阻塞性呼吸暫停低通氣綜合征患者血清sCD40L、IL-18、IL-6及MMP-9的水平及意義

范嘉銓，陳飛鵬，黃華興

(廣州醫學院第二附屬醫院呼吸內科，廣東廣州510260)

阻塞性呼吸暫停低通氣綜合征患者血清sCD40L、IL-18、IL-6及MMP-9的水平及意義

范嘉銓，陳飛鵬，黃華興

(廣州醫學院第二附屬醫院呼吸內科，廣東廣州510260)

目的探討阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(OSAHS)患者血清炎癥因子(sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9)的臨床意義。方法選擇OSAHS患者(其中輕度30例，中、重度30例)為實驗組，另選擇健康者30例為正常對照組，測定各組血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9的水平。測定睡眠呼吸暫停低通氣指數(AHI)、最低脈搏血氧飽和度(SpO2)。結果①比較正常對照組、輕度OSAHS組、(中、重度)OSAHS組血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9的水平，發現OSAHS組比正常對照組明顯升高，差異均有統計學意義(P＜0.01)；②OSAHS組血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平密切相關，且分別與睡眠呼吸監測指標(AHI、最低SpO2)密切相關。結論OSAHS患者血清炎癥因子sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9的水平升高，表明OSAHS是一種與炎癥密切相關的疾病。

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征；可溶性CD40L配體；白細胞介素-18；白細胞介素-6；基質金屬蛋白酶-9

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(OSAHS)是指睡眠時上氣道塌陷阻塞引起的呼吸暫停和通氣不足，伴有打鼾、睡眠結構紊亂，頻發血氧飽和度下降、白天嗜睡等癥狀，并可引發多臟器功能損害，是一種發病率高、嚴重影響生活和危及生命的疾病，是高血壓、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、肺源性心臟病和腦卒中等心腦血管疾病的獨立危險因素。根據國外不同國家流調資料研究[1]，伴有嗜睡癥狀的OSAHS患病率男性為4%～7.5%,女性約2%；國內流調資料顯示，伴有嗜睡癥狀的OSAHS在成年人中的患病率為3%～5%[2]。近些年研究發現，OSAHS可能是一種炎癥相關的疾病，多種炎性細胞、炎性因子參與OSAHS睡眠結構紊亂的發生、發展過程，但具體機制并不完全清楚。本研究旨在探討OSAHS患者血清多種炎癥因子的變化，為OSAHS炎癥機制提供一定證據。

1 材料與方法

1.1 研究對象選擇2O11年1月至2012年10月在廣州醫學院第二附屬醫院睡眠中心經多導睡眠監測儀(美國偉康Alice4)診斷為OSAHS的患者60例，均為男性，年齡24～56歲，平均(40±16)歲；體重指數(BMI)為(26.20 2.69)kg/m2。按照呼吸暫停低通氣指數(AHI)將OSAHS組進一步分為輕度組(5次／h≤AHI＜15次／h)30例，中、重度組(15次／h≤AHI) 30例。選擇同期在廣州醫學院第二附屬醫院就診，

經多導睡眠監測儀監測AHI＜5次／h的年齡、BMI與OSAHS組相匹配的30例男性作為對照組。所有入選者均無冠心病史，無糖尿病，近2周內無感染、創傷和手術，未使用過抗炎藥物，無全身性疾病(如惡性腫瘤、甲狀腺功能減低癥、腎上腺皮質增生癥)，無長期服用非甾體類藥和口服抗凝藥等病史。各組研究對象年齡、體指數無統計學差異(P＞0．05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 多導睡眠呼吸監測(PSG監測)所有研究對象保證在安靜舒適的狀態下，應用美國偉康公司Alice4多導睡眠呼吸監測儀連續監測研究對象至少7h睡眠時的口鼻氣流、胸腹呼吸運動、體位及鼾聲，記錄并計算出：睡眠呼吸暫停低通氣指數(AHI)、最低SaO2等睡眠呼吸指數。OSAHS的診斷依據中華醫學會呼吸病學分會睡眠呼吸疾病學組制定的診斷標準，即睡眠呼吸暫停低通氣指數(apnea hypopnea index，AHI)，指平均每小時睡眠中呼吸暫停加上低通氣的次數)≥5次／h。AHI＜5則排除OSAHS。

1.2.2 標本處理各組均于PSG監測的次日晨7：00空腹抽取靜脈血4mL，盡快離心后取血清，置-80oC保存待測(嚴格按照試劑說明書要求)。

1.2.3 sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9的檢測四者都是采用ELISA法。sCD40L、IL-6試劑盒購自上海藍基生物有限公司，IL-18、MMP-9試劑盒購自美國R&D SYSTEMS，四者嚴格按照試劑說明書要求進行檢測。四者采用的都是生物素雙抗體夾心酶聯免疫吸附法。兩者在終止反應后30min內在波長450nm的酶標儀上讀取數值，繪制標準曲線，根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。其他血脂成分由我院檢驗科完成。

