覃軍,盧斌
(1.廣西興業縣動物疫病預防控制中心,廣西興業537800;2.廣西興業縣石南鎮水產畜牧獸醫站,廣西興業537800)
(一)發病情況 2012年8月25日,廣西興業縣陳某的養雞戶,飼養肉雞2 500羽,免疫程序按常規進行,在50日齡發病,每天均有雞死亡,發病率高達15.3%以上,死亡率則為3.18%,病程歷時7 d。病雞以精神沉郁、食欲減退、腹瀉、死亡為主要特征,起初該養殖戶判斷為球蟲病,根據經驗用磺胺藥治療,發現無法控制疫病,后拿到獸醫站診斷,經臨床診斷、病理剖檢及實驗室檢驗,診斷為H9N2亞型禽流感并發大腸桿菌病。
(二)臨床癥狀 發病雞群采食量明顯減少,飲水增多,飲水時不斷從口角甩出粘液;精神沉郁,羽毛蓬亂,垂頭縮頸;鼻腔分泌物增多,流鼻液,鼻竇腫脹;眼結膜充血,流淚;頭部水腫,雞冠和肉垂淤血,呈紫黑色,一側或兩側肉垂增厚、變硬,觸之熱感增加;腿上無毛處有紫色出血斑。雞群發病后的當天或第二天即表現出嚴重程度不一的呼吸道癥狀,有的表現為呼嚕、咳嗽,呼吸 音,有的呼吸困難,張口伸頸,每次呼吸時均發出尖叫聲;有的呼吸道癥狀較輕,僅在夜間安靜時能聽到。病雞腹瀉,拉水樣稀糞,常帶有未消化完全的飼料,有的拉灰綠色或黃綠色稀糞。
(三)剖檢病變 氣管出血,有粘液,個別支氣管堵塞,胸、腹氣囊混濁、增厚,呈白色或淡黃色干酪樣,心肌出血,胰腺邊緣出血,脾臟白色小壞死點,盲腸淋巴結出血,腎臟出血,個別的雞只腺胃乳頭出血及肌胃角質層下有出血,有的臟器表面有白色纖維素性滲出物。
(四)診斷
1.病料采集。因病雞死后時間過長,腸內的大腸桿菌可通過腸壁侵入腹腔擴散到其他組織,故應從新鮮病料中采樣。死亡的雞胚和有臍炎的病雞卵黃囊是最好的病料,有纖維素沉著的心包囊和肝臟,被感染關節的液體或膿汁及干酪物,輸卵管內、有腹膜炎的腹腔內、氣囊內和眼內的干酪物等都是較好的病料。
2.細菌分離。鉤取上述病料,于普通營養瓊脂培養基或麥康凱、遠騰氏等鑒別培養基上劃線分離培養,獲得單個存在的菌落,供進一步試驗用。
3.細菌鑒定。在瓊脂平板上,37℃培養24 h,菌落邊緣整齊,隆起,灰白色,直徑1~3 mm,在肉湯中均勻混濁生長。菌落在麥康凱培養基上呈紅色,在伊紅美藍平板上呈黑紅色帶有金屬光澤,在遠騰氏平板上呈紅色。大腸桿菌可在上述的鑒別培養基上做初步鑒定,然后進一步做生化試驗。分離菌產生靛基質,在檸檬酸鹽培養基上不生長,能發酵葡萄糖、乳糖、甘露醇,產酸產氣,則確定為大腸桿菌。
4.抗體檢測。雞群在8日齡接種過H9N2滅活苗,發病階段采血,經H9N2亞型血凝抑制抗體檢測,抗體效價在1:8~1:128。
5.PCR檢測。雞群采集氣管棉拭子和泄殖腔棉拭子,分別做NDPCR和H9N2 PCR檢測,ND核酸擴增陰性,H9N2核酸擴增陽性。
6.確診。結合發病情況、臨床癥狀、剖檢病變及實驗室檢測,確診為H9N2亞型禽流感與大腸桿菌病混合感染。
(五)防治措施
1.所有雞群不論發病與否,均全部緊急接種H9N2亞型禽流感疫苗,注射劑量為0.5 ml/羽。
2.用恩諾沙星或環丙沙星飲水、混料或肌肉注射。每毫升5%恩諾沙星或5%環丙沙星溶液加水l kg(每千克飲水中含藥約50 mg),讓其自飲,連續3~5 d;用2 %的環丙沙星預混劑250 g均勻拌入100 kg飼料中(即含原藥5 g),飼喂1~3 d。肌肉注射,每千克體重注射0.1~0.2 ml恩諾沙星或環丙沙星注射液。
3.加強飼養管理。要注意雞舍通風換氣,雞舍溫、濕度適宜,增強雞體抵抗力。要盡可能減少各種應激因素的刺激。要及時清理雞糞,進行帶雞消毒,每日1次,連續消毒1周;對用具、食槽、水槽、接觸病雞的人員、污染場地嚴格消毒,病死雞做深埋處理。
經采取以上措施,在注射疫苗后5 d內,雞群的發病數、死亡數與注射疫苗前基本一致,從第6天開始,發病數逐漸減少,第12天后,除個別雞死亡外,雞群病情基本穩定,沒再出現新的發病死亡病例。