高效液相色譜法測(cè)定帕米膦酸二鈉含量

呂治紅，霍建富

（山西康寶生物制品股份有限公司，山西 長(zhǎng)治046011）

帕米膦酸二鈉作為第二代雙膦酸鹽類藥物，在抑制破骨細(xì)胞的活性方面有明顯效果，作為治療多發(fā)性骨髓瘤溶骨性病變的有效藥物已被廣泛應(yīng)用于臨床［1］，并具有療效好、安全性高的特點(diǎn)，尤其是治療惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移患者時(shí)，止痛效果好、不良反應(yīng)輕，病人樂(lè)于接受［2］。

作者在此采用高效液相色譜法測(cè)定帕米膦酸二鈉的含量，具有準(zhǔn)確、快捷的特點(diǎn)。

1 實(shí)驗(yàn)

1．1 試藥與儀器

樣品：帕米膦酸二鈉原料藥（批號(hào)120201、120202、120203），山西康寶生物制品股份有限公司。

對(duì)照品：由批號(hào)120201帕米膦酸二鈉精制而得。

甲醇、氯苯、N，N－二甲基甲酰胺（DMF），分析純。

0．4%乙二胺四乙酸二鈉的氫氧化鈉溶液：取乙二胺四乙酸二鈉0．4g與氫氧化鈉0．034g，加水溶解并稀釋至100mL。

硼酸鹽緩沖溶液（pH值10．0）：取無(wú)水四硼酸二鈉6．04g與氫氧化鈉1．68g，加水溶解并稀釋至1000 mL。

LC6A型液相色譜儀，Echrom98色譜工作站，Zorbax SB－C18色譜柱（4．6mm×250mm，5μm），RF－535型熒光檢測(cè)器。

1．2 供試品溶液和對(duì)照品溶液的配制

避光操作，取樣品適量（約相當(dāng)于帕米膦酸二鈉20mg），精密稱定，置100mL量瓶中，加硼酸鹽緩沖溶液（pH值10．0）40mL，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取10mL，置100mL量瓶中，精密加入0．1%熒光胺的乙腈溶液10mL，邊加邊振搖，在20～40s內(nèi)加完，放置15min，用硼酸鹽緩沖溶液（pH值10．0）稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

另取對(duì)照品約20mg，同法操作，制備對(duì)照品溶液。

1．3 HPLC方法［3］

1．3．1 色譜條件

色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠柱；流動(dòng)相為乙腈－0．4%乙二胺四乙酸二鈉的氫氧化鈉溶液（15∶85），熒光檢測(cè)器，激發(fā)波長(zhǎng)為395nm，發(fā)射波長(zhǎng)為480 nm，流速為1．0mL·min－1，進(jìn)樣量為10μL。……