1.2.4 統計學處理應用SPSS 13.0軟件進行統計分析。數據用均數±標準差(x±s)表示，組間比較采用方差分析和LSD檢驗，變量間的相關性采用Spearman相關分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 OSAHS各組與正常對照組在年齡、體重、BMI的比較中，差異無統計學意義。

2.2 比較OSAHS組(輕度組、(中度、重度)組)與正常對照組血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平中發現OSAHS各組比正常對照組明顯升高，差異均有統計學意義(見表1)。

2.3 OSAHS組的嚴重程度越重，sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平越高，差異有統計學意義。

2.4 OSAHS組血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平分別與睡眠呼吸有關監測指標密切相關(見表2)。

表1 各組基本情況比較

表1 各組基本情況比較

注：OSAHS：阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征；AHI：呼吸暫停低通氣次數；SpO2：脈搏氧飽和度；sCD40L：可溶性CD40L配體；IL-18：白細胞介素-18；IL-6：白細胞介素-6；MMP-9：基質金屬蛋白酶-9；與對照組比較aP＜0.01；與輕度OSAHS組比較bP＜0.01；

組別例數AHI(次/h)最低SpO2(%)sCD40L(ng/L)IL-18(ng/L)IL-6（pg/ml）MMP-9(ng/L)正常對照組輕度OSAHS組中、重度OSAHS組F值P值30 30 30 1.35±0.98 8.91±3.00a54.99±16.49ab269.072＜0.01 89.67±3.45 80.05±7.35a65.97±8.63ab63.709＜0.01 1.32±0.77 3.88±0.90a8.86±2.25ab203.535＜0.01 9.18±5.14 22.60±3.79a41.89±6.76ab281.261＜0.01 12.3±2.85 27.23±3.56a35.45±6.59ab200.355＜0.01 715.08±358.23 130.610±290.37a3095.84±1059.91 98.809＜0.01

表2 OSAHS組血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9與睡眠呼吸指數間相關性

3 討論

白細胞介素-18(IL-18)屬于IL-1家族，具有免疫調節功能。它作為輔助性T細胞1型(Th1)細胞因子，能促進Th1分化，抑制B淋巴細胞合成IgE，誘導自然殺傷細胞或T淋巴細胞合成與釋放IFN-γ。同時IL-18還刺激白細胞介素-8(IL-8)、白細胞介素-13(IL-13)、腫瘤壞死因子(TNF-α)及單核細胞集落刺激因子(GM-CSF)的合成，許多免疫細胞包括單核細胞、巨噬細胞、淋巴細胞、粒細胞都受IL-18的調控。臨床研究[3，4]發現，血清基礎IL-18水平增高可預測未來冠心病事件的發生，且其預測價值獨立于經典的危險因子和其他炎性因子。

基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)是MMPs家族中重要成員，在動脈粥樣硬化斑塊處的血管重構、斑塊的不穩定及其破裂而誘發的心腦血管疾病中都扮演著重要角色。Zauridakis等[5]對124例穩定型心絞痛患者的研究顯示，MMP-9是冠狀動脈病變進展的獨立預測因子。Blankenberg等[6]研究顯示，MMP-9/R279Q基因多態現象與穩定型心絞痛患者心血管事件的發生相關。

白細胞介素-6(IL-6)是一種多效細胞因子，是由單核細胞、T淋巴細胞、B淋巴細胞等分泌產生的，它能活化炎癥細胞，誘導黏附分子和炎性趨化因子的表達，參與動脈粥樣硬化的炎性反應過程。Ciftci等[7]研究發現IL-6水平在睡眠呼吸暫停綜合征中增高，本研究結果提示IL-6水平與OSAHS的病情相關，與文獻報道相符。

可溶性CD40L配體(sCD40L)是在T淋巴細胞中發現的，并通過與CD40結合在B細胞免疫應答中發揮重要作用。CD40和CD40配體都已經確定存在于一些其他類型的細胞中，包括血管內皮細胞、平滑肌細胞、單核細胞、巨噬細胞和血小板。在這些細胞中，CD40(與CD40結合)可觸發各種炎癥介質的細胞因子的表達：IL-1、IL-6、IL-12和腫瘤壞死因子-α；趨化因子、單核細胞趨化蛋白-1和IL-8；黏附分子、ICAM-1和VCAM-1；基質金屬蛋白酶；生長因子；凝血組織因子。這些現象提示sCD40L在動脈粥樣硬化各個階段均起著關鍵的作用。國外研究[8]發現不穩定型心絞痛患者比健康人或穩定型心絞痛者有較高的血漿sCD40L水平，而且增高的sCD40L具有復發高風險性。

