鼻咽癌患者放射治療前后齲活性及唾液中鈣、磷質量濃度的變化

劉賀　闕國鷹　鄒莉

[摘要] 目的 探討鼻咽癌患者放射治療前后齲活性的變化，定量分析鼻咽癌患者放射治療前后唾液中的鈣、磷質量濃度的變化。方法 選擇鼻咽癌患者28例為試驗組，健康志愿者20例為對照組。采用刃天青紙片法檢測試驗組放射治療前、放射治療（放射劑量為70 Gy）后齲活性的變化；采用火焰原子吸收光譜法和鉬銻抗分光光度法測定試驗組放射治療前、放射治療（放射劑量為70 Gy）后及對照組非刺激性唾液中鈣、磷的質量濃度。結果 試驗組放射治療后齲活性增加，與治療前的差異有統計學意義（P<0.01）。試驗組放射治療前唾液中鈣質量濃度為（63.19±

3.27） mg·L-1，治療后為（33.38±0.32） mg·L-1；放射治療前磷質量濃度為（132.96±5.13） mg·L-1，治療后為（49.18±

2.66） mg·L-1。放射治療前后唾液中鈣、磷質量濃度的差異均有統計學意義（P<0.01），放射治療后低于治療前。結

論 鼻咽癌患者放射治療后的齲活性增加，唾液中鈣、磷質量濃度降低。

[關鍵詞] 鼻咽癌； 放射治療； 齲活性； 唾液； 鈣； 磷

[中圖分類號] R 781.1 [文獻標志碼] A [doi] 10.7518/hxkq.2013.01.014 鼻咽癌是我國頭頸部高發的惡性腫瘤之一，放射治療是其首選治療方法。本研究采用刃天青紙片法檢測鼻咽癌患者放射治療前后的齲活性，評估放射治療后患者的齲易感性，同時采用火焰原子吸收光譜法和鉬銻抗分光光度法檢測放射治療前后唾液中鈣、磷含量，探討鼻咽癌患者放射治療后的齲活性及唾液中鈣、磷含量的變化。

1 材料和方法

1.1 研究對象

試驗組選自湖南省腫瘤醫院放射治療科11病室2010年3—10月收治的初診鼻咽癌患者，共28例，其中男15例，女13例，年齡39～52歲，齲失補指數低于5，均接受鈷-60 γ線或直線加速器8 MV X線面頸聯合

野外照射。連續放射治療的劑量為70 Gy，分割劑量為每次2 Gy，每周5次；治療時間為7周；放射時涎腺主要是腮腺都包括在照射野內。齲活性實驗及采集唾液標本前2周均未服用抗生素、激素及免疫抑制劑。對照組為健康志愿者20例，男10例，女10例，年齡37～49歲，齲失補指數低于5，采集唾液標本前2周均未服用抗生素、激素及免疫抑制劑。試驗組和對照組在年齡、齲失補指數等項目上經統計分析無明顯差異。要求所有研究對象無全身系統性疾病，無影響唾液腺功能的疾病病史，如唾液腺炎癥、腫瘤、干燥綜合征等。

1.2 主要器械、材料以及標本采集

刃天青紙片；TAS-990SUPER型原子吸收分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司），UV-2550PC型紫外-可見分光光度計（日本島津公司）。

1.2.1 刃天青紙片的制作 稱取10 g蔗糖、0.2 g聚乙烯醇、0.027 5 g刃天青，加水100 mL充分溶解后高壓滅菌，冷卻至室溫后用磷酸鹽緩沖液調pH值為7.0。用定性濾紙制作濾紙片，高壓滅菌后在無菌室中將濾紙片置于上述刃天青溶液中2 h，然后將濾紙夾出至無菌平皿中，置于恒溫箱烘干備用。

1.2.2 唾液標本的采集 鼻咽癌患者均于入院后第2天取第1次唾液標本，于接受放射治療達70 Gy后的第2天采集第2次唾液標本；對照組取1次唾液標本。采集時間均為上午9點，要求取標本前2 h禁食。采用吐出法收集非刺激性全唾液2～5 mL，具體方法如下：用蒸餾水反復漱口1 min，10 min后棄去第一口唾液，靜坐低頭，待口底有唾液聚集后，每一分鐘將唾液吐至一次性杯子中，然后將杯子中的唾液轉移至5 mL EP管中。唾液收集完成后-20 ℃低溫冰箱凍存。

