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基于核酸分子雜交的免疫芯片抗體固定新方法

2013-04-12 00:00:00沙莎殷赟高曉蓮黃莊榮余挺鄭曉冬
分析化學(xué) 2013年2期

摘要 基于核酸分子雜交原理構(gòu)建了一種新型抗體固定方法。先將抗體與寡核苷酸單鏈交聯(lián),再將兩者的復(fù)合物與固相載體表面上的互補(bǔ)寡核苷酸鏈結(jié)合,從而將抗體固定到載體的表面。在磁珠表面對(duì)該固定方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn),證明了方法的可行性。以本方法構(gòu)建了針對(duì)轉(zhuǎn)基因Bt Cry1Ac蛋白的免疫芯片,用Cy3標(biāo)記二抗對(duì)其探針固定效果進(jìn)行分析,并且在芯片上對(duì)Bt Cry1Ac蛋白進(jìn)行梯度濃度檢測(cè)試驗(yàn)。結(jié)果表明,以本方法構(gòu)建的抗體芯片,探針?lè)植季哂辛己玫奶禺愋裕惶结槍臃植季鶆颍翘禺愇叫。粰z測(cè)靈敏度達(dá)到0.01~0.05

SymbolmA@ g/L;此外,通過(guò)雜交核酸雙鏈的解離成功實(shí)現(xiàn)了芯片的再生,有助于解決傳統(tǒng)抗體固定方法中芯片不可再生的問(wèn)題。

關(guān)鍵詞 免疫芯片;抗體固定;抗體寡核苷酸復(fù)合物;核酸雜交

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