根際促生菌篩選及其接種劑對箭筈豌豆生長影響的研究

馬文彬，姚拓，王國基，張玉霞，榮良燕

（甘肅農業大學草業學院 草業生態系統教育部重點實驗室，甘肅 蘭州730070）

土壤微生物是土壤有機復合體的重要生物組成部分，在有機物質分解、物質循環和生態安全調控等方面發揮著重要作用，適宜群居在具有一定界限的微域環境里，如根際微域。植物根際的微生物多而活躍，由于受根系生長及其分泌物的影響，根際微生態區域土壤微生物的數量和種群結構顯著不同于非根際土壤，構成了根際特有的微生物區系。植物根際促生菌（PGPR）是一類定殖于植物根際，可通過固定空氣中的氮氣（即生物固氮）或溶解土壤中不能被植物直接吸收利用的磷素（即生物溶磷）或產生植物生長激素刺激植物生長以增強其吸收礦物營養和水分的能力，從而促進植物生長［1－3］的有益菌。自1978年Burr和Schroth在馬鈴薯（Solanumtuberosum）上率先報道PGPR以來，大量的研究事實證實PGPR廣泛存在于多種植物，近年來，國內外學者已從一些植物根際分離篩選出大量高效優良的根際促生菌株［4－5］，利用優良促生菌株研制的“環境友好型”接種劑還可改良土質，增進土壤肥力，維持土壤健康，是發展生態農業的理想肥料。

箭筈豌豆（Viciasativa）是糧、草、飼、肥兼用作物之一，在我國草地農業系統中起著舉足輕重的作用，與燕麥（Avenasativa）混播，調制青干草，用于冬春補飼，是解決牧區家畜營養不足的有效措施［6－8］；其根茬還田可培肥地力、增加后作產量，還能改善土壤理化性狀、提高土壤有機質含量及促進農田養分循環［9］，同時是優良的水土保持和固沙植物，具有飼用和生態雙重價值。

根系是植物吸收水分和養分的重要組織器官，其形態發育影響作物的生長及對營養的吸收，其中根系長度和根表面積對主要借擴散抵達根表面的那些養分有效性具有決定性作用，因此研究根的形態學特征（總根長、根系表面積、根系平均直徑及根系體積等）有著重要意義。近年來，關于氮、磷等植物必需營養元素及干旱脅迫對根系形態影響的研究越來越多［10－13］，而生物因素尤其是微生物對根系形態的影響鮮有報道。為此，本研究以箭筈豌豆為研究對象，從箭筈豌豆及玉米（Zeamays）根際分離篩選優良促生菌，并研制微生物接種劑，結合半固體培養液試驗研究接種劑對箭筈豌豆生長及根系形態的影響，為箭筈豌豆的優質、高產生產及推廣提供理論依據和技術支撐。

1 材料與方法

1．1 供試材料

箭筈豌豆根系及根際土壤，2013年9月采自甘肅農業大學牧草試驗站；玉米根系及根際土壤，2013年8月采自甘肅省武威黃羊鎮牧草試驗站。箭筈豌豆種子，品種為春箭筈豌豆，由甘肅農業大學草業學院種子室提供。接種劑對箭筈豌豆生長影響測定于2014年1月下旬至3月上旬進行。

1．2 培養基

LB（溶菌肉湯培養基）［14］：用于活化及保存菌種；NFM（無氮培養基）［14］：用于聯合固氮菌分離及固氮酶活性測定；PKO（Pikovaskaia’s）［14］：用于溶磷菌分離及溶磷量測定；YMA（甘露醇硝酸鹽瓊脂培養基）［14］：用于根瘤菌分離及培養；CCM（聯合碳源培養基）［14］：用于分泌生長素測定；Hoagland（霍格蘭）半固體培養基［15］：提供箭筈豌豆幼苗營養。

1．3 優良促生菌株分離篩選

1．3．1 菌株分離 按常規分離細菌法分別涂布樣品懸液于PKO及NFM固體培養基平板上，28℃倒置于恒溫培養箱中培養，挑取在PKO平板上出現透明圈的分離物進行純化并保存；在NFM平板上挑取長勢較好的分離物進行純化保存。

