藤黃酸衍生物的合成

劉 舉， 王 洋， 周云鵬， 李春艷， 陳 燁， 姜明俊， 張秋實， 徐利鋒

(1. 遼寧大學 藥學院，遼寧 沈陽 110036； 2. 沈陽神龍藥業有限公司,遼寧 沈陽 110141)

藤黃酸(1)由藤黃科植物藤黃中提取，具有較高的抗腫瘤活性和良好的細胞選擇性。我國藥理和臨床工作者最早發現藤黃具有抗癌作用,并經多次實驗重復證明其主要的有效成分為以1為代表的橋環氧雜蒽酮化合物, 其抗癌作用與一般的化療抗癌藥有所區別，能選擇性地殺死癌細胞，而對正常的造血系統和白細胞沒有影響[1]。目前研究表明1是一種多靶點的抗腫瘤藥物，能通過誘導細胞周期阻滯和細胞凋亡,抑制端粒酶和拓撲異構酶活性,抗腫瘤血管生成和腫瘤轉移,逆轉多藥耐藥等不同機制發揮抗腫瘤作用[2]。

1中的30-CO2H， 6-OH和9,10-C=C是進行結構修飾的主要活性官能團。本文以30-CO2H為結構修飾點，通過酯化和酰胺化反應合成了8個藤黃酸衍生物(2a～2d和3a～3d)，以期獲得具有抗癌活性的新化合物。

1的30-CO2H在EDCI/DMAP作用下分別與醇[ROH(Ⅰa～Ⅰd)]縮合得酯類衍生物(2a～2d)，在EDCI， DMAP和HOBt作用下分別與胺[NHR1R2(Ⅱa～Ⅱd)]縮合得酰胺類衍生物(3a～3d, Scheme 1)，其結構經1H NMR， IR和MS 確證。

Comp2a2b2c2dRMeCl--OOH-OOOHComp3a3b3c3dNR1R2-NHBun-N(Penn)2N-HOOBnN-HOONH

Scheme1

1 實驗部分

1．1 儀器與試劑

Bruker ARX-300 MHz型超導核磁共振儀(CDCl3為溶劑,TMS為內標)；Perkin Elmer Specture-one型紅外光譜儀(KBr壓片)；Finigan LCQ型電噴霧質譜儀。

1按文獻[3，4]方法提??；3-胺基環戊二酰亞胺三氟乙酸鹽按文獻[5，6]方法制備；硅膠,200目～300目，青島海洋化工廠；1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI)， 4-二甲基氨基吡啶(DMAP)， 1-羥基苯并三唑(HOBt)，工業品，上海達瑞精細化學品有限公司；水為去離子水； THF和DMF使用前經無水處理；其余所用試劑均為分析純。

1．2 合成

(1)2a～2d的合成

氮氣保護下，向反應瓶中依次加入12.00 g(3.2 mmol)， EDCI 1.23 g(6.4 mmol)， DMAP 0.78 g(6.4 mmol), THF 30 mL和ROH(Ⅰa～Ⅰd)3.5 mmol的THF溶液(5 mL)，攪拌下于室溫反應過夜。倒入水(100 mL)中，用乙酸乙酯(3×70 mL)萃取，合并有機相，用無水硫酸鎂干燥，濾液于40 ℃減壓濃縮得黃色粗品，經硅膠柱層析[梯度洗脫劑：A=V(正己烷) ∶V(乙酸乙酯)]純化得黃色固體2a～2d。

2a： A=4 ∶1，產率95%；1H NMRδ： 12.86(s, 1H), 7.54(d,J=6.9 Hz, 1H), 6.69(d,J=10.1 Hz, 1H), 5.94(t,J=7.3 Hz, 1H), 5.45(d,J=10.1 Hz, 1H), 5.05(m, 2H), 3.43(s, 3H), 3.32(m, 1H), 3.15(m, 1H), 2.99(m, 2H), 2.51(d,J=9.3 Hz, 1H), 2.31(m, 1H), 2.01(m, 2H), 1.73(br, 5H), 1.69(s, 3H), 1.68(s, 3H), 1.66(s, 3H), 1.65(s, 3H), 1.55(s, 3H), 1.46(s, 3H), 1.41(m, 1H), 1.28(s, 3H); IRν： 3 448, 2 971, 2 925, 1 737, 1 715, 1 632, 1 594, 1 436, 1 401, 1 382, 1 175, 1 135 cm-1； ESI-MSm/z: 643{[M+H]+}。

