BC369對人源胰腺癌的治療作用

張炳團 張洪濤 張靜宇 王 錚

胰腺癌是1種較為常見的惡性腫瘤，近年來發病率有逐年上升的趨勢。胰腺癌由于位置深且隱蔽，早期缺少特異性癥狀，極易侵犯周圍臟器和發生轉移，故大多數患者就診已屬晚期，手術切除不足20%[1]；化學治療暫時緩解率為20%～48%[2]。BC369具有抑制腫瘤細胞生長、殺傷腫瘤細胞和提高機體免疫力的雙重作用，我們采用無免疫功能的裸鼠研究BC369對人源胰腺癌(PANC-1)的直接殺瘤實驗，現將觀察結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥物 BC369試劑由天津澤世德生物醫藥有限公司生產，1 mg/瓶，凍干粉劑，-20℃保存，注射時用1 ml無菌生理鹽水溶解。吉西他濱注射液，200 mg/瓶，由美國禮來公司生產。

1.1.2 瘤株 人源胰腺癌(PANC-1),由中國醫學科學院腫瘤研究所提供。

1.1.3 動物 Baib/c-nu裸鼠，由中國醫學科學院實驗動物研究所購進，二級實驗動物，合格證為SCXK京2009-0004；實驗動物使用許可證號SYXK(京)2008-0016；Baib/c-nu裸鼠雄性，體重(17±2)g。

1.2 方法

1.2.1 腫瘤移植 胰腺癌(pancreatic cancer,PANC-1)瘤株氮復蘇后，經3～4次傳代，實體腫瘤生長良好，接種3周后形成1 cm大小實體腫瘤，斷頸處死小鼠，70%酒精浸泡1 min,無菌條件下剝離腫瘤，剪切成1 mm3大小組織塊，選擇新鮮無壞死的腫瘤組織，接種于健康裸鼠皮下。

1.2.2 給藥方法 30只裸鼠隨機分為3組，陰性對照組(NS)10只，陽性對照組(吉西他濱)10只，創新藥組(BC369)10只。給藥途徑均為瘤種接種21天后，人源胰腺癌(PANC-1)實體瘤生長達100 mm3時開始瘤內或瘤床多點注射,每天1次，療程21天。NS組：10 ml/kg,即每只小鼠瘤內注射NS 0.2 ml/次。吉西他濱組：10 mg/Kg,即每只小鼠瘤內注射吉西他濱0.2 ml(0.2 mg)/次。BC369組：10 mg/Kg，即每只小鼠瘤內注射BC3690.2 ml(0.2 mg)/次。

1.2.3 檢測指標 終止治療后次日，各組動物斷頸處死，剝離腫瘤體稱重。按以下公式計算腫瘤殺傷率[3]。腫瘤殺傷率%=(C-T)÷C×100%，式中T為給藥組平均瘤重，C為陰性對照組平均瘤重。

1.3 療效判定指標

根據腫瘤大小變化的判定標準[4]，腫瘤的大小以2個最大互相垂直的直徑的乘積表示。該實驗用藥前3組小鼠腫瘤體積均為100 mm3，用藥21天后用卡尺測量各小鼠腫瘤2個最大互相垂直直徑，計算治療后腫瘤體積。腫瘤完全消失(CR)，腫瘤縮小50%以上(PR)，腫瘤縮小50%以下或增大在25%以內(NC)，腫瘤增大25%以上(PD)。

1.4 統計學方法

采用SPSS13.0軟件進行數據分析，計數資料采用χ2檢驗[5]。

2 結果

統計學處理結果證明治療后BC369組和吉西他濱組平均瘤重分別與NS組比較，差異均有統計學意義，P<0.001。吉西他濱組治療后與BC369組治療后瘤重比較相差不顯著，P>0.05。BC369對裸鼠人源胰腺癌(PANC-1)具有一定的殺傷作用，直接療效吉西他濱組為30.0%，BC369組為40.0%,2組比較差異明顯,見表1,2。

表1 BC369對人源胰腺癌(PANC-1)生長的影響

表2 BC369對人源胰腺癌(PANC-1)的直接療效(只)

3 討論

原發性人胰腺癌移植于裸鼠體內的治療實驗更接近于人體

內胰腺癌治療實驗的結果。

實驗數據表明，BC369對人源胰腺癌(PANC-1)的生長具有較強的殺傷作用，其結果與美國生產的治療胰腺癌新化學藥吉西他濱對荷瘤小鼠抗腫瘤實驗結果基本相近，無明顯差異(P>0.05)。

BC369對人源胰腺癌(PANC-1)的直接療效(40%)略高于吉西他濱(30%)。本次對人胰腺癌移植于裸鼠體內治療的初步實驗，更接近于人體內胰腺癌的治療實驗，但不是臨床試驗，其最終結果有待于進一步研究。

BC369具有雙重作用，殺傷和免疫，此實驗對無免疫力的裸鼠移植性人源胰腺癌抑瘤實驗，它只起殺癌效應，而提高機體免疫的功效尚未發揮。

對裸鼠移植性人胰腺癌(PANC-1)經過BC369瘤內局部注射后腫瘤完全消退部位的組織做切片，顯微鏡下觀察發現BC369治療后組織只有輕度炎癥，表現出肉芽組織及多核粒細胞浸潤，未見癌細胞；對生理鹽水(NS)陰性對照組腫瘤組織做切片，顯微鏡下觀察組織上仍有高度分化的癌細胞。

[1] Alfieris,Morganti A G,Di Giorgio A,et al.Improved survival and Iocal after intaoperative radiation therapy and postoperative radiotherapy:a multivariate analysis of 46 patients undergoing surgery for pancreatic head cancer〔J〕.Arch Surg,2001,136(3):343.

[2] 李振主編.惡性腫瘤的化學治療與免疫治療〔M〕.第1版.北京：人民衛生出版社,1990:4.

[3] 張炳團,張靜宇，張洪燕.BC369對鼠源腸癌(C26)的療效分析〔J〕.實用癌癥雜志，2012，27(3)：224.

[4] 孫 燕，石遠凱.臨床腫瘤內科手冊〔M〕.第5版.北京:人民衛生出版社,2007:147～1481.

[5] 涂 亮,邱寶安.復方苦參注射液聯合體部伽瑪刀治療晚期胰腺癌的臨床觀察〔J〕.實用癌癥雜志,2012,27(3):298.