粗柄雞樅菌子實(shí)體中氨基酸成分測(cè)定

施渺筱，楊坤耀，李祝，何映霞

（1.貴州省安順學(xué)院化學(xué)與生物農(nóng)學(xué)系，貴州安順 561000；2.貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院真菌資源研究所，貴州貴陽(yáng) 550025）

粗柄雞樅菌子實(shí)體中氨基酸成分測(cè)定

施渺筱1，楊坤耀2，李祝2，何映霞1

（1.貴州省安順學(xué)院化學(xué)與生物農(nóng)學(xué)系，貴州安順 561000；2.貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院真菌資源研究所，貴州貴陽(yáng) 550025）

摘 要：采用L-8800型氨基酸自動(dòng)分析儀，色譜條件：標(biāo)準(zhǔn)分析柱4.6 mm×60.0 mm，反應(yīng)柱溫度：57℃，反應(yīng)器溫度：136℃，測(cè)定了野生粗柄雞樅菌子實(shí)體菌柄及菌蓋中氨基酸組成。結(jié)果表明：粗柄雞樅菌子實(shí)體菌蓋中含有16種氨基酸，而菌柄中只含有15種氨基酸，菌柄比菌蓋缺少甲硫氨酸。粗柄雞樅菌的菌蓋氨基酸總量（29.361 2%）高于菌柄（21.1567%）。由此可見(jiàn)，粗柄雞樅菌子實(shí)體，尤其菌蓋氨基酸種類(lèi)齊全，含量豐富，是一種天然綠色、營(yíng)養(yǎng)健康的食品。

關(guān)鍵詞：粗柄雞樅菌；氨基酸；L-8800型氨基酸自動(dòng)分析儀

野生食用菌多為藥食兼用，其含有多種維生素和人體必需的礦質(zhì)元素，還含有豐富平衡的氨基酸組分，能增強(qiáng)人體的免疫機(jī)能，是寶貴的醫(yī)藥資源[1-2]。雞樅菌是著名的野生食用菌，其屬于擔(dān)子菌亞門(mén)（Basidiomycotina），層菌綱（Hymenomycetes），傘菌目（Agaricales），口蘑科（Tricholomataceae），雞樅菌屬（或稱(chēng)蟻巢傘屬）（Termitomyces）[3]。雞樅菌屬是法國(guó)人海姆[4]（R.Heim）于1942年根據(jù)T.striatus的模式種建立的。粗柄雞樅菌（Termitomyces robustusHeim）又名火把雞樅菌，是雞樅菌屬中的一個(gè)種，其菌柄粗壯、膨大，約2 cm～8.5 cm。菌蓋大型，深褐色，直徑3 cm～20 cm，中央尖突不明顯[5]。與白蟻共生，子實(shí)體僅能在白蟻巢上生長(zhǎng)，因白蟻菌圃中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，能為雞樅菌的生長(zhǎng)繁殖提供良好的營(yíng)養(yǎng)保證[6-7]。

本實(shí)驗(yàn)利用氨基酸分析儀，對(duì)貴州省安順市普定縣雞場(chǎng)鄉(xiāng)所產(chǎn)的野生粗柄雞樅菌菌柄和菌蓋中的氨基酸進(jìn)行測(cè)定分析。

1 材料

1.1 供試材料

粗柄雞樅菌（Termitomyces robustusHeim）：采自安順市普定縣雞場(chǎng)鄉(xiāng)。將雞樅菌子實(shí)體菌蓋、菌柄分離后分別切半，置于鼓風(fēng)干燥箱中55℃干燥，烘至恒重，粉碎，過(guò)40目篩，備用。

1.2 儀器

FZ102型植物粉碎機(jī)：天津市泰斯特儀器有限公司；DB—211BSC型電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱：成都天宇實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限責(zé)任公司；L-8800型氨基酸自動(dòng)分析儀：日本HITICHI公司。

2 方法

2.1 樣品前處理

準(zhǔn)確稱(chēng)取干粉試樣（精確到0.000 1 g），使試樣蛋白質(zhì)含量在10 mg～20 mg范圍內(nèi)；將試樣放于水解管中。在水解管內(nèi)加6 mol/L的鹽酸10 mL～15 mL，加入新蒸餾的苯酚3滴～4滴，再將水解管放人冷凍劑中，冷凍5 min，接到真空泵的抽氣管上。抽真空，然后充人高純氮?dú)狻Ｔ俪檎婵粘涞獨(dú)猓貜?fù)3次后，在充氮?dú)鉅顟B(tài)下封口或擰緊螺絲蓋將已封口的水解管放在（110±1）℃的恒溫干燥箱內(nèi)，水解22 h后，取出冷卻。打開(kāi)水解管，將水解液過(guò)濾后，用去離子水多次沖洗水解管，將水解液全部轉(zhuǎn)移到50 mL容量瓶?jī)?nèi)用去離子水定容。吸取濾液1 mL于5 mL容量瓶?jī)?nèi)，用真空干燥器在40℃～50℃干燥，殘留物用1 mL～2 mL水溶解，再干燥，反復(fù)進(jìn)行兩次，最后蒸干，用1 mL pH2.2的緩沖液溶解，供儀器測(cè)定用。

