正交試驗法優選消瘤丸的提取工藝

王文驪 劉軍鋒 高錦成 陜西中醫學院附院（咸陽 712000）

消瘤丸由白花蛇舌草、半枝蓮、茵陳蒿、黃芪等十一味中藥材組成，主要用于治療婦科腫瘤［1］。白花蛇舌草、半枝蓮、茵陳蒿、黃芪、甘草五味藥材作為水提工藝的主要藥物，野黃芩苷作為半枝蓮的主要代表成分。為了有效的控制該工藝，我們通過正交工藝設計，對消瘤丸水提工藝采用高效液相色譜法測定野黃芩苷的含量，結合干膏率兩個指標，確定最佳工藝。

1 儀器與試藥 1.1 儀器 日本島津2010液相色譜儀，class－vp數據工作站；BP211D型電子分析天平（德國塞多利斯天平有限公司）d＝0.01mg；BS210S型電子分析天平（北京塞多利斯天平有限公司）d＝0.1mg；LXJ－Ⅱ型臺式離心機（南京第一醫療器械廠）；DK－98－ⅡA型水浴鍋（天津市泰斯特儀器有限公司）。

1.2 試藥 白花蛇舌草、半枝蓮、茵陳蒿、黃芪以上藥材購于陜西省藥材公司。野黃芩苷購于中國藥品檢驗鑒定中心，批號：0421－212604甲醇為色譜純；其余試劑均為分析純；水為蒸餾水。

2 試驗方法 2.1 檢測方法的確定 2.1.1 干膏率的測定：精密量取離心濾過后的濾液100mL，置已干燥至恒重的蒸發皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3h，置干燥器中冷卻0.5h，迅速稱重，計算干浸膏得率，結果見表2。

2.1.2 測定野黃芩苷含量［2］：供試品溶液的制備

精密量取相當于1g半枝蓮離心過濾后的煎液，水浴蒸干，殘渣用100mL甲醇轉溶至三角瓶中，稱重，超聲提取30min，稱重，補加減失的溶媒，精密量取25mL，置蒸發皿中蒸干，殘渣用20%甲醇25mL溶解并定量至刻度，搖勻，濾過，即得。

對照品溶液的制備：精密稱取野黃芩苷對照品適量，加甲醇制成每1mL含84.4μg的溶液，即得。

含量測定：依據中國藥典2005年版一部附錄ⅥD法，分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定，結果見表3。

2.2 正交試驗 2.2.1 試驗因素和水平設定：通過多因素的正交試驗，優選水提取工藝的各項參數。以水提取干浸膏得率及野黃芩苷提取量作為考核指標，以選擇最佳的工藝參數。影響水提取的主要因素有加水量、提取時間和提取次數，故我們選擇正交方式進行設計研究。為了系統考察水提取的工藝參數，我們設計的因素與水平見表1。

表1 水煎煮工藝正交試驗因素水平表

2.2.2 正交試驗安排及結果具體見表2。2.2.3 將正交試驗結果分析：結果見表3、表4。

表2 半枝蓮等水提正交試驗表

表3 浸膏得率方差分析

表4 野黃芩苷含量方差分析

直觀分析（表2）顯示，從野黃芩苷含量提取情況看影響提取效果因素順序為加水量（A）＞提取時間（B）＞提取次數（C）；從干膏率方面來看影響提取效果因素順序為提取時間（B）＞提取次數（C）＞加水量（A）。結合方差分析（表3、4）可知，提取次數、加水量、提取時間長短影響不大，以A2B3C2為最佳提取組合。考慮到藥材質地及吸水率，確定最佳工藝為水提二次，加10倍量水，煎煮2次，第1次2h，第2次煎煮1.5h。

2.2.4 驗證試驗：根據正交實驗優選的最佳水提工藝，驗證三批，結果見表5。

表5 驗證試驗結果

由驗證結果與正交試驗數據基本一致，說明工藝穩定。

3 討 論 本實驗研究白花蛇舌草、半枝蓮、茵陳蒿、黃芪的水提工藝，因其主要有效成分為野黃芩苷，故本實驗以干膏率及野黃芩苷為考察指標，通過正交試驗結合方差分析結果表明，水提影響干膏得率的主要因素是煎煮次數，加水量和煎煮時間較小。水提影響野黃芩苷得率的主因素是煎煮次數為節省工時，降低能耗，確定最佳工藝組合為為水提二次，加10倍量水，煎煮2次，第1次2h，第2次煎煮1.5h。

［1］徐華龍.消瘤丸治療乳腺疾病30例［J］.陜西中醫，1996，18（05）：202.

［2］國家藥典委員會.中國藥典［M］.北京：化學工業出版社，2005：59.