全自動生化分析儀測定肌酐結果假性升高的分析

王新芹（江蘇省宿遷市人民醫院檢驗科 223800）

當今實驗室全自動生化分析儀的應用已經普及，其分析的自動化、微量化的程度也不斷提高，而且隨著試劑性能的不斷穩定，分析結果的準確性及精密度已經滿足臨床需要。

但是近來作者在進行常規生化測定的過程中，發現部分肌酐結果有假性升高現象，均可以通過重復一次或多次測定，其結果回復到正常狀態。而且文獻資料提示全自動生化分析儀普遍存在交叉污染現象［1－2］，為了尋找對肌酐形成交叉污染的原因，并確立解決方法，作者進行了以下試驗。

1 資料與方法

1.1 儀器與試劑 葡萄糖（GLU）試劑由上海科華生物工程股份有限公司生產，采用葡萄糖氧化酶法進行檢測，肌酐（CR）試劑由廣州科方醫療技術有限公司生產，采用肌氨酸氧化酶法進行檢測，其方法學均采用兩點終點法。儀器為7180全自動生化分析儀。

1.2 實驗安排

1.2.1 交叉污染試驗 取一份正常混合血清，在保證儀器狀態良好的情況下，單獨測定CR 10次，為對照組，然后將GLU和CR組合測定，重復10次，與對照組作比較。

1.2.2 干擾分析實驗 分別將在組合中位于CR前面的測試項目GLU的第一、第二試劑當做標本，安排在7180常規位置單獨測定CR，連續測定10次。

1.2.3 擦洗試劑針并設計避免交叉污染程序 同一份正常混合血清，在儀器程序中設置避免交叉污染程序，即在加入GLU第二試劑后用日立堿性清洗液清洗第二試劑針1次，將GLU和CR組合，重復測定CR 10次，與原來對照組比較。

2 結 果

2.1 交叉污染實驗見表1。結果顯示對照組CR濃度平均62.1μmol／L，而 GLU 與 CR 組合組 CR 平均濃度是88.2 μmol／L，兩者均數t檢驗差異有統計學意義（P＜0.01），提示GLU確實對CR測定存在交叉污染的現象。

2.2 干擾分析試驗 結果顯示GLU第二試劑成分的CR測定值平均為86.53μmol／L，表明GLU的第二試劑存在對肌酐測定的某些干擾。它可能通過試劑針的攜帶污染，影響下一個項目的結果。

表1 葡萄糖試劑對肌酐測定結果的影響（μmol／L）

2.3 加強對儀器常規保養并設計避免交叉污染程序 通過擦洗試劑針并設計避免交叉污染程序后，肌酐的測定均值為63.97μmol／L，與對照組比較差異無統計學意義。表明加強對儀器的常規保養并設計儀器的避免交叉污染程序可以有效解決肌酐結果假性升高的問題，這樣就可以避免為了調整測試通道而改變分析參數所帶來的一系列麻煩。

3 討 論

肌酐作為一個常規的檢測項目，它是反映腎功能的一個靈敏指標，特別在腎功能受損患者的監測治療中，只有為臨床提供準確的結果，才能有效地為患者服務。

通過以上實驗可以發現GLU試劑對CR測定結果存在較大的正干擾。由于上一試劑含有下一試劑所測定的底物，是導致試劑間交叉污染的原因［3］，所以作者通過查看試劑說明書，結果發現GLU第二試劑主要成分為葡萄糖氧化酶，它可以和血清中的葡萄糖反應生成過氧化氫，與肌氨酸氧化酶氧化肌酐生成的過氧化氫疊加，共同參與Trinder反應，導致CR結果的假性升高。

全自動生化分析儀的交叉污染現象普遍存在，而且隨著儀器的各種部件的老化，其測定結果的準確性和重復性在逐漸下降，交叉污染的現象也越來越嚴重，其解決方法主要有調整項目順序，或利用儀器本身的抗交叉污染程序，通過增加沖洗次數來避免交叉污染［4－6］。由于本試驗的儀器加樣是按標本的先后順序，同一標本按通道的先后以及反應時間的長短來安排加樣順序，而且常規操作過程中會插入急診，所以有時候并不能完全根據操作者所設定的通道順序進行測試。因此作者就想通過設計儀器的避免交叉污染程序來解決，通過實驗證實可以解決肌酐結果偏高的現象。但是由于沖洗的次數有限，而且隨著儀器的使用，攪拌棒、試劑針、沖洗機構等工作狀態越來越差，清洗不徹底也非常常見。因此有些項目也需要調整通道，或者單獨測定［7］。

通過以上的分析研究，提醒檢驗人員在平時的工作當中，應該保持認真、謹慎的態度，對工作中的問題要及時發現、迅速解決。也建議在以后儀器使用的過程中，做好日常保養工作。對樣品針、試劑針、攪拌棒、沖洗針等每天工作結束后都用無水乙醇進行擦拭，對外表和內部有磨損的部件要及時更換，熟悉各項目的反應原理，多查閱資料，了解不同項目間可能造成的交叉污染，尋找避免交叉污染的方法，以保證每一項檢驗結果的準確、可靠。

［1］孟素慧，王衛東.全自動生化分析儀使用中項目交叉污染對結果影響的觀察［J］.臨床軍醫雜志，2006，34（3）：377－378.

［2］鐘原勝，牟紹英.全自動生化分析儀試劑間交叉污染的探討［J］.中國醫藥導報，2011，8（4）：120－121.

［3］王鴻彬.生化分析項目間試劑的交叉污染的避免方法［J］.國際醫藥衛生導報，2004，10（8）：67－68.

［4］張正飛.Beckman Cx4生化分析儀交叉污染主要原因及保養措施［J］.檢驗醫學與臨床，2009，6（7）：527－528.

［5］王聰.全自動生化分析儀測定血清磷后對血清肌酐檢測的交叉污染［J］.中國誤診學雜志，2011，11（32）：7874.

［6］甘來軍，甘文明.肌酐堿性苦味酸測定法對生化分析儀的交叉污染［J］.中國基層醫藥，2010，10（8）：2509－2510.

［7］王新芹，王勝.脂類試劑對血清總膽汁酸自動分析的影響［J］.中國誤診學雜志，2005，5（16）：3043－3044.