2.2 測(cè)定

準(zhǔn)確吸取0.200mL混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)，用pH2.2的緩沖液稀釋到5mL，此標(biāo)準(zhǔn)稀釋液濃度為5.00nmol/50μL，作為上機(jī)測(cè)定用的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)，自動(dòng)進(jìn)樣20μL（測(cè)定流速：緩沖溶液為0.400mL/min，茚三酮溶液0.350mL/min），測(cè)得樣品色譜圖見(jiàn)圖1～圖4（圖1、圖3為通道1的樣品圖譜，圖2、圖4為通道2的樣品圖譜，只有脯氨酸一種）。

圖1 粗柄雞樅菌菌蓋氨基酸圖譜Fig.1 Amino acids in pileus of Termitomyces robustus Heim

2.3 結(jié)果計(jì)算

以峰面積測(cè)定結(jié)果，用外標(biāo)法計(jì)算各氨基酸含量。

3 結(jié)果與討論

本實(shí)驗(yàn)對(duì)粗柄雞樅菌的菌蓋、菌柄進(jìn)行了氨基酸含量測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。

圖2 粗柄雞樅菌菌蓋脯氨酸圖譜Fig.2 Pro in pileus of Termitomyces robustus Heim

圖3 粗柄雞樅菌菌柄氨基酸圖譜Fig.3 Amino acids in stipes of Termitomyces robustus Heim

圖4 粗柄雞樅菌菌柄脯氨酸圖譜Fig.4 Pro in stipes of Termitomyces robustus Heim

由表1、圖1、圖2可知，粗柄雞樅菌的菌蓋中含有16種氨基酸。由表1、圖3、圖4可知菌柄中含有15種氨基酸（缺少甲硫氨酸）。其中含有蘇氨酸、纈氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和賴(lài)氨酸7種人體必需氨基酸（色氨酸未測(cè)）。粗柄雞樅菌的菌蓋氨基酸總量為29.36%，菌柄氨基酸總量為21.16%，菌蓋的氨基酸總量高于菌柄，是菌柄的1.39倍。且每一種氨基酸在菌蓋中的含量均高于菌柄中的含量。其中，菌蓋中的異亮氨酸是菌柄的2.21倍，丙氨酸是菌柄的1.57倍，苯丙氨酸是菌柄的1.65倍，賴(lài)氨酸是菌柄的1.57倍，精氨酸和絲氨酸分別是菌柄的1.5倍。

4 結(jié)論

從以上數(shù)據(jù)中可得出，粗柄雞樅菌的菌蓋和菌柄的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值有所差別。由于粗柄雞樅菌的菌蓋比菌柄多含一種人體必需氨基酸，且每一種氨基酸在菌蓋中的含量均高于菌柄中的含量，所以粗柄雞樅菌菌蓋的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值要高于菌柄。由此可見(jiàn)，粗柄雞樅菌子實(shí)體，尤其菌蓋氨基酸種類(lèi)齊全，含量豐富，是一種天然綠色、營(yíng)養(yǎng)健康的食品。

表1 粗柄雞樅菌菌蓋和菌柄中氨基酸組成Table 1 Content of amino acids from pileus and stipes of Termitomyces robustus Heim %

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[1]羅思遠(yuǎn),席武俊.楚雄州野生食用菌類(lèi)資源的開(kāi)發(fā)與利用[J].楚雄師范學(xué)院學(xué)報(bào),2007,22(3):29-33

[2]劉穎.我國(guó)食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展存在的問(wèn)題及對(duì)策[D].中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),2005

[3]Kirk P M,Cannon P F,David J C,et al.Ainsworth&Bisby ’s dictionaryofthefungi[M].Wallingford,UK:CAB1Publishing,2001

[4]Heim R.Etudes descriptives et expérimentales sur lesagarics termitophiles d’Afrique tropicale[J].Mémoires del’Académie des Sciences de l’Institut de France,1941,64:25-29

[5]賀新生.中國(guó)雞樅菌的種類(lèi)與分布[J].食用菌,1995,14(6):3-4

[6]張貞華,董兆良.黒翅土白蟻及其菌圃的糖、脂肪、蛋白質(zhì)、維生素、氨基酸分析[J].科技通報(bào),1993,9(1):41-43

[7]張貞華,董兆良.黒翅土白蟻及其菌圃的9種必需金屬元素組成分析[J].科技通報(bào),1991,7(6):340-342

Determination of Amino Acids Content in Pileus and Stipes of Termitomyces robustus

SHI Miao-xiao1，YANG Kun-yao2，LI Zhu2，HE Ying-xia1
（1.Anshun Normal Universits，Department of Chemistry，Anshun 561000，Guizhou，China；2.Institute of Fungus Resource，College of Life Science，Guizhou University，Guiyang 550025，Guizhou，China）

Abstract：To determine the content of amino acids from pileus and stipes ofTermitomyces robustusby L-8800 amina acid mobile analyzer.Chromatographic condition：standard column was 4.6 mm×60.0 mm，temperature of reactive column and reactor part were respactively 57℃and 136℃.The results showed that 16 kinds amino acids were assayed in its pileus， but 15 kinds amino acids （no Met）were assayed in its stipes.The total content of amino acid in its pileus were higher（29.361 2%）than the stipes（21.156 7%），There are abundant amino acids in theTermitomyces robustus，it is a natural and nutritional food.

Key words：Termitomyces robustusHeim；amino acids；L-8800 amina acid mobile analyzer

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2013.14.024

貴州省教育廳自然科學(xué)研究項(xiàng)目[黔教科2009（0075）號(hào)]

施渺筱（1971—），女（漢），副教授，碩士，從事生物化學(xué)及微生物學(xué)研究。

2012-10-07