柱前衍生高效液相色譜法測定太子參中精氨酸的含量

【摘要】目的：建立太子參藥材中精氨酸的含量測定方法。方法：樣品用0.1mol/L鹽酸一乙醇（9：1）混合溶液提取，采用鄰苯二甲醛（0PA）與一氯甲酸芴甲酯（FMOC）聯用全自動柱前衍生化，Hypersil ODS柱，波長為338nm，檢測太子參藥材中精氨酸的含量。結果：精氨酸在0.2～4Ng范圍內呈良好的線性關系，平均回收率為101.2%。結論：本方法靈敏、準確，快速，具有良好的重復性和穩定性，可用于太子參中精氨酸的含量測定。不同產地來源、不同批次太子參中的精氨酸含量存在一定差異。

【關鍵詞】太子參；氨基酸；柱前衍生；HPLC

【中圖分類號】R927 【文獻標志碼】A 【文章編號】1007-8517（2013）19-0007-03

太子參為《中國藥典》收載的常用補益中藥，別名孩兒參、童參、四葉參、米參等，系石竹科植物孩兒參[Pseudostellaria heterophylla（Miq.）Pax]的干燥塊根，具有益氣健脾、生津潤肺等功效。臨床用于脾虛體倦、食欲不振、病后虛弱、氣陰不足、自汗口渴、肺燥干咳等癥狀。研究表明，太子參中含有環肽、氨基酸、多糖等化學成分。其中，氨基酸是太子參滋補功能的重要藥用成分，與太子參的補益功效有著非常密切的關系。因此，太子參中氨基酸成分應作為質量標準控制的一個重要指標，但在中國藥典尚未制定氨基酸含量測定的相關標準。

氨基酸分析常用的方法主要有衍生化離子交換色譜法和衍生化高效液相色譜法，前者需要使用氨基酸分析儀，后者使用一般分析實驗室常規配備的高效液相色譜儀和C18色譜柱即可完成，且分析時間短，靈敏度高，已逐漸取代氨基酸分析儀在許多領域中的應用。常用的柱前衍生化HPLC測定氨基酸的方法有AQC（6-氨基喹啉-N-羥基琥珀酰亞胺基氨基甲酸酯）法、DNFB（2，4-二硝基氟苯）法、DABS（磺酰氯二甲胺偶氮苯）法、PITC（異硫氰酸苯酯）法和OPA-FMOC（鄰苯二甲醛和9-芴甲基氯甲酸酯）法等。前4種方法需手工衍生，反應活性差、速度慢且易受試劑干擾。OPA-FMOC法可克服上述缺點，應用廣泛

本文采用鄰苯二甲醛（OPA）與—氯甲酸芴甲酯（FMOC）聯用全自動柱前衍生化高效液相色譜法建立了太子參中精氨酸的含量測定方法。分離效果好，譜圖重現性好，分析和檢測結果令人滿意，可推廣應用于中藥材中氨基酸類成分含量測定。

1 儀器與試藥

Agilent 1100系列高效液相色譜儀；DAD檢測器；精氨酸對照品（批號：024-201004，由中國食品藥品檢定研究院提供），一氯甲酸芴甲酯（FMOC） （批號：FA120119，購自LANCASTER公司）；乙腈、甲醇、四氫呋喃為色譜純，其他試劑均為分析純。太子參藥材來自福建、湖南、安徽，經上海市食品藥品檢驗所季申主任藥師鑒定。

2 方法與結果