補料工藝對三孢布拉霉菌合成β-胡蘿卜素的影響

宋相波

(浙江醫藥股份有限公司新昌制藥廠 浙江紹興 312500)

β－胡蘿卜素,被FAO和WHO食品添加劑協會一致推薦并認定為A類營養色素,是一種有效的生物抗氧化劑,近年來,它的應用領域從食品著色轉向營養食品、保健品、藥品及飼料四大領域,市場需求不斷增加。

β－胡蘿卜素的生產方法有化學合成,植物提取和微生物發酵三種。微生物發酵法生產天然β－胡蘿卜素因不受環境條件限制而受到重視,是現在國際上工業化生產β－胡蘿卜素的主要研究方向。目前已發現能合成β－胡蘿卜素的微生物主要有瑞士乳桿菌、球形紅桿菌、短桿菌、分枝桿菌、粘紅酵母、布拉克須霉、三孢布拉霉等。尤其三孢布拉霉(Blakeslea trispora)與其他菌種相比具有生物量大,單位菌體量β－胡蘿卜素產量高等優點,是工業化生產天然β－胡蘿卜素的理想微生物[1]。為進一步提高此菌株的合成能力,本文通過在不同時期添加β－胡蘿卜素結構類似物三孢酸、β-紫羅蘭酮、巴比妥酸,考察其對合成β－胡蘿卜素是否有促進作用[2]。

1 材料與方法

1.1 出發菌株

三孢布拉霉菌“＋”“－”菌株,筆者實驗室保藏。

1.2 培養基

斜面培養基:PDA培養基[3](新鮮去皮馬鈴薯200g,蔗糖20g,瓊脂20g加水至1000ml,PH自然)。

母瓶培養基:玉米漿6%,葡萄糖2%,玉米粉1%,KH2PO40.005%,VB10.0002%,豆油1%。PH調至6.5

發酵瓶培養基:玉米淀粉2%,黃豆粉2%,玉米漿3%,豆油4%,KH2PO40.005%,VB10.0002%,Mg2SO40.025%。PH調至7.0。

1.3 培養條件

將保藏菌株三孢布拉霉菌“＋“－”菌株分別涂布于PDA斜面,28℃培養3—5天,“＋”“－”菌孢子分別用無菌水洗下。接入裝量為160ml的750ml三角瓶中,在溫度為28.0℃,搖床轉速為230r/min條件下培養48小時?！埃薄埃本砸欢恳欢ū壤尤胙b量為30ml的250ml三角瓶中,在溫度為28.0℃,搖床轉速為230r/min條件下培養6天。……