將所采集新鮮的箭筈豌豆根瘤用無菌水洗凈，0．1%升汞消毒3min，挑取中間部位，在YMA培養基平板上點接或劃線，分離得到的菌株進一步純化保存于冰箱中備用。

1．3．2 菌株溶磷性能測試 將菌株點接種至PKO固體培養基上，28℃條件下培養7d，觀察菌落周圍有無溶磷圈出現，并測定菌落直徑與溶磷圈直徑，定性判斷菌株溶磷能力；制備上述菌株懸浮液（濃度約108cfu／mL），接種0．5mL菌懸液于盛有經滅菌的50mL PKO液體培養基的三角瓶中，每菌株3次重復，置于軌道搖床上（28℃，160r／min）培養10d，在4℃下離心（10000r／min）15min，取上清液用鉬藍比色法測定有效磷（P）的含量。

1．3．3 菌株固氮酶活性測定 利用NFM培養基，將供試菌株分別接種于盛有5mL半固體NFM培養基的血清瓶中（每菌株5次重復），結合氣相色譜儀（Trace GC2000，Italy），利用乙炔還原法（acetylene reduction assay，ARA）測定菌株固氮酶活性［16］，按下式計算固氮酶活性。

式中，hx：樣品峰值；hs：標準C2H4峰值；C：標準C2H4濃度（nmol／mL）；V：培養容器體積（mL）；t：樣品培養時間（h）；N：產生的C2H4濃度（nmol／mL·h）。

1．3．4 菌株分泌IAA能力研究 取上述在CCM液體培養基上生長12d的菌株懸浮液40mL，盛于50mL離心管中（每菌株3次重復），在4℃，10000r／min下離心10min，棄去沉淀物，將上清液在冷凍干燥儀中干燥至10～15mL，并用HCl將PH值調至2．8。用乙酸乙酯提取生長素（IAA）（菌株懸浮液∶乙酸乙酯＝1∶3）。將提取液盛在燒杯中，置于通風櫥中低溫蒸發至干燥，再用2mL 100%乙醇溶解后盛在離心管中。同時配置50 μg／mL的IAA標準液。利用液相色譜法（HPLC）測定菌株IAA含量［17］。

色譜條件，色譜柱：ZORBAX SB－C18柱（4．6mm×150mm，5μm）；流動相：甲醇∶0．6%冰乙酸（45∶55）；柱溫：25℃；流速1mL／min；檢測波長：254nm；進樣量：20μL。

1．3．5 菌株拮抗測定 菌株間的拮抗反應測試采用牛津杯法［18］，將一種菌在液體培養基中培養24h的菌懸液，以2%（V／V）的量接種到發酵培養基中，28℃、180r／min振蕩培養48h；發酵液8000r／min離心10min，上清過0．22μm濾膜，取濾液100μL滴加在含有2%另一種細菌的LB平板中央的牛津杯中（直徑7mm），待發酵濾液擴散后置28℃條件下恒溫培養。以無菌水作陰性對照。將供試4株細菌兩兩進行抑菌實驗，每個處理3次重復，1d后觀察抑菌圈的有無，若有抑菌圈，說明兩細菌間有拮抗作用，若無抑菌圈，且細菌生長良好，則說明這兩個細菌可以共存，各菌株間沒有拮抗作用，不發生拮抗反應的菌株可以混合培養，否則只能單獨施用。

1．4 對箭筈豌豆生長影響測定

1．4．1 菌懸液制備 將LB斜面培養基上生長72h的上述菌分別接種于100mL LB液體培養基中，置于28℃，125r／min的搖床培養3～5d，測定A660值，使A660值均大于0．5，無菌水調節A660值一致（使菌數量處于同一水平），制成菌懸液，并按表1設置處理（注：菌株種類及其組合、體積比等正在申報專利）。

表1 試驗處理Table 1 Design of experiment

1．4．2 種植 選取籽粒飽滿、大小均一的春箭筈豌豆種子，將種子先用75%的酒精滅菌處理15s，然后用無菌水沖洗4～5次，再經0．1%HgCl2滅菌處理1min后，用無菌水沖洗干凈，將種子置于滅菌后的水瓊脂培養基平板中，置于培養箱（25℃，16h光照，20000lx；20℃，8h黑暗）中培養，待種子芽長1～2cm，將箭筈豌豆幼苗移至裝有40mL無菌Hoagland水瓊脂半固體培養基的長玻璃試管（4cm×45cm）中，每個試管1株幼苗，置于培養箱中培養，2d后觀察，去除移栽后死亡的幼苗。

