云南金錢槭(Dipteronia dyeriana)果實的化學成分

石亞娜，劉大會，金 航，楊 雁，趙大克，王躍虎，龍春林，4*

1云南省農業科學院藥用植物研究所，昆明 650223;2 云南大學農學院，昆明 650091;3 中國科學院昆明植物研究所資源植物與生物技術重點實驗室，昆明 650201;4 中央民族大學生命與環境科學學院，北京 100081

金錢槭屬植物(Dipteronia)隸屬槭樹科(Aceraceae)，屬下僅云南金錢槭(D.dyeriana Henry)與金錢槭(D.sinensis Oliv.)兩個種，分別被列為國家二級和三級保護的珍稀瀕危植物［1-3］。我們此前對云南金錢槭的化學成分進行了系統的研究，從中發現了罕見的環己酰亞胺成分，以及一系列的三萜酯皂苷及酚性成分，其中部分化合物具有弱的細胞毒活性［4-7］。

本研究組已開展了云南金錢槭枝條及葉片部分的化學成分研究。從云南金錢槭葉片中分離得到13個化合物［8］，從其枝條部分90%乙醇提取物中共分離鑒定了24個化合物，化合物結構類型涉及木脂素、三萜、生物堿和香豆素等，其中新化合物7個［4，5］。

從云南金錢槭果實部分90%乙醇提取物已經分離鑒定了3個新的戊二酰亞胺類生物堿成分［6］，為了繼續尋找云南金錢槭果實中的抗腫瘤活性成分，我們陸續在果實的90%乙醇提取物中分離、鑒定了12個化合物，化合物結構類型涉及單萜、倍半萜和酚性成分:8個酚性成分即訶子裂酸11，12-二乙酯(1)，訶子裂酸12，13-二乙酯(2)，訶子裂酸11-甲酯-12，13-二乙酯(3)，訶子裂酸(4)，3，4，8，9，10-Pentahydroxy-dibenzo［b，d］pyran-6-one (8)，3，4，5-三羥基苯甲酸乙酯(9)，對羥基苯甲醛(10)，3，4-二羥基苯甲酸甲酯(11);2個倍半萜即二氫紅花菜豆酸(5)，紅花菜豆酸(6);1個單萜即7-Carboxyl-8-carveol (7);糖的氧化產物5-羥甲基糠醛(12)。由于提取、分離過程中使用了乙醇及甲醇，化合物1～3 可能是人工產物。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

供實驗用的云南金錢槭果實于2008 年10 月采自云南省屏邊縣;植物標本由中國科學院昆明植物研究所龍春林研究員鑒定;標本存放于中國科學院昆明植物研究所民族藥物化學實驗室。

1.2 實驗儀器及材料

1H 和13C NMR 譜在Bruker AM-400 或DRX-500 核磁共振儀上測定(TMS 為內標);柱層析用硅膠G (80～100 目，200～300 目，300～400 目)或硅膠H (10–40 μm)及薄層層析板均為青島海洋化工廠產品;薄層層析通過5%硫酸-乙醇溶液加熱觀察其斑點;MCI 大孔樹脂(70～150 μm，三菱化學公司);Sephadex LH-20 為Pharmcia 公司產品;反向材料RP-18 為Merck 公司產品;高效液相色譜儀(Agilent 1200，色譜柱:Zorbax SB-C18，φ 9.4 (250 mm，5 μm)。

