老年乳腺癌患者外科治療前后血清內皮素變化

張大偉 秦優優 習 勛 劉世浩 仲 磊 單東力 閆朝岐(哈爾濱醫科大學第二附屬醫院，黑龍江 哈爾濱 150081)

乳腺癌是嚴重威脅婦女健康及生活質量的主要惡性腫瘤之一，尤其是絕經期前后(我國50歲左右)婦女呈高發人群。雖然其手術方式不斷改進，但早期診斷及治療甚為關鍵，故乳腺癌腫瘤標志物檢測具有重要意義。內皮素及其受體通過調節有絲分裂、細胞生存周期、血管重構、腫瘤浸潤免疫細胞、侵襲轉移等方式在不同的腫瘤的生長和轉移中發揮重要作用。在乳腺腫瘤的轉移侵襲中內皮素1(ET-1)表達增加。ET-1與受體A結合并與缺氧誘導因子(HIF)協調分別促使腫瘤細胞表達趨化因子受體(CCR7)，而CCR7能誘導趨化現象和侵襲轉移〔1〕。因此，阻斷ET-1生成，就可能阻斷乳腺癌的侵襲和轉移。本研究旨在探討血清ET-1在老年乳腺癌患者保乳手術與改良根治手術前后的表達水平，以及ET-1表達濃度與乳腺癌臨床分期、組織學分級的關系。

1 材料與方法

1.1 檢測對象 收集我科2010年10月至2012年9月乳腺癌患者40例，均為女性，年齡均＞50歲，平均年齡54歲。術前均經活檢穿刺病理學證實為乳腺癌，術前均未行任何治療。保乳手術者，腫瘤距離正常切緣≥0.5 cm，術中快速病理證實各切緣無癌細胞存留;其中腫瘤≤2 cm 20例，1.5 cm≤腫瘤＜2 cm者10例，腫瘤＜1.5 cm 10例，其中5例患者不同意保乳治療，采用改良根治術治療。收集乳腺良性腫瘤疾病10例。無乳腺疾病10例，作為健康對照組。

1.2 標本收集 采集健康志愿者及乳腺良性腫瘤患者、乳腺惡性腫瘤患者術前和術后3～5 d清晨空腹肘靜脈血3～5 ml，注入含10%乙二胺四乙酸二鈉和抑肽酶的試管中混勻，4℃下，3 000 r/min離心10 min，分離的血清用0.1% 三乙醇胺(TFA)6 ml酸化3 000 r/min離心20 min后取其上清液，放置于－70℃冰箱保存待測。

1.3 血清ET-1測定 采用放射免疫法測定血清ET-1，試劑盒購自長春市生物制品所。γ計數儀，美國bookman。主要技術參數:ET-1測定范圍20～4 680 pg/ml，靈敏度10 pg/ml，回收率平均95% ～100%，批內變異系數(CV)＜5%，批間CV＜10%，正常參考值38.78～71.50 pg/ml。

1.4 統計學方法 應用SPSS13.0統計軟件進行分析，計量資料以±s表示，兩均數比較和配對比較均采用t檢驗。

2 結果

2.1 各組血清ET-1水平 乳腺癌患者術前血清ET-1水平明顯高于乳腺良性腫瘤患者和健康對照組(P＜0.01)，術后ET-1降低，但仍高于乳腺良性腫瘤患者和健康對照組(P＜0.01)。乳腺癌改良根術組與乳腺癌保乳手術組比較ET-1水平無顯著差異(P＞0.05)。見表1。

2.2 乳腺癌患者血清ET-1水平與臨床病理特征的關系 本組乳腺癌組織組織學分級Ⅰ～Ⅲ級者ET-1值明顯升高(P＜0.05)，但與腫塊大小無明顯相關(P＞0.05)。見表2。

表1 各組患者外科治療前后血清ET-1水平(± s，pg/ml)

表1 各組患者外科治療前后血清ET-1水平(± s，pg/ml)

與健康對照組比較:1)P＜0.01;與術前比較:2)P＜0.01

組別 n 術前 術后健康對照10 42.11±7.02 －乳腺癌改良根治術組 5 76.08±8.251) 54.34±8.751)2)乳腺癌保乳手術組 35 75.32±7.121) 53.14±9.681)2)乳腺良性疾病對照組10 43.85±9.28 44.53±8.26

表2 癌組織ET-1值與腫瘤大小、病理組織學分級、臨床分期(± s，pg/ml)

表2 癌組織ET-1值與腫瘤大小、病理組織學分級、臨床分期(± s，pg/ml)