1．4．3 接種 將1．4．1中各菌懸液1mL在無菌條件下接入1．4．2所培養的幼苗根際，接種后將試管繼續置于培養箱中培養。設1組對照，每個處理5次重復。

1．4．4 測定項目與方法 經處理的幼苗培養40d后收獲，用無菌水洗凈根表培養基，測量株高及根長；剪去地上部分，利用根系掃描儀（LA2400Scanner，Epson Expression 1000XL）測定根表面積、根體積及根平均直徑；用濾紙吸干植株及根系表面水分，分別稱量其地上部分和地下部分鮮重；根系活力的測定采用TTC（氯化三苯基四氮唑）法進行根系還原力的測定。

1．5 數據處理

利用Excel 2007整理數據，SPSS 17．0進行方差分析，采用Duncan法進行多重比較。

2 結果與分析

2．1 優良促生菌株促生特性

通過測定菌株的溶磷、固氮及分泌生長素能力，篩選出了4株優良菌株，包括2株溶磷菌，1株聯合固氮菌，1株根瘤菌（表2）。其中，菌株J3－1和J1－15為溶磷菌，兼具分泌生長素特性，Y16為聯合固氮菌，兼具溶磷及分泌生長素性能，J3為根瘤菌。4株菌株生長速度均較快，經測定均無拮抗作用。

2．2 接種劑對箭筈豌豆株高和生物量影響

2．2．1 接種劑對箭筈豌豆株高影響 通過測定接種劑對箭筈豌豆株高的影響，由表3得知，與G處理（CK，下同）相比，各接種劑對箭筈豌豆的株高影響各異。總體來說，復合接種劑的效果優于單一接種劑和CK，除處理C外，單一接種劑處理與CK差異不顯著（P＞0．05），但處理B較CK增加4．5%。復合接種劑均較CK處理的株高增加22．9%～31．6%。單一接種劑中，C與A、B之間差異顯著（P＜0．05），復合接種劑中，E、F與處理D差異顯著（P＜0．05）。

表2 優良菌株促生特性Table 2 Characteristics of tested plant growth promoting rhizobacteria strains

表3 接種劑對箭筈豌豆株高和生物量影響Table 3 Effect of plant growth promoting rhizobacteria inoculum on height and biomass in vetch

2．2．2 接種劑對箭筈豌豆生物量影響 接種劑對箭筈豌豆地上生物量的影響與對株高的影響趨勢基本一致，但C處理對地上生物量的影響優于復合接種劑，較CK增加了104．5%，且與復合接種劑差異顯著（P＜0．05），A和B處理與CK相比，均有不同程度的下降，但與CK差異不顯著；復合接種劑各處理較CK增加了42．6%～83．7%。各處理對地下生物量的影響比對株高和地上生物量的影響顯著（P＜0．05），較CK增幅為51．5%～254．1%。綜上所述，單一接種劑C及各復合接種劑處理對箭筈豌豆地上和地下部分均有良好的促進作用。

2．3 接種劑對箭筈豌豆根系形態影響

接種劑對箭筈豌豆根系形態的影響顯著，觀察根系外觀形態（圖1），接種促生菌劑后各處理均根系發達，側根較多且細，主根較長；CK側根短粗，數量較少，主根較短。接種劑對箭筈豌豆根系形態指標的影響表明（表4）：與CK相比，接種劑對根長、根表面積及根體積的影響均顯著，各處理間差異也顯著，且根表面積與根體積的變化趨勢基本一致。其中，較CK相比，各處理對根長的增幅為30%～70%，處理F和C對根長的促進效果最為明顯；各處理對根表面積影響的排序為：C＞F＞D＞E＞A＞B＞G，對根體積的影響為F＞C＞D＞E＞B＞A＞G，除處理C外，總體上表現出復合接種劑效果優于單一接種劑。接種劑處理對根平均直徑的影響則相反，各處理較CK相比均有不同程度下降，且差異顯著。

2．4 接種劑對不同根直徑下箭筈豌豆根長和分布影響

由表5可見，接種劑處理對0～0．5mm內細根［19］根長影響顯著。C處理0～1．0mm內的根長顯著高于其他處理，而0．5～1．0mm級別下根長差異不大。分析根長在各級別的分布比例可知，接種劑各處理50%以上的根在0～0．5mm直徑范圍內，且接種植株該范圍內根系長度所占比例明顯高于未接種植株（圖2），95%左右的箭筈豌豆根是在0～1．0mm的直徑范圍內，說明細根的多少決定根長的大小。