1.3 實驗方法

將云南金錢槭果實曬干后(6 kg)粉碎，用90%乙醇加熱回流提取三次，合并提取液，濃縮得浸膏900 g。再依次用石油醚和乙酸乙酯各萃取三次，回收溶劑得石油醚萃取物588 g，乙酸乙酯萃取物17 g，水部分250 g。乙酸乙酯部分過MCI 大孔樹脂(甲醇–水，70∶30)洗脫，再經反相中壓液相色譜按梯度5%、15%、30%、35%、45%、55%洗脫，分別得到:Fr.1 (300 mg)、Fr.2 (481.3 mg)、Fr.3 (1.07 g)、Fr.4 (1.05 g)、Fr.5 (2.15 g)、Fr.6 (349.6 mg)。Fr.1 經過Sephadex LH-20 凝膠柱(MeOH 洗脫)得到化合物4 (23.3 mg)。Fr.2 經Sephadex LH-20 凝膠柱(MeOH 洗脫)、硅膠柱層析(CHCl3-MeOH 30∶1)、制備TLC(CHCl3-MeOH-H2O，40∶5∶0.45)后得到化合物12 (50.4 mg)。Fr.3 經Sephadex LH-20 凝膠柱(MeOH 洗脫)后得到Fr.3-1(35.1 mg)，Fr.3-2(72.3 mg)。Fr.3-1 經過硅膠柱層析(CHCl3-EtOAc 1 ∶1)、制 備 TLC (CHCl3-MeOHEt2NH，35∶7∶0.42)后得到化合物5 (6.5mg)。Fr.3-2 經制備TLC(CHCl3-MeOH，5∶1)后得到化合物10 (9.0 mg)及Fr.3-2-1(42.2 mg)經制備HPLC(MeOH-H2O，65∶35)后得到化合物10 (9.0 mg)和11(16.3 mg)。Fr.4 經過硅膠柱層析(CHCl3-MeOH 20∶1)后得到Fr.4-1(92.2 mg)和Fr.4-2(78.3 mg)。Fr.4-1 經過硅膠柱層析(CHCl3-MeOH 10∶1)、Sephadex LH-20 凝膠柱(MeOH 洗脫)、制備TLC (CHCl3-MeOH，7∶1)后得到化合物9 (25.5 mg)。Fr.4-2 經過Sephadex LH-20 凝膠柱(MeOH 洗脫)、制備HPLC (MeOH-H2O，60∶40)后得到化合物1 (21.4 mg)和2 (9.0 mg)。Fr.5 經Sephadex LH-20 凝膠柱(MeOH 洗脫)、硅膠柱層析(CHCl3-MeOH 30∶1)后得到Fr.5-1 (48.2 mg)和Fr.5-2 (70.3 mg)，Fr.5-1 經制備HPLC (MeOH-0.05%TFA，60∶40)后得到化合物7 (3.8 mg)和6 (7.0 mg)。Fr.5-2 經過硅膠柱層析(CHCl3-MeOH 5∶1)后得到化合物3 (23.4 mg)。Fr.6 經過反復硅膠柱層析(EtOAc-MeOH 10∶1)、(CHCl3-Me2CO-H2O 15∶30∶0.45)后得到化合物8 (72 mg)。

2 結構鑒定

化合物1 無色固體(MeOH)，C18H20O11;1H NMR (CD3OD，400 MHz)δ:5.29 (1H，d，J=1.2 Hz，H-3)，3.88 (1H，dd，J=9.2，1.2 Hz，H-4)，7.01 (1H，s，H-8)，3.16 (1H，ddd，J=9.2，8.8，5.6 Hz，H-9)，2.78 (1H，dd，J=17.2，8.8 Hz，H-10a)，2.44 (1H，dd，J=17.2，5.6 Hz，H-10b)，4.02 (2H，m)，3.93 (2H，m)，1.14 (3H，t，J=7.2 Hz)，1.07 (3H，t，J=7.2 Hz);13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:166.4 (C-1，qC)，78.8 (C-3，CH)，37.1 (C-4，CH)，117.3 (C-4a，qC)，144.1 (C-5，qC)，140.6 (C-6，qC)，146.8 (C-7，qC)，109.2 (C-8，CH)，116.2 (C-8a，qC)，44.9 (C-9，CH)，35.2(C-10，CH2)，173.4 (C-11，qC)，170.7 (C-12，qC)，176.6 (C-13，qC)，63.0 (CH2)，61.8 (CH2)，14.3(CH3)，14.2 (CH3)。其1H NMR 和13C NMR 數據和文獻報道相一致［8］，可以確定化合物1 為訶子裂酸11，12-二乙酯。

化合物2 無色固體(MeOH)，C18H20O11;1H NMR (CD3OD，400 MHz)δ:5.24 (1H，br s，H-3)，3.88 (1H，m，H-4)，7.03 (1H，s，H-8)，3.16 (1H，m，H-9)，2.87 (1H，dd，J=17.2 Hz，10.8，H-10a)，2.42 (1H，dd，J=17.2，4.4 Hz，H-10b)，4.12(2H，m)，4.09 (2H，m)，1.19 (3H，t，J=7.2 Hz)，1.09 (3H，t，J=7.2 Hz);13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:166.4 (C-1，qC)，78.3 (C-3，CH)，37.5(C-4，CH)，117.6 (C-4a，qC)，143.9 (C-5，qC)，140.7 (C-6，qC)，146.9 (C-7，qC)，108.9 (C-8，CH)，116.1 (C-8a，qC)，45.3 (C-9，CH)，35.1 (C-10，CH2)，174.8 (C-11，qC)，170.8 (C-12，qC)，174.8 (C-13，qC)，63.1 (CH2)，62.4 (CH2)，14.4(CH3)，14.2 (CH3)。其1H NMR 和13C NMR 數據和文獻報道相一致［8］，可以確定化合物2 為訶子裂酸12，13-二乙酯。