2b： A=4 ∶1，產率83.05%；1H NMRδ： 12.74(s, 1H), 7.50(d,J=6.9 Hz, 1H), 7.25～7.35(m, 4H), 6.64(d,J=9.9 Hz, 1H), 6.43(t,J=7.3 Hz, 1H), 5.44(d,J=10.2 Hz, 1H), 5.21(m, 2H), 5.15(s, 2H), 3.49(s, 1H), 3.27(m, 1H), 3.25(m, 1H), 2.69(m, 2H), 2.53(d,J=9.3 Hz, 1H), 2.31(m, 1H), 2.03(m, 2H), 1.72(s, 6H), 1.65(s, 6H), 1.56(s, 3H), 1.41(s, 3H), 1.39(s, 3H), 1.30(s, 3H), 1.29(m, 3H); IRν： 3 444, 2 976, 2 924, 1 722, 1 651, 1 630, 1 596, 1 438, 1 401, 1 384, 1 366, 1 328, 1 312, 1 297, 1 247, 1 263, 1 229, 1 174, 1 146, 1 091 cm-1； ESI-MSm/z: 753{[M+H]+}。

2c： A=1 ∶1，產率88.01%；1H NMRδ： 12.86(s, 1H), 7.55(d,J=6.9 Hz, 1H), 6.66(d,J=10.2 Hz , 1H), 6.04(br, 1H), 5.44(d,J=12.8 Hz, 1H), 5.04(t, 2H, 32-H), 3.72(m, 1H), 3.59(m, 1H), 3.57(m, 1H), 3.49(s, 8H), 2.99(m, 2H), 2.84(d,J=9.3 Hz, 1H), 2.05(s, 2H), 1.74～1.63(s, 14H), 1.55(s, 3H), 1.55(s, 3H), 1.44(s, 3H), 1.29(s, 3H), 1.25(s, 3H); IRν： 3 399, 2 963, 2 920, 1 731, 1 706, 1 644, 1 631, 1 594, 1 456, 1 439, 1 456, 1 439, 1 399, 1 378, 1 333, 1 350, 1 307, 1 292, 1 226, 1 178, 1 134, 1 089 cm-1； ESI-MSm/z: 717{[M+H]+}。

2d： A=1 ∶1，產率84.13%；1H NMRδ： 12.78(s, 1H), 7.54(d,J=6.6 Hz, 1H), 6.66(d,J=9.9 Hz, 1H), 6.32(m, 1H), 5.46(d,J=9.9 Hz, 1H), 5.15～5.05(t, 2H), 4.25(m, 2H), 3.72(m, 1H), 3.59～3.49(m, 12H), 3.29(m, 2H), 2.99(m, 2H), 2.54(m, 1H), 2.51(d,J=9.3 Hz, 1H), 2.06(m, 2H), 1.74～1.63(m, 9H), 1.56(s, 3H), 1.55(s, 3H), 1.44(s, 3H), 1.29(s, 3H), 1.26(s, 3H); IRν： 3 399, 2 964, 2 927, 1 719, 1 645, 1 431, 1 595, 1 434, 1 403, 1 385, 1 331, 1 296, 1 264, 1 174, 1 142, 1 088 cm-1； ESI-MSm/z: 747{[M+H]+}。

(2)3a～3d的合成

氮氣保護下，向反應瓶中依次加入13.60 g(5.8 mmol), EDCI 2.21 g(11.6 mmol), DMAP 1.41 g(11.6 mmol)， HOBt 0.78 g(5.8 mmol)和DMF 5 mL，攪拌下于室溫反應30 min。加入用DMF(2 mL)稀釋的胺類化合物NHR2R311.6 mmol，攪拌下于室溫反應至終點(TLC監測)。反應液倒入150 mL水中，用乙酸乙酯(3×100 mL)萃取，合并有機相，用無水硫酸鎂干燥，濾液于40 ℃減壓濃縮得到黃色粗品，經硅膠柱層析[梯度洗脫劑：A]純化得黃色固體3a～3d。