本研究結果發現血清中sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平在OSAHS患者與正常對照組相比明顯增高(P＜0.01)，sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平與患者AHI呈正相關，與睡眠呼吸障礙事件時最低SpO2呈負相關，說明sCD40L、IL-18、IL-6、 MMP-9與OSAHS患者病情嚴重程度有關，OSAHS患者病情越重，sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平越高；血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平相互密切相關。OSAHS是一種氧化應激性疾病，睡眠中反復出現的間歇性低氧和再氧合對組織產生類似于缺血-再灌注的損傷，促使多種炎性細胞(如白細胞、單核細胞等)活化，產生過多的自由基、超氧陰離子等，直接損害內皮細胞，引起各種炎癥因子的釋放。本研究結果說明OSAHS存在明顯的炎性反應，OSAHS可能是一種炎癥相關的疾病。

[1]Udwadia ZF,Doshi AV,Lonkar SG,et al.Prevalence of sleepdisordered breathing and sleep apnea in middle-aged urban Indian men[J].Am J Respir Crit Care Med,2004,169(2):168-173.

[2]上海市醫學會呼吸病學分會睡眠呼吸病學組.上海市30歲以上人群阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征流行病學調查[J].中華結核和呼吸雜志，2003,26(5)：268-272.

[3]Hulthe J.McPheat W，Samnegard A,et a1．Plasma interleukin(IL)18 concentrations is elevated in patients with previous myoceardial infarction and related to severity of coronary atheroselero-sis independently of Creactive protein and IL-S[J]．Atherosclerosis，2006,188(2)：450-454.

[4]范嘉銓,陳飛鵬.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患者血清白細胞介素-18、基質金屬蛋白酶-9水平及意義[J].實驗與檢驗醫學,2011,29(3):224-226.

[5]Zouridakis E,Avanzas P,Arroyo-Espliguero R,et al.Markers of inflammation and rapid coronary artery disease progression in patients with stable angina pectoris[J].Circulation,2004,110(13): 1747-1753.

[6]Blankenberg S，Rupprecht HJ，Poifier 0，et a1．Plasnma concentrations and genetic variations of matrix metalloproteinase 9 and prognosis with cardiovascular disease[J]．Circulation，2003，107 (12)：1579-1585．

[7]Ciftci TU,Kokturk O,Bukan N,et al.The relationship between serum cytokine levels with obesity and obstructive sleep apnea syndrome[J].Cytokine 2004,28(2):87-91.

[8]Heeschen C,Dimmeler S,Hamm CW,et al.CAPTURE Study Investigators:soluble CD40 ligand in acute coronary syndromes[J].N Engl J Med 2003,348(12):1104-1111.

Expression and clinical significance of soluble CD40 ligand，interleukin-18，interleukin-6 and matrix metalloproteinase-9 in obstructive sleep apnea hypopnea syndrome patients

FAN Jiaquan,CHEN Feipeng,HUANG Huaxing.Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University,Guangzhou 510260,China.

ObjectiveTo investigate the clinical significance of soluble CD40 ligand(sCD40L),interleukin-18(IL-18),interleukin-6(IL-6),matrix metalloproteinase-9(MMP-9)in obstructive sleep apnea hypopnoea syndrome(OSAHS)patients without complications.Methods All observed subjects were divided into 4 groups:control subjects,mild OSAHS,moderate OSAHS and severe OSAHS.Serum sDC40L,IL-18,IL-6,MMP-9 concentrations were measured and compared.Furthermore，the sleep apnea hypopnea index(AHI)and lowest pulse oxygen saturation(SpO2)were detected too.Results①Compared to control subjects,the serum levels of sCD40L,IL-18,IL-6 and MMP-9 were increased significantly in OSAHS patients(P＜0.01).②sCD40L,IL-18, IL-6 and MMP-9 related to each other and closely related AHI and SpO2respectively.Conclusion The serum levels of sCD40L, IL-18,IL-6 and MMP-9 were increased in OSAHS patients,indicated that OSAHS perhaps closely related to the inflammation.

Obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome；Soluble CD40 ligand；Interleukin-18；Interleukin-6；Matrix metalloproteinase-9

:R766，R446.62文獻識別碼：A

1674-1129(2013)02-0115-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.02.004

廣州市醫藥衛生科技項目（201102A213011）

范嘉銓，男，1977年生，主治醫師，呼吸病學研究。

陳飛鵬，教授，研究生導師，呼吸內科主任。