子宮內膜異位癥患者血清、腹腔液、在位/異位內膜組織中R A NT E S的表達及意義

潘玉香

山東省商河縣人民醫院婦產科，山東濟南 251600

子宮內膜異位癥是臨床上常見的婦科疾病，由于其病變累及廣泛，可引起盆腔粘連，使輸卵管的受孕功能遭到干擾，導致不孕，并且研究顯示[1-2]，其在育齡婦女中的患病率可高達15%～20%，使其成為國內外基礎及臨床研究的熱點之一。近年來，隨著對其致病機制基礎研究的不斷深人發現許多細胞因子在Ems的發生、發展中可能起著重要作用，而RANTES作為人單核巨噬細胞和淋巴細胞的選擇性趨化因子，研究顯示[3-4]，其能夠募集巨噬細胞至Ems病灶部位，但是臨床上對于RANTES與Ems局部免疫異常的關系鮮有報道。本文以34例子宮內膜異位癥的34例患者和40例非子宮內膜異位癥且盆腔結構正常的患者為研究對象，探討子宮內膜異位癥患者血清、腹腔液、在位/異位內膜組織中RANTES的表達及意義，為臨床上子宮內膜異位癥的治療提供依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院2011年10月—2013年10月接收的行腹腔鏡手術、經腹腔鏡及病理確診為子宮內膜異位癥的34例患者為觀察組；年齡24～47歲，平均年齡(32.3±5.2)歲。根據美國生殖協會(AFS)修訂的分期標準(rASRM)進行分期，其中Ⅰ期9例；Ⅱ期8例；Ⅲ期11例；Ⅳ期6例。月經卵泡期19例；月經黃體期15例。同期因其他原因行腹腔鏡手術的、非子宮內膜異位癥且盆腔結構正常的40例患者為對照組，年齡25～46歲，平均年齡(32.9±4.8)歲。月經卵泡期23例；月經黃體期17例。兩組均排除內分泌和感染性疾病、術前有激素治療史的患者，且兩組患者在年齡、月經分期等一般資料方面差異無統計學意義（P<0.05），具有可比性。

1.2 方法

采集靜脈血檢測血清RANTES，腹腔積液于腹腔鏡術中從患者腹腔內抽取，通過手術獲取患者在位/異位內膜組織。

1.2.1 標本采集 ①血液：所有患者均于手術當天采取肘靜脈血2 mL；注入試管待凝固后，4℃3000r/min離心；取血清，-80℃冰箱存儲待測。

②腹腔液：觀察組患者在月經干凈后3～7d內接受腹腔鏡手術；對照組在非月經期內接受腹腔鏡手術。術中收集兩組患者腹腔液3～5 mL；置于無菌離心管中；4℃3000r/min離心取上清液；-80℃冰箱存儲待測。

③異位內膜：手術室嚴格無菌操作下取2cm*3cm大小的卵巢子宮內膜異位囊腫囊壁、腹膜內異癥病灶或深部病變結節等異位內膜；置入PBS液內反復洗滌后，置于-170℃液氮罐中保存速冷；用組織勻漿液以2500r/min離心15 min，取上清液；-80℃冰箱存儲待測。

④在位、正常內膜：手術前診刮術或全子宮切除獲取在位/正常內膜；置入PBS液內反復洗滌后，置于-170℃液氮罐中保存速冷；用組織勻漿液以2500r/min離心15 min，取上清液；-80℃冰箱存儲待測。

1.2.2 檢測 采用酶聯免疫吸附方法(ELISA)檢測兩組患者以及觀察組不同分期患者之間血清、腹腔液、在位/異位內膜組織中RANTES的表達。酶標儀為深圳霄杜生命科學有效公司RT-6100酶標儀，試劑盒為上海達為科生物科技有限公司酶聯免疫試劑盒ELISA Kit（各項操作嚴格按試劑盒說明書進行，批內變異<6.0%）。

1.3 統計學方法

所有數據均以SPSS 17.0進行分析；計數資料以率或構成比表示，行Fisher檢驗；計量資料以表示，行t檢驗；以P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者血清、腹腔液中RANTES的表達水平比較

觀察組血清RANTES顯著高于對照組(t1=37.84，P1=0.000)，觀察組腹腔液中RANTES的表達量顯著高于對照組，差異具有統計學意義（t2=26.13，P2=0.000），且Ⅲ、Ⅳ期分期子宮內膜異位癥患者的血清、腹腔液RANTES的表達量均顯著高于Ⅰ、Ⅱ期，差異均具有統計學意義（P<0.05）。見表1。

表1 兩組患者血清、腹腔液中RANTES的表達水平比較[±s，ρ/(ng·L-1)]

表1 兩組患者血清、腹腔液中RANTES的表達水平比較[±s，ρ/(ng·L-1)]

