摘要:采用帶毒培養基-菌絲生長速率法,以多菌靈為對照藥劑,進行20%寡聚酸碘對稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)菌絲生長抑制效果測定。結果表明,該藥劑對稻瘟病菌的生長具有明顯的抑制作用,且表現出明顯的量效關系。20%寡聚酸碘167倍稀釋液和5.0 μg/mL多菌靈對稻瘟病菌菌絲生長的抑制效果最好,相對菌絲生長抑制率達100.00%。隨著稀釋倍數的增加,20%寡聚酸碘對稻瘟病菌的抑制效果降低,在167~1 000稀釋倍數范圍內,20%寡聚酸碘對稻瘟病菌菌絲生長的抑制率高于2.5 μg/mL多菌靈,且在0.05水平有顯著差異。
關鍵詞:稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae);20%寡聚酸碘;抑菌效果
中圖分類號:S435.111 文獻標識碼:A 文章編號:0439-8114(2013)24-6037-03
水稻稻瘟病是水稻重要的真菌性病害,由半知菌亞門(Deuteromycotina)的稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起,廣泛分布于世界各稻區。稻瘟病可以危害水稻的苗、葉、莖節、穗頸和谷粒,一般以葉瘟、節瘟和穗頸瘟危害較大。在水稻產區,如遇適宜的環境條件,局部發生的稻瘟病可以迅速地蔓延擴散,在短時間內造成水稻大面積受害,輕者減產,嚴重者造成絕收,該病已成為中國水稻高產穩產的重要制約因素之一[1,2]。
氨基寡糖素是一種良好的生物源農藥,能夠誘導植物產生抗病性,對煙草病毒病、棉花枯萎病、西瓜枯萎病、番茄病毒病和小麥常見病害等多種植物病害具有良好的防治效果[3-8],但防治的速效性較差,難以應對突發性病害。20%寡聚酸碘[9]是農業部規劃設計研究院利用寡糖衍生物絡合碘研制的新一代非特異性寡糖衍生物農藥,具有快速殺滅植物病原物和誘導植物抗病的作用,同時具有對人畜安全、無污染、無公害、長期使用病菌不產生抗性等優點[10]。為指導農業生產,有效防治水稻稻瘟病,試驗通過測定20%寡聚酸碘對稻瘟病菌菌絲生長抑制情況,明確20%寡聚酸碘對稻瘟病菌的抑菌效果,為該藥劑用于稻瘟病田間防治提供參考。
1 材料與方法
1.1 供試病原菌
稻瘟病菌P131生理小種,由中國農業大學農學院植物病理學系提供。
1.2 供試藥劑
20%寡聚酸碘,由農業部規劃設計研究院提供,多菌靈(純度99%)為美國Aldrich公司生產。
1.3 試驗方法
采用帶毒培養基-菌絲生長速率法[11,12]進行20%寡聚酸碘對稻瘟病菌菌絲生長抑制效果測定。
1.3.1 基本培養基的制備 用于藥物抗菌活性測定的培養基為番茄燕麥(OTA)培養基。具體配方為燕麥30 g,番茄汁150 mL,瓊脂20 g,加水定容至1 000 mL。
1.3.2 含藥培養基的制備 分別量取一定量的20%寡聚酸碘母液,加水稀釋成不同濃度的供試藥液,加入到未凝固的OTA培養基中,搖勻后迅速倒入直徑為9 cm的培養皿中,配制成終濃度為20%寡聚酸碘167、200、250、333、500、1 000、1 500、2 000、3 000倍稀釋的9個濃度梯度的含藥培養基,待其凝固后備用。陽性對照為多菌靈,先用20% 乙醇溶解,再制成終濃度為2.5、5.0 μg/mL的含藥OTA培養基,同時制作含相同濃度乙醇的OTA培養基(乙醇),設置無藥OTA培養基為空白對照(CK)。5個重復。
1.3.3 接種與培養 將稻瘟病菌活化,選擇生長良好的菌落,在無菌條件下用直徑為5 mm的滅菌打孔器在菌落外緣打孔,制備均勻一致的菌餅。用消毒接種器將菌餅接種于不同處理的培養基中央,有菌絲的一面向下與培養基貼合,置于25 ℃暗培養12 d后進行結果調查。
1.4 結果調查
采用十字交叉法垂直測量各處理的菌落直徑,取其平均值作為各處理菌落的直徑。根據測量結果,計算各處理對稻瘟病菌的菌絲絲生長相對抑制率(抑制率),試驗數據使用SPSS 11.5軟件輔助進行差異顯著性等分析。
2 結果與分析
乙醇對稻瘟菌的抑制效果與空白對照相當(表1),說明使用20%乙醇溶解多菌靈不會使多菌靈對稻瘟菌的抑制效果受到影響。由試驗結果(表1、圖1、圖2)可以看出,20%寡聚酸碘167倍稀釋液和5.0 μg/mL多菌靈對稻瘟病菌菌絲生長的抑制效果最好,培養基上均無菌絲生長,抑制率達100.00%。隨著稀釋倍數的增加,20%寡聚酸碘對稻瘟病菌的抑制效果降低;在250~1 500稀釋倍數范圍內,20%寡聚酸碘對稻瘟病菌的抑制效果隨濃度變化而變化趨勢較明顯;在1 500~3 000稀釋倍數范圍內,20%寡聚酸碘對稻瘟病菌的抑制效果隨濃度變化不明顯。20%寡聚酸碘167、200、250、333、500、1 000倍稀釋對稻瘟病菌的相對抑制率分別為100.00%、90.56%、84.75%、63.61%、38.83%和24.27%,均顯著高于對照藥2.5 μg/mL多菌靈(P<0.05)。試驗結果表明,在一定濃度范圍內,20%寡聚酸碘稀釋液能很好地抑制稻瘟病菌菌絲生長,具有開發為防治稻瘟病藥劑的潛力。
3 小結與討論
在OTA培養基上的菌絲生長抑制試驗結果表明,20%寡聚酸碘對稻瘟病菌的生長具有明顯的抑制作用,且表現出明顯的量效關系。試驗證實該藥劑對稻瘟病菌有一定的直接抑制作用,在一定程度上克服了氨基寡糖素不能迅速殺滅病原物的缺點。由于該試驗是在室內離體條件下進行的,對于20%寡聚酸碘中另一主要成分寡糖衍生物促進植株產生誘導抗病作用、該藥劑誘導抗病性和碘對病原菌快速殺滅作用以及對水稻稻瘟病所表現的綜合防治效果,還需通過田間試驗來進一步研究。
致謝:感謝中國農業大學農學院植物病理學系周立剛副教授及其碩士研究生徐梁和雒瑞雅在本試驗中給予的指導和幫助。
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