3a： A=3 ∶1，收率81%；1H NMRδ： 12.86(s, 1H), 7.56(d,J=6.9 Hz, 1H), 6.68(d,J=10.2Hz, 1H), 6.55(br, 1H), 5.47(m, 1H, 5.25(m, 1H), 5.09～5.07(br, 2H), 3.49(m, 1H), 3.29(m, 2H), 3.18(m, 2H), 2.58(m, 2H), 2.35(m, 2H), 2.04(m, 2H), 1.90～1.25(m, 31H), 0.92(t,J=7.2 Hz, 3H); IRν： 3 353, 2 968, 2 926, 1 738, 1 633, 1 593, 1 534, 1 436, 1 383, 1 332, 1 174, 1 136 cm-1； ESI-MSm/z: 684{[M+H]+}。

3b： A=4 ∶1，收率79%；1H NMRδ： 12.89(s, 1H), 7.52(d,J=6.9 Hz, 1H), 6.68(d,J=10.2 Hz, 1H), 5.44(m, 2H), 5.07(br, 2H), 3.42(m, 1H), 3.28～2.80(br, 6H), 2.60～2.00(br, 5H), 1.74～1.58(m, 20H), 1.56～1.12(m, 20H), 0.98(m, 6H); IRν： 3 448, 2 961, 2 928, 2 859, 1 739, 1 632, 1 457, 1 436, 1 402, 1 382, 1 331, 1 174, 1 137, 1 048 cm-1； ESI-MSm/z: 768{[M+H]+}。

3c： A=3 ∶1，收率66.2%；1H NMRδ： 12.90(s, 1H), 7.55(d,J=6.8 Hz, 1H), 7.32(br, 5H), 6.67(d,J=10.1 Hz, 1H), 5.45(m, 2H), 5.16(m, 2H), 5.06(s, 2H), 4.52(m, 1H), 3.30(m, 1H), 3.20(m, 1H), 2.79(m, 1H), 2.54(d,J=9.3 Hz, 1H), 2.42(m, 1H), 2.30(m, 1H), 2.04(m, 2H), 1.79(s, 3H), 1.73(br, 5H), 1.69(s, 3H), 1.66(s, 3H), 1.64(s, 3H), 1.56(s, 3H), 1.44(br, 4H), 1.28(s, 3H), 1.25(s, 6H); IRν： 3 326, 2 972, 2 925, 1 739, 1 630, 1 592, 1 532, 1 498, 1 454, 1 383, 1 297, 1 175, 1 154 cm-1； ESI-MSm/z: 791{[M+H]+}。

3d： A=2 ∶1，收率86.05%；1H NMRδ： 12.86(s, 1H), 8.79(br, 2H), 8.02(s, 1H), 7.69(d,J=6.9 Hz, 1H, 10-H), 6.72(d,J=10.1 Hz, 1H, 4-H), 5.94(m, 1H, 27-H), 5.45(m, 1H, 3-H), 5.05(m, 2H, 32-H, 37-H), 4.23(m, 1H), 3.38(m, 2H), 2.99(m, 2H), 2.72(m, 2H), 2.54(m, 1H), 2.31(m, 1H), 2.18(m, 2H), 2.01(m, 2H), 1.83～1.22(m, 27H); IRν： 3 326， 2 972， 2 925， 1 739, 1 630, 1 592， 1 532, 1 498, 1 454, 1 383, 1 297, 1 175, 1 154 cm-1； ESI-MSm/z: 740{[M+H]+}。

[1] 陳葆仁. 藤黃抗癌成分的研究[J].江西醫學院學報,1980,(2):1271.

[2] 張百紅,王湘輝. 藤黃酸抑制腫瘤的實驗研究進展[J].臨床腫瘤學雜志,2010,15(6):564-566.

[3] 劉舉,王洋,周云鵬,等. 藤黃酸的提取工藝改進[J].遼寧大學學報(自然科學版),2011,38(2):97-99.

[4] 王洋,徐利鋒,劉舉,等. 一種藤黃酸的提取工藝[P].CN 201 010 230 989，遼寧大學，2010.

[5] Muller G W, Konnecke W E, Mith A M,etal. A concise two-step synthesis of thalidomide[J].Organic Process Research Development，1999,3:139-140.

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