圖1 接種劑對箭筈豌豆根系外觀形態影響Fig．1 Effects of plant growth promoting rhizobacteria inoculum on root morphology in vetch

表4 接種劑對箭筈豌豆根系形態指標影響Table 4 Effect of plant growth promoting rhizobacteria inoculum on root traits of vetch

表5 接種劑處理對不同根直徑下的總根長影響Table 5 Effect of inoculum on vetch in root length under different root diameter cm／株Plant

圖2 接種劑對箭筈豌豆根系直徑分級影響Fig．2 Effect of inoculum on vetch in different root diameter

2．5 接種劑對箭筈豌豆根系活力影響

如表6所示，不同接種劑處理下，箭筈豌豆根系活力變化明顯。復合接種劑除E處理，其效果優于單一接種劑處理和CK，單一接種劑A處理與CK差異不顯著。使用復合接種劑處理，箭筈豌豆根系活力較CK提高3．5%～38．3%，其中F處理效果最佳，與其他處理差異顯著，D處理次之；單一接種劑C較CK增加8．0%，處理B雖與CK差異不顯著，但與CK相比增加4．97%。這表明，復合接種劑處理提高根系活力效果明顯，但因處理不同差異較大。

3 討論

植物根際促生菌因具有多種有益生物學作用，成為國內外研究熱點。Hamdali和Ouhdouch［20］從摩洛哥含無機磷酸鹽土壤中分離出8株解磷放線菌，它們以植物根分泌物為營養，釋放土壤中有機磷，可使該地區小麥（Triticumaestivum）地上部分增長70%，根增長30%。Mirz等［21］將分離自水稻（Oryzasativa）根際的固氮菌株AzospirillumN－4接種于水稻根際，測得水稻根系增重78．1%，莖稈增重59．0%。Oliveira等［22］通過溫室試驗證明，水稻接種聯合固氮菌Herbaspirillum和Azospirillum后的固氮百分率分別為19%和47%。我國應用海洋細菌BAC－991的 PGPR對大豆（Glycinemax）、蔬菜等平均增產10．00%～18．19%，最高可達35%［23］。康貽軍等［24］對豇豆（Vignasesquipedalis）的研究表明，接種兩種促生菌后豇豆株高分別比對照提高14．39%和10．40%；莖葉干物重分別比對照增加19．69%和17．71%。劉佳莉等［25］利用從鹽堿土壤中分離出的促生菌株A－2和A－4處理燕麥種子，可有效促進燕麥生長并提高燕麥的鹽堿抗性。

表6 接種劑對箭筈豌豆根系活力影響Table 6 Effect of plant growth promoting rhizobacteria inoculum on root activity of vetch

本研究不同處理組合的接種劑對箭筈豌豆株高、生物量及部分根系形態等生長指標均有不同程度的促進作用，但處理之間差異較大。姚拓等［26］研究也證實，接種不同供試固氮菌株對燕麥生長的影響各異，大多數菌株明顯促進燕麥生長（株高、根長、根表面積和生物量），與本研究結果具有一定的相似性。其中處理F為溶磷菌、聯合固氮菌及根瘤菌復合處理，促進效果表現最為優良，尤其是對根系活力的提高作用顯著，這與溶磷菌與根瘤菌之間的互作效應是密不可分的。溶磷菌溶解的磷礦粉能作為根瘤菌的磷源，促進其生長繁殖，為植株提供更多的氮素。此外，菌株本身的生理特性、菌株互作效應及接菌方式等因素都可顯著影響菌對寄主植物的促生效果。張英等［27］對4株根際促生菌的互作效應研究表明，部分菌株混合后其有效磷增量及分泌IAA量均呈現“1＋1＞2”的加成效應。韓華雯等［28］利用單一促生菌株和菌株組合對紫花苜蓿（Medicagosativa）產量的研究表明，菌株組合效果優于單一菌株。本研究中部分菌株組合后效果也呈現出此趨勢，如對株高的影響為組合處理E、F均高于單一接種劑。本研究僅證明接種劑在水溶液難溶性磷條件下能夠溶解部分無效態磷、并結合固氮作用提供氮素供植株吸收利用，對自然土壤狀況下接種劑的應用有待進一步研究。

