)病過程中Th1、Th2細(xì)胞的免疫紊亂，主要表現(xiàn)為血清IgG1和IgG2a水平的紊亂[3]。因此，有效地抑制革蘭氏陰性厭氧菌的生長是治療牙周炎的有效方法。替硝唑?qū)Ω锾m氏陰性厭氧菌有較好的抑制作用，且臨床上采用替硝唑治療牙周炎[4]，但對其改善Th1、Th2細(xì)胞的免疫紊亂的效果還不清楚，因此本文就替硝唑?qū)Υ笫笱乐苎装Y狀的改善、血清IgG1和IgG2a的影響進(jìn)行研究，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 動物與分組

采用40只雄性Sprague Dawley（SD）大鼠進(jìn)行牙周炎的模型制備，SD大鼠購于北京維通利華公司，體重為（256.7±8.7）g，采用物理機(jī)械刺激的方法建立模型（方法見下文），并隨機(jī)分為對照組和研究組，各20只，分別給予單純的維生素C處理和替硝唑聯(lián)合維生素C處理。兩組均采用灌胃的方式給藥，維生素C和替硝唑的劑量分別為1 g/（kg·d）和0.2 g/（kg·d），在成模4周后給藥處理并持續(xù)8周。

1.2 牙周炎動物模型的制備

采用物理機(jī)械刺激的方法制備牙周炎模型[5]，具體步驟如下：①將5—0絲線在含有牙周致病菌的菌液中浸濕；②并將絲線結(jié)扎SD大鼠左側(cè)上頜第1磨牙牙頸部，確保結(jié)扎線扎牢同時壓向牙根，避免脫出。在成模4周后給予上述藥物處理，模型成功的標(biāo)志：出現(xiàn)牙齦膿腫、牙周袋等牙周炎癥狀。

1.3 效果觀察

分析治療前以及治療后不同觀察點(diǎn)的牙齦指數(shù)（gingival index，GI）、牙周附著喪失（attachment loss，AL）。適量的乙醚麻醉大鼠，采用鈍頭牙周探針并根據(jù)L■e法[6]測量GI：0：牙齦健康，沒有水腫；1：牙齦有輕度炎癥反應(yīng)、牙齦顏色改變且輕度水腫，但探查時未見出血；2：中等炎癥反應(yīng)、顏色發(fā)紅、水腫明顯、探診時出血；3：嚴(yán)重炎癥反應(yīng)、出現(xiàn)潰瘍、有自動出血傾向。通過測量釉牙骨質(zhì)到牙周袋的距離判斷牙周附著喪失。

1.4 血清生化指標(biāo)檢測

待觀察牙周炎癥狀改善后，行靜脈取血，靜置2 h后，離心（3000 r/min×10 min），保留上清。采用Elisa法檢測血漿中的IgG1和IgG2a水平，試劑盒購于上海研輝生物科技有限公司，步驟均依據(jù)試劑說明書。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用（x±s）的形式表示，兩組之間的比較采用成組t檢驗(yàn)，均采用SPSS 13.0完成數(shù)據(jù)分析，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前后GI水平

除了2周外，兩組治療后各觀察點(diǎn)的GI水平均小于治療前，且研究組在6周（P < 0.05）和 8周（P < 0.01）的GI低于對照組，見表1。

表1 兩組治療前后GI水平（x±s）

2.2 兩組治療前后AL水平

除了2周外，兩組治療后各觀察點(diǎn)的AL水平均小于治療前，且研究組在4周、6周和8周的AL均低于對照組（P < 0.05），見表2。

表2 兩組治療前后AL水平（mm，x±s）

2.3 治療前后的血清IgG1水平變化

兩組治療后各觀察點(diǎn)的IgG1水平均高于治療前，且研究組6周和 8周的IgG1水平高于對照組（P < 0.01），見表3。

表3 治療前后的血清IgG1水平變化（x±s）

2.4 治療前后的血清IgG2a水平變化

兩組治療后各觀察點(diǎn)的IgG2a水平均低于治療前，且研究組4周（P < 0.05）、6周（P < 0.05）和 8周（P < 0.01）的IgG2a水平低于對照組，見表4。

表4 治療前后的血清IgG2a水平變化（x±s）

3 討論

盡管牙周炎的發(fā)病率較高，且發(fā)病后常伴有免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)，但對于引起這些異常的機(jī)制仍不清楚[7]。研究指出牙周炎牙周組織的損傷大多是致病菌通過白介素IL、腫瘤壞死因子TNF等引起宿主自身的免疫反應(yīng)造成的[8]。機(jī)體內(nèi)的Th1和Th2細(xì)胞負(fù)責(zé)維持機(jī)體免疫系統(tǒng)的平衡，且兩者可通過分泌不同的細(xì)胞因子相互調(diào)節(jié)。Th1和Th2的平衡關(guān)系被打破時，會造成機(jī)體內(nèi)出現(xiàn)相應(yīng)的疾病，如在牙周炎的發(fā)病過程中，免疫反應(yīng)向Th1偏移，而謝敏等發(fā)現(xiàn)Th2對于牙周炎具有保護(hù)作用[9，10]。抗體IgG1和IgG2a 水平分別受Th1和Th2細(xì)胞因子的調(diào)控，而相關(guān)研究表明牙周炎兩者的水平發(fā)生改變，并可用于間接反應(yīng)Th1和Th2細(xì)胞應(yīng)答情況[3]。

本研究發(fā)現(xiàn)治療后不同時間點(diǎn)的GI和AL水平均好于治療前（除2周外），表明兩種治療均有效。此外，研究組僅在治療6周和 8周時的GI和AL水平均小于對照組，表明聯(lián)合治療在遠(yuǎn)期治療效果上好于對照組，而血清IgG1和IgG2a水平的結(jié)果與牙周炎癥狀改善的趨勢一致，提示聯(lián)合治療可能是通過穩(wěn)定免疫反應(yīng)來緩解癥狀，因此需要較長的時間，這也可解釋聯(lián)合組在6周后才與對照組在癥狀改善上有差異。替硝唑?qū)τ诖蠖鄶?shù)的厭氧菌有抑制作用，但是目前其作用機(jī)制了解仍不完善，推測其可能是通過抑制牙周炎致病菌的生長，從而減少細(xì)菌毒素對免疫的激活，而目前有替硝唑改善免疫反應(yīng)的報道[11]。

綜上所述，替硝唑聯(lián)合維生素C對于牙周炎癥狀的改善要好于單純維生素C處理，且能糾正紊亂的IgG1和IgG2a水平。

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（收稿日期：2012—02—20）