1.3 齲活性檢測

1.3.1 檢測方法 將37 ℃恒溫箱置于病房配藥室備用。用無菌鑷子將刃天青紙片置于舌下，待試紙完全濕潤后用消毒聚乙烯薄膜將其夾住，回形針固定，立即放入恒溫箱，15 min后取出刃天青紙片，與標準比色板對照，記錄齲活性實驗（caries activity test，CAT）分值。分別于入院后第2天和放射治療第7周的周六進行檢測，時間均為上午10點。

1.3.2 結果判定 固定一名無色弱、色盲，經培訓合格的口腔醫師，采用標準比色板進行對照，判斷刃天青紙片的變色程度，記錄CAT分值：紫藍色（-），CAT分值記為0；紫紅色（+），記為1；紅色（++），記為2；紅色變為白色（+++），記為3。

1.4 唾液中鈣、磷質量濃度的檢測

采用火焰原子吸收光譜法和鉬銻抗分光光度法檢測鼻咽癌患者放射治療前后及健康志愿者唾液中鈣、磷的質量濃度。

1.4.1 鈣的檢測 將所取唾液標本置于離心機中，

3 000 r·min-1離心5 min后取上清液。用移液器準確吸取上清液1 mL至30 mL錐形瓶中，加入濃硝酸5 mL、濃高氯酸0.5 mL，在電熱板上加熱消解至濃高氯酸冒白煙，溶液清亮無色后取下，冷卻后轉入10 mL具塞比色管中，去離子水定容至刻度，搖勻待測，同時做空白實驗儀器調零。準確吸取100 μg·mL-1鈣標準液0、1.0、2.0、3.0、4.0 mL于5只100 mL容量瓶中，分別加入1 mL 20 g·L-1 La2O3溶液，用1%鹽酸溶液定容至刻度，該系列鈣標準液的質量濃度分別為0、1.0、2.0、3.0、4.0 μg·mL-1。在原子吸收分光光度計上，測量其吸光度，繪制校正曲線。準確吸取上述消解液2 mL于10 mL比色管中，加10 mL 20 g·L-1 La2O3溶液，用1%鹽酸溶液定容至刻度，在原子吸收分光光度計上，于波長422.7 nm下測量吸光度，通過標準曲線計算鈣的質量濃度。

1.4.2 磷的檢測 將所取唾液標本置于離心機中，3 000 r·min-1離心5 min，準確吸取唾液樣品上清液

1 mL至30 mL錐形瓶中，加入濃硫酸0.8 mL、濃高氯酸0.2 mL，在電熱板上加熱消解至濃高氯酸白煙冒盡，硫酸開始回流時取下，冷卻后用去離子水將溶液轉入10 mL比色管中，定容至刻度，搖勻待測，同時做空白實驗儀器調零。準確吸取5 μg·mL-1磷標準液0、0.5、1.0、1.5、2.0 mL于25 mL容量瓶中，加蒸餾水至10 mL，滴入1滴2，6-二硝基酚指示劑，搖勻，用10%Na2CO3溶液和1 mol·L-1硫酸溶液調節pH值，至溶液呈淡黃色或微黃色，然后加入2.5 mL鉬銻抗顯色劑，用去離子水定容至刻度，搖勻，測定做標準曲線。準確吸取上述消解液0.5 mL于25 mL容量瓶中，加去離子水至10 mL，滴入1滴2，6-二硝基酚指示劑，搖勻，用10%Na2CO3溶液和1 mol·L-1硫酸溶液調節pH值，至溶液呈淡黃色或微黃色后加入2.5 mL鉬銻抗顯色劑，用去離子水定容至刻度，搖勻，靜置2 h，在分光光度計上700 nm處測定吸光度，通過標準曲線計算磷的質量濃度。

1.5 統計學處理

使用SPSS 17.0軟件對鼻咽癌患者放射治療前后的齲活性進行秩和檢驗，對唾液中鈣、磷質量濃度進行配對t檢驗，鼻咽癌患者放射治療前和對照組唾液中鈣、磷質量濃度進行兩樣本t檢驗，檢驗水準為雙側α=0.05。