臨床病理 n ET-1 P值腫瘤大小 ≤2.0 cm 20 68.12±8.12 ﹥0.05 1.5～2.0 cm 10 70.20±8.54≤1.5 cm 10 59.25±8.26組織學分級 Ⅰ 15 68.22±7.89 ﹤0.05Ⅱ15 82.88±9.98Ⅲ10 84.21±8.32 TNM分期 Ⅰ～Ⅱ 21 82.82±9.27 ﹤0.05Ⅲ9 79.20±8.54淋巴結轉移 陽性 8 69.29±7.65 ﹤0.05陰性22 68.85±7.58

3 討論

在正常人血液中ET主要由血管內皮細胞產生，以非常低的生理濃度存在，發揮神經調節因子或局部激素樣作用，對組織器官具有重要的生物學作用。ET有三種類型ET-1、ET-2和ET-3，它們共同特點是具有＜1個α螺旋及2個二硫基橋接〔1〕。其中ET-1生理作用最為突出，在乳腺癌患者血液中ET-1表達增加〔2〕，Armstrong 等〔3〕對 60 例乳腺癌患者的血漿ET-1水平進行研究表明腫瘤組織含有大量ET-1〔5〕。在前列腺癌中，其特異性ETA R拮抗劑BQ-123對前列腺癌PC3細胞株增殖的抑制效應具有時間依賴性，可誘導腫瘤細胞自然凋亡〔4〕。Mabjeesh 等〔4〕研究發現，HIF-1 抑制劑 2-甲氧雌二醇(2-Methoxyestradil，2ME2)與BQ-123聯合作用于前列腺癌細胞時顯著增強2ME2誘導的細胞毒性反應。實踐證明，多西他賽和阿曲生坦聯合化療治療前列腺癌效果較好〔5〕。ET及其受體的相互作用可通過激活多種信號途徑和使某些標志性分子水平上調或下調來促進腫瘤的發生發展〔6〕，如上調血管內皮生長因子C(VEGF-C)表達，促使癌細胞淋巴管生成〔7〕，為腫瘤的侵襲轉移提供重要的理論基礎。分子靶向治療將成為治療乳癌侵襲、轉移新的研究方向。

本研究結果與Armstrong等〔5〕研究結果一致。經手術治療后其ET-1下降，但改良根治術組與保乳手術組比較ET-1下降無明顯差異，說明老年女性患者如乳腺癌腫塊≤2 cm，行保乳手術與改良根治術其血清ET-1表達程度無明顯差異。提示50歲以上老年乳腺癌患者行保乳手術治療與改良根治術治療預后可能無明顯差異，有待進一步隨訪。ET-1能夠反映出乳腺癌惡性程度高低，其表達濃度與臨床分期呈正比。ET-1表達水平越低，腫瘤惡性度越低。采集靜脈血做ET-1含量測定方便、快捷，應用于保乳手術具有一定參考價值。乳腺癌患者血清ET-1術前升高，術后顯著降低，癌組織不同病理分級中有顯著性差異，提示其可作為乳腺癌的一種腫瘤標志物常規檢測。ET-1高表達可影響乳癌患者預后，因此術后均應行輔助治療定期檢測血清ET-1表達水平，將有助于乳腺癌患者術后放、化療等輔助治療療效觀察，指導治療和判斷預后。

1 Wilson JL，Burchell J，Grimshaw MJ.Endothelins induce CCR7 expression by breast tumor cells via endothelin receptor a and hypoxia-inducible factor-1〔J〕.Cancer Res，2006;66(24):11802-7.

2 Bagnato A，Rosano L.The endothelin axis in cancer〔J〕.Int J Biochem Cell Biol，2008;40(8):1443-51.

3 陸 曄，潘湘濤，楊育生.乳腺癌HPA、ET-1表達和腫瘤血管生成關系〔J〕.國際醫藥衛生導報，2009;15(10):11-3.

4 Mabjeesh NJ，Shefler A，Amir S，et al.Potentiation of 2-methoxyestradiolinduced cytotoxieity by blocking endothelin a receptor in prostate cancer cells〔J〕.Prostate，2008;68(6):679-89.

5 Armstrong AJ，Creel P，Turnbull J，et al.A phase Ⅰ-Ⅱ study of docetaxel and atrasentan in men with castration-resistant metastatic prostate cancer〔J〕.Clin Cancer Res，2008;14(19):6270-6.

6 汪 艷，尹春香，李慶昌.內皮素與惡性腫瘤侵襲轉移〔J〕.醫學信息(上旬刊)，2010;23(12):4679-80.

7 Spinella F，Garrafa E.Endothelin-1 stimulates lymphatic endothelial cells and lymphatic vessels to grow and inavde〔J〕.Cancer Res，2009;69(6):2669-76.