Sysmex CA1500全自動血凝儀纖維蛋白原兩種測定方法的應用比較

馮彩蓮，康志君，李詩韻，黃瑜璇（廣東省廣州市新海醫(yī)院 510300）

纖維蛋白原（fibrinogen，FIB）是人體凝血系統(tǒng)的重要成分之一，在體內經凝血酶作用轉變?yōu)槔w維蛋白發(fā)揮其凝血及止血功能［1］。目前實驗室使用的自動化血凝儀測FIB的方法有Von Clauss法和PT－der法。纖維蛋白原增高可見于糖尿病、急性心肌梗死、急性傳染病、結締組織病、急性腎炎、手術及感染等，降低見于先天性低或無纖維蛋白原血癥、遺傳性纖維蛋白原異常、彌散性血管內凝血（DIC）、原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎及肝硬化等［2］。也見于降纖藥治療（如抗栓酶、去纖酶）和溶血栓治療，是它們的監(jiān)測指標之一［3］。作者對Sysmex CA1500全自動血凝儀上FIB的兩種檢測方法（Von Clauss法和PT－der法）進行比較，報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 門診及住院患者167例。

1.2 儀器與試劑 日本東亞Sysmex CA1500全自動血凝儀，纖維蛋白原測定試劑（批號：537999）及標準物、質控品（Dade Ci－Troll批號：548175）。

1.3 方法

1.3.1 分析前方法 抽取靜脈血1.8mL，加入含109 mmol／L枸櫞酸鈉0.2mL的一次性抗凝硅化管中，3 000r／min離心15min，2h內檢測完成。排除溶血、黃疸、脂血、重度貧血、紅細胞明顯增多的情況。質控品用1mL蒸餾水復溶，輕輕顛倒混勻，室溫平衡30min后進行測定。

1.3.2 測定方法 分別用Von Clauss法和PT－der法測定，嚴格按照操作規(guī)程進行試驗。

2 結 果

用Von Clauss法和PT－der法對167例患者FIB測定結果比較，將標本同時用Von Clauss法和PT－der法測定，將測得的FIB含量按PT－der法結果分為3組，結果見表1。

表1 FIB不同濃度兩種方法測定結果比較（g／L）

結果顯示，PT－der法與Von Clauss法測定FIB含量進行比較，當FIB濃度在2.0～4.0g／L時，兩組結果差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。當FIB＞4.0g／L或＜2.0g／L時，兩組結果差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

3 討 論

FIB是血漿中含量最高的一種凝血蛋白，其分子為一個對稱性二聚體，含有3對多肽鏈（Aα、Bβ和γ）。目前血漿FIB的測定方法分為三大類：凝固法、物理化學法及免疫法。Von Clauss法為凝固法中最常用的一種，是臨床和實驗室標準化協(xié)會（CLSI）推薦的常規(guī)方法，屬于功能測定，能反映纖維蛋白原的凝血功能［4］。

Von Clauss法（凝血酶法）檢測FIB的工作原理是根據纖維蛋白原與凝血酶作用最終形成纖維的原理，以國際標準品為參比血漿制作標準曲線，用凝血酶來測定血漿凝固酶時間，所得凝固時間與血漿中纖維蛋白原濃度呈負相關，從而得到纖維蛋白原的含量［3］。PT－der法的工作原理是根據PT測定完成時，纖維蛋白原轉變?yōu)槔w維蛋白其形成的濃度與FIB的含量成正比而算出FIB含量，因此無需另加任何試劑，即可根據產生的濁度，用終點法或速率法算出FIB含量［5］。

根據本文的測定結果比較分析，當PT－der法測得FIB濃度在2.0～4.0g／L時，兩種方法結果差異無統(tǒng)計學意義。而當PT－der法測得FIB＞4.0g／L或＜2.0g／L時，兩種方法結果差異有統(tǒng)計學意義。所以，在日常工作中，在用Sysmex CA1500全自動血凝儀進行FIB測定時，可以先用PT－der法測定，得出Fib結果在濃度在2.0～4.0g／L時可直接報告結果，當PT－der法測得FIB＞4.0g／L或＜2.0g／L時，再進一步用Von Clauss法復查報告結果。兩種方法聯(lián)合使用，在保證檢測的速度和結果的準確性的前提下，可以最大限度地節(jié)約試劑成本，提高工作效率。另外，必須注意的是，PT－der法原理是以血漿凝固起點和終點濁度之差與FIB含量成正比，所以檢測易受標本的黃疸、溶血、乳糜等因素的影響，使結果偏高，故在工作中有遇到上述情況的標本時應直接使用Von Clauss法測定FIB，溶血標本盡量要求護士重新抽血，乳糜標本應盡量早晨空腹時重新抽取標本檢測。由于這些標本用Von Clauss法測定FIB也存在一定的干擾，故發(fā)報告時應注明標本狀態(tài)。

總之，Von Clauss法準確性高，特異性強，快速簡便，但試劑昂貴，而PT－der法不需另行獨立測定，可節(jié)省試劑成本。建議實驗室兩種方法結合，這樣既能保證結果的準確性，又保證檢測速度，提高工作效率，節(jié)約成本［6］。

［1］ 彭裕輝，方裕森.Von Clauss法與PT－der法測定纖維蛋白原在全自動血凝儀的應用比較［J］.中國醫(yī)藥導報，2011，12（8）：84－86.

［2］ 朱忠勇.凝血機制研究與臨床檢測的若干進展［J］.臨床檢驗信息導報，1996，3（1）：73.

［3］ 葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程［M］.3版.南京：東南大學出版社，2006：215－216.

［4］ National Committee－for clinical Laboratory Standards.H30－A procedure for the determination of fibrinogen in plasma；Approved Guideline［M］.Wanye，PA，USA：CLSI，1999：99.

［5］ 陳喻，鐘輝秀.CA1500全自動血凝儀測定纖維蛋白原兩種方法比較［J］.醫(yī)學信息，2011，24（8）：3801－3803.

［6］ 蘇奶助，溫燕芳.全自動血液凝固分析儀兩種纖維蛋白原測定方法的評價及其應用［J］.檢驗醫(yī)學與臨床，2009，6（24）：2104－2105.