接種劑對根系生長可以起到良好的促進作用，主要表現在根長、生物量、根表面積及根體積等形態學變化上，但根系直徑較CK相比均有不同程度減小，CK根系直徑最大，但其根表面積最小，這也從另一方面說明了根系直徑越小其接觸面積越大，越有利于對養分和水分的吸收利用，這與王寧和秦艷［29］對三葉鬼針草（Bidenspilosa）接種AM真菌的研究結果一致。一般認為，根系活力能反映根系吸收能力的強弱，其強弱直接影響植株對營養物質的吸收，進而影響地上部的生長發育。馮莉等［30］研究證實，利用熒光假單胞菌處理煙草根系，其根系活力顯著提高。本研究除A處理外，其他處理均可提高箭筈豌豆根系活力，以處理F效果最佳。根系活力提高說明根系發達，側根數及根質量增加，這與上述根系形態的變化相一致。

根系形態特征與植物利用土壤養分的效率密切相關［31］，多數研究證實，低磷脅迫下植物根系會發生適應性變化，如無磷脅迫下大豆根長、根表面積與根體積比低磷及高磷條件下顯著提高，但根系直徑減小［11］。本研究通過接種溶磷菌，營養液中低磷脅迫下有效磷含量增加，加之箭筈豌豆種子較大，本身含磷量較高，在接種促生菌劑后箭筈豌豆根長、根表面積與根體積明顯提高，而根系直徑減小，說明微生物對根系形態的影響與低磷脅迫響應機制不同，可能是促生菌劑能增加根系分枝強度［29］。由于多數促生菌都可分泌生長素，而生長素誘導可刺激側根的產生［32］，因此，也可能與某些植物激素的調控有關。

以往研究關于箭筈豌豆根際微生物的報道較少，并且主要集中在根瘤菌與箭筈豌豆共生效應方面，有關溶磷菌、固氮菌及根瘤菌復合接種劑的研究尚未見報道。本研究對箭筈豌豆根際促生菌篩選及接種劑對其生長的影響進行了較為系統的前期試驗，對保障農牧業可持續發展具有重要意義。本試驗中菌株的分子生物學鑒定是下一步研究的重點。

4 結論

篩選出4株根際優良促生菌，其中J3－1、J1－15具有較高溶磷量，Y16兼具溶磷、固氮及分泌生長素性能，J3為根瘤菌，4株菌在后期應用中具有較高潛力。

利用篩選的優良促生菌株制備的接種劑對箭筈豌豆地上及根系生長有促進作用，接種劑C及F對箭筈豌豆具有較好的促進作用，有望成為后期研制菌肥的最佳菌株及組合。

［1］Adesemoye A O，Torbert H A，Kloepper J W．Enhanced plant nutrient use efficiency with PGPR and AMF in an integrated nutrient management system［J］．Canadian Journal of Microbiology，2008，54（10）：876－886．

［2］Oliveira C A，Alves V M C，Marriel I E．Phosphate－solubilizing microorganisms isolated from rhizosphere of maize cultivated in an oxisol of the Brazilian Cerrado Biome［J］．Soil Biology and Biochemistry，2009，41（9）：1782－1787．

［3］Chen Z X，Ma S W，Liu L．Studies on phosphorus solubilizing activity of a strain of phosphor－bacteria isolated from chestnut type soil in China［J］．Bioresource Technology，2008，99（14）：6702－6707．

［4］Hafeez F Y，Yasmin S，Ariani D，etal．Plant growth－promotingbacteria as biofertilizer［J］．Agronomy for Sustainable Development，2006，26：143－150．

［5］Suneja P，Dudeja S S，Narula N．Development of multiple co－inoculants of different biofertilizers and their interaction with plants［J］．Archives of Agronomy and Soil Science，2007，53（2）：221－230．

