ERK 2的表達與宮頸癌的生物學行為的關系

馬志剛，安 燕

（1.河北省保定市第三醫院骨二科，河北保定 071000；2.河北大學附屬醫院婦產科，河北保定 071000）

ERK 2的表達與宮頸癌的生物學行為的關系

馬志剛1，安 燕2

（1.河北省保定市第三醫院骨二科，河北保定 071000；2.河北大學附屬醫院婦產科，河北保定 071000）

宮頸腫瘤；免疫組織化學；細胞外信號調節MAP激酶類

細胞外信號調節激酶（extracellular singnalregulated kinase，ERK）是絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）的一個主要亞族。該酶被激活后成為磷酸化的ERK（p-ERK），其持續激活是細胞通過G1期和G1/S轉化所必需的。p-ERK介導信號由胞漿傳遞到胞核，通過轉錄調節激活多種癌基因，引起細胞的惡性轉化［1］。p-ERK可能通過重組細胞支架、改變細胞形態［2］及促進細胞質中基質金屬蛋白酶和尿激酶纖維蛋白酶原激活劑的表達［3］，從而促進腫瘤細胞的浸潤和轉移。本研究應用免疫組織化學SP法檢測ERK2在宮頸癌中的表達，并分析其與宮頸癌臨床病理特征的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取70例河北省保定市第三醫院2006年1月—2012年5月經手術切除、術后病理證實為宮頸癌組織標本，術前均未經放化療?；颊吣挲g28～69歲，平均（46.5±9.3）歲，≤45歲21例，＞45歲49例。其中Ⅰa期6例，Ⅰb期44例，Ⅱa期20例；鱗癌56例，腺癌14例；高分化癌19例，中分化癌30例，低分化癌21例；伴淋巴結轉移13例，無淋巴結轉移57例。同時收集22例因子宮肌瘤行全子宮切除術，術后證實為慢性宮頸炎組織標本作為對照，患者年齡35～53歲，平均（44.0±5.3）歲。

1.2 方法

1.2.1 主要試劑：兔抗人ERK2多克隆抗體購于武漢博士德公司。二氨基聯苯胺顯色試劑盒和SP（光譜純試劑）免疫組織化學試劑盒均購于福州邁新生物技術開發有限公司。

1.2.2 結果判定：免疫組織化學染色按SP試劑盒說明書進行，PBS代替一抗作陰性對照，已知陽性片作陽性對照。將石蠟包埋的蠟塊制成4μm切片，ERK2的陽性表達為在細胞質中出現棕黃色顆粒，采用半定量積分法，每片隨機選取具有代表性的10個高倍視野（×400）進行計數，每個視野計數100個腫瘤細胞，陽性細胞數≤10％、＞10％～30％、＞30％～75％、＞75％分別記為0分、1分、2分、3分。根據著色程度無黃色記0分、淡黃色1分、黃色2分、棕黃色3分。綜合判定取著色程度和陽性細胞百分數分值之積，≤1分記為陰性，＞1～2分記為弱陽性＞2～4分記為陽性，＞4分記為強陽性。

1.3 統計學方法：應用SPSS16.0軟件進行數據分析，計數資料比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

ERK2在慢性宮頸炎組織中陽性表達率13.6％（3/22），在宮頸癌組織陽性表達率為74.3％（52/70），主要表達于胞質中。ERK2在宮頸癌組織中的陽性表達率明顯高于慢性宮頸炎組織，差異有統計學意義（P＜0.05）。

ERK2表達與患者宮頸癌臨床分期、組織分化程度及淋巴結是否轉移有關（P＜0.05），而與患者年齡、病理類型無關（P＞0.05），見表1。

表1 ERK2陽性表達與宮頸癌臨床病理特征的關系

3 討論

在細胞的增殖、分化和腫瘤形成過程中，Ras/Raf/MEK/MAPK通路發揮了重要作用，而Ras/Raf/MEK/ERK是研究最多、最經典的級聯。ERK家族由ERK1～7［4］等7位成員組成。ERK通過磷酸化為p-ERK而被活化。國外研究［5］發現，活化的ERK可調節多種癌基因和細胞周期基因的表達，阻止細胞凋亡，促進細胞增殖。ERK蛋白在除了腦組織以外的各種上皮組織來源的腫瘤中表達水平均高于正常組織［6］。ERK2蛋白在多種腫瘤組織中均有表達，如鼻咽癌、乳腺癌、胃癌及卵巢癌等，并與腫瘤的發生發展密切相關。本研究結果顯示，ERK2在宮頸癌組織中的陽性表達率為74.3％，明顯高于正常宮頸組織的13.6％，差異有統計學意義（P＜0.05）；隨宮頸癌分期的增加，其陽性表達率明顯增高（P＜0.05）；有淋巴結轉移者陽性表達率明顯高于無淋巴結轉移者（P＜0.05）；隨宮頸癌組織分型的降低，ERK2的陽性表達率明顯增高（P＜0.05）。說明ERK2與宮頸癌的發生發展有關。同時也發現ERK2的陽性表達率與年齡及病理分型無關，這與周建維等［7］在上皮性卵巢組織中的研究結果相似。

總之，腫瘤的發生是多種因素相互作用的結果，宮頸癌也不例外。ERK級聯通路涉及的基因較多，作用機制復雜，產生較多的生物學效應，可能通過多種途徑、多步驟促進腫瘤細胞的增殖和轉移。隨著對ERK2的深入研究，ERK2有望成為判斷宮頸癌預后的腫瘤標志物，并為宮頸癌治療的靶基因奠定基礎。

［1］DELMASC，MANENTI S，BOUDJELAL A，et al.The p42/p44 mitogen-antivated protein kinase activation triggers p27Kip1 degradtion independently of CDK2/cyclin E in NIH 3T3 cells［J］. JBiol Chem，2001，276（37）：34958-34965.

［2］SEGER R，KREBSEG.The MARK signaling cascacle［J］.FASEB J，1995，9（9）：726-735.

［3］SHIN EY，MA EK，KIM CK，etal.Src/ERK but not phospholipase D is involved in keratinocyte growth factor-stimulated secretion of matrixmetalloprotease-9 and urokinase-type plasminogen activator in SNU-16 human stomach cancer cell［J］.J Cancer Res Clin Oncol，2002，128（11）：596-602.

［4］POSAS F，TAKEKAWA M，SAITO H.Signal transduction by MAP kinase cascades in budding yeast［J］.Curr Opin Microbiol，1998，1（2）：175-182.

［5］MORIM，MIMORI K，SHIRAISHI T，et al.p27 expression and gastric carcinoma［J］.Nat Med，1997，3（6）：593-596.

［6］孫秀娣，牧人，周有尚，等.中國胃癌病死率20年變化情況分析及其發展趨勢預測［J］.中華腫瘤雜志，2004，26（1）：4-9.

［7］周建維，干寧悅，張偉江，等.上皮性卵巢腫瘤組織MKP-1及p-ERK1/2蛋白表達的研究［J］.分子生物學報，2009，6（3）：3-4.

（本文編輯：劉斯靜）

R711.74

B

1007-3205（2013）11-1460-02

2012-11-05；

2013-02-17

馬志剛（1975-），男，河北順平人，河北省保定市第三醫院主治醫師，醫學學士，從事骨外科疾病診治研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2013.11.040