組別 例數 血清 腹腔液對照組觀察組40 34ⅠⅡⅢⅣ9 8 1 1 6 557.6±102.9 671.3±125.7 639.1±109.4 576.4±115.8 740.2±108.6 691.3±123.1 11.6±3.2 20.4±2.9 13.1±3.7 17.5±2.6 19.8±3.1 25.6±3.0

2.2 正常內膜、在位內膜、異位內膜中RANTES的表達水平比較

正常內膜、在位內膜、異位內膜中RANTES的表達水平比較差異具有統計學意義（t=11.25，P=0.003），其中異位內膜、在位內膜顯著高于正常內膜（P<0.05）。輕度(Ⅰ～Ⅱ)子宮內膜異位癥患者在位內膜、異位內膜中RANTES的表達水平顯著低于重度患者(Ⅲ～Ⅳ)，差異均具有統計學意義（t1=8.65，P1=0.009；t2=9.22，P2=0.007）。見表2。

表2 正常內膜、在位內膜、異位內膜中RANTES的表達水平比較[±s,ng·g-1]

表2 正常內膜、在位內膜、異位內膜中RANTES的表達水平比較[±s,ng·g-1]

組別 例數RANTES正常內膜在位內膜Ⅰ～ⅡⅢ～Ⅳ異位內膜Ⅰ～ⅡⅢ～Ⅳ40 34 17 17 34 17 17 2.67±0.43 3.71±0.50 3.09±0.37 4.26±0.48 6.64±0.59 6.13±0.44 7.49±0.61

3 討論

本研究結果表明，子宮內膜異位癥患者血清、腹腔液中RANTES的表達量顯著高于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05），提示RANTES在全身及局部都參與了Ems的發生，且不同分期子宮內膜異位癥患者的RANTES的表達量差異具有統計學意義（P<0.05），其中Ⅲ、Ⅳ期顯著高于Ⅰ、Ⅱ期（P<0.05）說明RANTES的表達促進了Ems的發生，考慮是由于其促進中性粒細胞附壁及促進其從毛細血管和微靜脈中滲出，并且活化并趨化中性粒細胞到達病灶，形成子宮內膜異位癥患者腹腔微環境中的細胞因子，構成多重調節作用和免疫疊加作用，形成復雜的細胞因子級聯效應。研究中還發現，正常內膜、在位內膜、異位內膜中RANTES的表達水平比較差異具有統計學意義（P<0.05），其中異位內膜、在位內膜顯著高于正常內膜（P<0.05），從RANTES表達這一角度佐證了具有內在差異的在位內膜是子宮內膜異位癥形成中的決定因素，為治療子宮內膜異位癥開辟一條新途徑[5-6]。另外，輕度(Ⅰ～Ⅱ)子宮內膜異位癥患者在位內膜、異位內膜中RANTES的表達水平顯著低于重度患者(Ⅲ～Ⅳ)，差異均具有統計學意義（P<0.05），進一步證實了RANTES在EMs的發病環節中可能具有重要意義，考慮是由于局部病灶RANTES的增多可募集大量的炎性細胞進入病灶，促進其降解細胞外基質，并直接促進異位內膜間質細胞的增生，有利于異位內膜的維持和進一步發展。

綜上所述，子宮內膜異位癥患者血清、腹腔液、異位內膜、在位內膜中RANTES的表達量顯著高于非子宮內膜異位癥患者，且其表達量與臨床分期有關，表示RANTES可能參與子宮內膜異位癥的發生和發展。

[1]張佩蓮，鄧丹琪.趨化因子MCP-1、MCP-1α、RANTES與自身免疫性疾病[J].皮膚病與性病，2012,34(4):204-207

[2]Hornung D,Ryan II,Chao VA,et al.Immunolocalization and regulation of the chemokine Rantes in human endometrial and endometriosis tissues and cells[J].J Clin Endocrinol Metab,2007，82(5):1621-1628.

[3]羅燕，羅明燕.子宮內膜異位癥患者血清腹腔液在位異位內膜組織中RANTES的表達及意義[J].南昌大學學報，2013,53(2):21-23.

[4]張烜,吳靜.子宮內膜異位癥在位、異位內膜COX-2表達及腹腔液PGE2含量的研究[J].海南醫學,2010,21(5):1-4.

[5]范小斌,曹引麗,藺小賢,等.RANTES在子宮內膜異位癥在位內膜及異位內膜的表達及其意義[J].實用婦產科雜志,2012,28(12):1035-1038.

[6]姜立杰,祁美霞,丁玲玲.趨化因子RANTES和EOTAXIN與子宮內膜異位癥發病關系的研究[J].中國煤炭工業醫學雜志,2008,11(8):1148-1149.