［6］陳哲忠，周省善．333／A春箭筈豌豆的選育與推廣［M］．蘭州：甘肅民族出版社，1991．

［7］王棟，任繼周．牧草學各論［M］．南京：江蘇科學技術出版社，1989．

［8］李琪．高寒牧區箭豌豆與燕麥混播實驗［J］．中國草原與牧草，1984，1（1）：38－41．

［9］趙秋．北方低產土壤實用綠肥作物栽培與利用［M］．天津：天津科技翻譯出版公司，2010．

［10］曾秀成，王文明，羅敏娜，等．缺素培養對大豆營養生長和根系形態的影響［J］．植物營養與肥料學報，2010，16（4）：1032－1036．

［11］王樹起，韓曉增，嚴君，等．缺磷脅迫對大豆根系形態和氮磷吸收積累的影響［J］．土壤通報，2010，41（3）：644－649．

［12］丁紅，張智猛，戴良香，等．不同抗旱性花生品種的根系形態發育及其對干旱脅迫的響應［J］．生態學報，2013，33（17）：5169－5176．

［13］劉霜，李廷軒，戢林，等．不同磷處理下兩種生態型粗齒冷水花的富磷特征及根系形態差異［J］．草業學報，2013，22（3）：211－217．

［14］Hafeez F Y，Malik K A．Manual on Biofertilizer Technology［M］．Pakistan：NIBGE，2000．

［15］Malik K A，Bilal R．Survival and Colonization of Inoculated Bacteria in Kallar Grass Rhizosphere and Quantification of N2－Fixation［A］．In：Nitrogen Fixation with Nonlegumes［C］．Skinner F A，Bodderand R M，Fendrik I，（Eds）．The Netherlands：Kluwer Academic Publishers，1989：301－310．

［16］姚拓，張德罡，胡自治．高寒地區燕麥根際聯合固氮菌研究Ⅰ固氮菌分離及鑒定［J］．草業學報，2004，13（2）：106－111．

［17］姚拓．高寒地區燕麥根際聯合固氮菌研究Ⅱ固氮菌的溶磷性和分泌植物生長素特性測定［J］．草業學報，2004，13（3）：85－90．

［18］任大明，張曉軒，董丹，等．拮抗菌株Kc－t99的鑒定及其抑菌活性研究［J］．生物技術，2011，4（4）：153－157．

［19］Whiting S N，Neumann P M，Baker J M．Applying a solute transfer model to phytoextraction；Zinc acquisition by Thaspi caerulescens［J］．Plant Soil，2003，249：45－56．

［20］Hamdali H，Ouhdouch Y．Rock phosphate－solubilizing Actinomycetes Screening for plant growth－promoting activities［J］．World Journal of Microbiology and Biotechnology，2008，24：2565－2575．

［21］Mirz M S，Rasul G，Mehnaz S．Beneficial effects of inoculated nitrogen－fixing bacteria on rice［J］．Biology and Fertility of Soils，2000，31：191－204．

［22］Oliveira A M，Urquiaga S，Dobereiner J，etal．The effect of inoculating endophytic N2－fixing bacteria on micropropagated sugarcane plants［J］．Plant Soil，2002，242：205－215．

［23］胡江春，薛德林，馬成新．植物根際促生菌（PGPR）的研究與應用前景［J］．應用生態學報，2004，15（10）：1963－1966．

［24］康貽軍，沈敏，王歡莉，等．兩株PGPR對豇豆苗期生長及土著細菌群落的影響［J］．農業環境科學學報，2012，31（8）：1537－1543．

［25］劉佳莉，方芳，史煦涵，等．2株鹽堿地燕麥根際促生菌的篩選及其促生作用研究［J］．草業學報，2013，22（2）：132－139．

［26］姚拓，蒲小鵬，張德罡，等．高寒地區燕麥根際聯合固氮菌研究Ⅲ．固氮菌對燕麥生長的影響及其固氮量測定［J］．草業學報，2004，13（5）：101－105．

［27］張英，朱穎，姚拓，等．分離自牧草根際四株促生菌株PGPR互作效應研究［J］．草業學報，2013，22（1）：29－37．

［28］韓華雯，孫麗娜，姚拓，等．不同促生菌株組合對紫花苜蓿產量和品質的影響［J］．草業學報，2013，22（5）：104－112．

［29］王寧，秦艷．AM 真菌對宿主植物三葉鬼針草根系形態的影響［J］．安徽農業科學，2012，40（1）：13－14．

［30］馮莉，張玲華，田興山．熒光假單胞菌對煙草根際微生物種群數量及根系活力的影響［J］．農業環境科學學報，2007，26（增刊）：537－539．

［31］Bonser A，Lynchj P，Snapp S．Effect of Phosphorus deficiency on growth angle of basal roots inPhaseolusvulgaris［J］．New Phytologist，1996，132：281－288．

［32］趙華，徐芳森，石磊．植物根系形態對低磷脅迫應答的研究進展［J］．植物學通報，2006，23（4）：409－417．