江西地區(qū)人乳頭瘤病毒感染分型檢測(cè)的研究

方麗娟，袁水斌，王剛，魏小文

(江西華星醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，江西南昌330096)

·調(diào)查報(bào)告·

江西地區(qū)人乳頭瘤病毒感染分型檢測(cè)的研究

方麗娟，袁水斌，王剛，魏小文

(江西華星醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，江西南昌330096)

目的探討核酸分子快速導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)(HybriMax)在人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染分型檢測(cè)中的應(yīng)用，了解江西地區(qū)女性的HPV感染型別狀況。方法采用HybriMax技術(shù)對(duì)江西省內(nèi)各地區(qū)送檢的2060例宮頸脫落細(xì)胞樣本進(jìn)行了HPV-DNA的檢測(cè)和HPV的分型。結(jié)果在2060例宮頸標(biāo)本中21種型別均被檢出，HPV陽(yáng)性率36.6% (754/2060)，在檢測(cè)的型別中主要為單一高危型HPV，陽(yáng)性率為29.3%(603/2060)，在HPV高危各型別的分布上，分布最多的型別為HPV52(8.20%、169/2060)，其余檢測(cè)率較高HPV型別依次是，HPV16(7.43%)、HPV58(6.75%)、HPV33(3.74%)、HPV53 (2.82%)等；在低危HPV各型別的分布上，分布最多的型別是HPV11(4.22%、87/2060)和HPV6(3.16%、65/2060)。結(jié)論研究顯示江西女性人群中感染HPV型別主要是HPV52型，HPV18型不是江西地區(qū)的的優(yōu)勢(shì)HPV型別，各型別分布與山西和深圳地區(qū)的分布較為一致，與歐美國(guó)家的分布不同，推測(cè)HPV各型別分布具有一定的地域特征。

江西；人乳頭瘤病毒；基因分型

流行病學(xué)和基礎(chǔ)研究已經(jīng)證實(shí)人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染是宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraep ithelial neoplasia,CIN)和宮頸癌的主要病因[1]，而且不同HPV亞型的感染其致病性和后果也有差異[2]。HPV感染的檢測(cè)已成為篩查和預(yù)防宮頸癌的關(guān)鍵問(wèn)題之一[3]。本研究用核酸分子快速導(dǎo)流雜交基因芯片分型技術(shù)(HybriMax)對(duì)2060例女性進(jìn)行了HPV感染的分型檢測(cè)研究，報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象選擇2011年7月到2012年6月標(biāo)本2060例，年齡19～65歲，以26～45歲居多，占74.9%。

1.2 試劑和儀器DNA提取試劑盒(凱普生物化學(xué)有限公司提供)，HybriMax醫(yī)用核酸分子快速雜交儀和HPV擴(kuò)增分型檢測(cè)試劑盒(凱普生物化學(xué)有限公司提供)，ABI7300基因擴(kuò)增儀(伯樂(lè)公司，美國(guó))。

1.3 研究方法采用HybriMax技術(shù)檢測(cè)21種HPV亞型，基本原理是先將標(biāo)本中HPV病毒基因的DNA進(jìn)行基因擴(kuò)增，然后利用核酸分子快速導(dǎo)流雜交技術(shù)法，使目的分子導(dǎo)流穿過(guò)固定有DNA探針的低密度基因芯片薄膜上，而發(fā)生快速雜交。

實(shí)驗(yàn)步驟：樣本HPV DNA提取，PCR擴(kuò)增，核酸分子快速導(dǎo)流雜交，結(jié)果判讀，按芯片上HPV亞型分布的相應(yīng)著色點(diǎn)判斷。21種HPV分為高危型和低危型兩類[4]，高危型(high-risk types,HR-HPV) 16種，包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68和CP8304，低危型(low-risk types,LR-HPV)5種HPV6、11、42、43、44，有兩型或兩型以上屬多型感染。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法對(duì)HPV陽(yáng)性率及各高危型別陽(yáng)性率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，卡方檢驗(yàn)(即χ2檢驗(yàn))。對(duì)多型感染者，各亞型的陽(yáng)性率重復(fù)計(jì)算。

2 結(jié)果

在2060例送檢標(biāo)本中21種HPV型別均被檢出，HPV陽(yáng)性標(biāo)本有754例，HPV陽(yáng)性率36.6%，HPV陽(yáng)性患者中主要為單一高危型HPV，占總檢出HPV樣品數(shù)的79.97%(603/754)，單獨(dú)低危型HPV占HPV陽(yáng)性樣品總數(shù)的11.01%(83/754)，高低危復(fù)合感染占HPV樣品陽(yáng)性總數(shù)的9.02%(68/ 754)。詳見(jiàn)表1、表2。

表1 2060例標(biāo)本HPV總陽(yáng)性率及高危、低危及復(fù)合型HPV的陽(yáng)性率

3 討論

HPV感染亞型在人群中的分布有近100種亞型，約40種與肛門(mén)生殖道感染有關(guān)，根據(jù)在宮頸癌發(fā)生中的危險(xiǎn)性不同，分為HR-HPV和LR-

HPV兩大類[4]，而且不同HPV亞型的感染其致病性和后果也有差異[2]。因而，不同地區(qū)和人群HPV亞型感染的分布資料，是宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌防治策略的基礎(chǔ)。國(guó)內(nèi)喬友林教授研究組2004年在山西省和廣東省的深圳市所作的HPV感染的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示：國(guó)內(nèi)感染率位于前三位的高危HPV型別有HPV16、58、52，HPV58和HPV52是中國(guó)相對(duì)其他地區(qū)的優(yōu)勢(shì)HPV型別。從我們目前的檢測(cè)結(jié)果看，分布最多的型別為HPV52(8.20%、169/2060)，其余檢測(cè)率較高HPV型別依次是，HPV16、HPV58、HPV33、HPV53等，排名前三的型別相同，但在歐美人群中分布的HPV型別第二位的是HPV18。由此我們推測(cè)我國(guó)女性人群中HPV型別分布與歐美人群具有不同，并具有一定的地域特性。同時(shí)我們認(rèn)為，江西地區(qū)人乳頭瘤病毒感染型別如若單獨(dú)檢測(cè)HPV16，18將存在很大的漏檢率。江西2060例隨診女性中HPV的總感染率達(dá)36.6%(754/2060)，由于研究對(duì)象均為主動(dòng)到醫(yī)院就診的患者，不是自然人群普查，故目前得到的各型別的感染率不能代表該型別在自然人群中的感染率。但是仍然可以從目前檢測(cè)結(jié)果來(lái)大概分析各型別的分布狀況。宮頸篩查需選擇將江西人群主要感染的型別都包括在內(nèi)的檢測(cè)方法，同時(shí)隨訪需確認(rèn)是否為同一亞型反復(fù)感染，或是HPV多重感染，通過(guò)HybriMax可以很好地實(shí)現(xiàn)HPV的分型檢測(cè)，從而為有效預(yù)防宮頸癌的發(fā)生提供很好的技術(shù)平臺(tái)[5，6]。

表2 HPV各檢出型別的感染率

[1]Ault KA.Epidemiology and natural history of human papillomavirus infections in the female genital tract[J].Infect Dis Obstet Gynecol，2006,2006(14),40470.

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[5]王長(zhǎng)奇,王康,陳燕萍,等.HPV多重感染與宮頸病變關(guān)系的分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2012,30(2):166-168.

[6]張志勇,施橋發(fā).人乳頭瘤病毒與宮頸癌關(guān)系的研究進(jìn)展[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2012,30(3):252-256.

R737.33

A

1674-1129(2013)02-0181-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.02.032