2 結果

2.1 齲活性的變化

鼻咽癌患者放射治療前后的CAT記分情況見表1：

經等級資料秩和檢驗，放射治療后齲活性高于放射治療前，差異有統計學意義（Z=-3.695，P<0.01）。

2.2 唾液中鈣、磷質量濃度的變化

鼻咽癌患者放射治療前后及對照組唾液中鈣、磷質量濃度見表2。經統計學檢驗：鼻咽癌患者治療前和對照組唾液中鈣的質量濃度無明顯差異（t=-1.605，

P>0.05），但治療前鈣質量濃度明顯高于治療后（t=

47.976，P<0.01）；鼻咽癌患者治療前和對照組唾液中磷的質量濃度無明顯差異（t=0.41，P>0.05），但治療前磷質量濃度明顯高于治療后（t=75.383，P<0.01）。

3 討論

放射性唾液腺損傷是鼻咽癌患者放射治療后常出現的并發癥之一。鼻咽癌放射治療時，腮腺、下頜下腺、舌下腺等三大唾液腺和各小唾液腺均在照射野內，唾液腺的結構和功能都會發生損傷，導致唾液腺腺體、導管、淋巴管、神經損傷并可引起唾液分泌和排泄功能改變。有研究[1-3]表明：唾液腺放射性損傷后，唾液的分泌量和速率都會明顯下降，唾液中多種有機和無機成分的含量都會發生變化。本研究發現：鼻咽癌患者經70 Gy放射治療后，齲活性明顯增加，其原因可能是鼻咽癌患者接受放射治療后，口腔內環境發生了改變所致。一方面，放射治療后口腔致齲菌會發生變化，放射治療后鏈球菌屬檢出量和構成比升高[4]，變異鏈球菌占菌斑可培養細

菌的百分比也明顯增加[5]，離體菌斑的產酸能力增

高[6-7]；另一方面，放射治療后唾液流速、流量下降，

對酸的緩沖能力以及對碳水化合物的沖刷能力下降[7]，也會導致齲活性增加。

放射性齲是鼻咽癌患者接受放射治療后，牙體硬組織發生的一種嚴重進行性破壞性疾病，是典型的猖獗性齲，也是放射治療后的遲發性反應之一。放射性齲的發生主要與鼻咽癌患者放射治療后口腔內環境的改變有關。唾液是口腔內環境的重要組成部分之一，也是牙齒的外環境，對牙齒的代謝有重要的影響。唾液中鈣、磷等無機成分有著十分重要的生理意義。一方面，鈣、磷等無機成分使唾液能夠維持牙體組織的完整性，促進牙齒萌出之后釉質的成熟；另一方面，富含鈣、磷的唾液環境也能促進牙齒早期齲損和脫礦物質的再礦化。大量研究[8-11]證實：唾液中鈣、磷含量的變化與齲病的發生密切相關。本研究發現放射治療后唾液中的鈣、磷質量濃度較放射治療前明顯下降。其發生機制可能是唾液腺泡細胞發生放射性損傷，引起腺泡細胞鈣、磷成分和水分分泌功能發生障礙，導致唾液中鈣、磷和水分含量均明顯減少；同時，放射線一方面破壞唾液腺導管細胞，導致水分轉運發生障礙，使得不經導管上皮細胞重吸收而排泄的水分相對增多，另一方面導致鈉離子、氯離子重吸收障礙，使唾液由低滲狀態變為高滲狀態，也影響了水的轉運，從而導致唾液中鈣、磷量下降。單兆臣等[12]研究了小型

豬唾液腺的放射損傷，發現放射治療后唾液中鈣離子含量明顯下降。劉珈等[13]檢測鼻咽癌患者放射治

療（放射劑量分別為10、20、30、40 Gy）后采集的唾液標本，發現鈣離子的含量略有升高，這可能是與其采集的是放射治療早期的刺激性唾液標本有關。刺激性唾液流速變快，鈉、氯離子不經唾液腺導管再吸收，重碳酸鹽濃度提高，導致pH值提高，鈣離子含量亦隨之升高[14]。

放射性齲的病情進展猖獗，治療困難且效果較差，因而重在預防。目前，鼻咽癌放射治療患者在放射治療期間多采用各種氟化物防齲，如采用局部涂氟保護漆、用氟化物溶液漱口、含氟牙膏刷牙等，局部使用含氟凝膠也有很好的預防效果。本研究發現鼻咽癌患者放射治療后齲活性增加，唾液中鈣、磷質量濃度減少，提示鼻咽癌患者放射治療期間和放射治療后應在使用氟化物防齲的同時，采取各種方法增加口腔環境中的鈣、磷含量。

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（本文編輯 吳愛華）