化合物3 無色固體(MeOH)，C19H22O11;1H NMR (CD3OD，400 MHz)δ:5.28 (1H，d，J=1.2 Hz，H-3)，4.10 (1H，dd，J=7.2，1.2 Hz，H-4)，7.02 (1H，s，H-8)，3.30 (1H，m，H-9)，2.83 (1H，dd，J=18.0，10.8 Hz，H-10a)，2.51 (1H，dd，J=16.4，4.8 Hz，H-10b)，4.11 (2H，m)，4.06 (2H，m)，3.62 (3H，s)，1.20 (3H，t，J=7.2 Hz)，1.08(3H，t，J=7.2 Hz);13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:166.3 (C-1，qC)，78.4 (C-3，CH)，37.3 (C-4，CH)，117.4 (C-4a，qC)，144.0 (C-5，qC)，140.7(C-6，qC)，146.9 (C-7，qC)，109.0 (C-8，CH)，116.2 (C-8a，qC)，45.0 (C-9，CH)，34.9 (C-10，CH2)，173.7 (C-11，qC)，170.7 (C-12，qC)，174.6(C-13，qC)，63.1 (CH2)，62.4 (CH2)，52.3(CH3)，14.3 (CH3)，14.2 (CH3)。其1H NMR 和13C NMR 數據和文獻報道相一致［8］，可以確定化合物3 為訶子裂酸11-甲酯-12，13 二乙酯。

化合物4 無色固體(MeOH)，C14H12O11;1H NMR (DMSO-d6，500 MHz)δ:5.37 (1H，s，H-3)，3.59 (1H，d J=8.5 Hz，H-4)，7.39 (1H，s，H-8)，2.85 (1H，ddd J=11.4，8.5，3.3 Hz，H-9)，2.79(1H，dd，J=16.9，11.4 Hz，H-10a)，2.08 (1H，dd，J=16.9，3.3 Hz，H-10b);13C NMR (DMSO-d6，100 MHz)δ:163.5 (C-1，qC)，76.6 (C-3，CH)，35.7(C-4，CH)，116.7 (C-4a，qC)，142.8 (C-5，qC)，138.9 (C-6，qC)，145.4 (C-7，qC)，107.7 (C-8，CH)，114.9 (C-8a，qC)，43.8 (C-9，CH)，34.3 (C-10，CH2)，173.1 (C-11，qC)，171.0 (C-12，qC)，174.6 (C-13，qC)。其1H NMR 和13C NMR 數據和文獻報道相一致［9，10］，可以確定化合物4 為訶子裂酸。

化合物5 無色油狀(MeOH)，C15H22O5;1H NMR (CD3OD，500 MHz)δ:5.78 (1H，s，H-2)，7.89(1H，d，J=16.0 Hz，H-4)，6.40 (1H，d，J=16.0 Hz，H-5)，2.03 (2H，m，H-2')，1.75 (2H，dd，J=13.5，10.5 Hz，H-2')，4.09 (1H，m，H-3')，1.83(2H，ddd，J=13.5，7.0，1.5 Hz，H-4')，3.79 (2H，dd，J=7.5，2.5 Hz，H-6')，3.70 (2H，d，J=7.5 Hz，H-6')，2.03 (3H，d，J=1.0 Hz，3-CH3)，1.14(3H，s，1'-CH3)，0.92 (3H，s，5'-CH3);13C NMR(CD3OD，100 MHz)δ:171.6 (C-1，qC)，122.5 (C-2，CH)，147.7 (C-3，qC)，132.2 (C-4，CH)，133.4(C-5，CH)，87.8 (C-1'，qC)，46.0 (C-2'，CH2)，66.0 (C-3'，CH)，44.5 (C-4'，CH2)，49.3 (C-5'，qC)，77.3 (C-6'，CH2)，83.2 (C-8'，qC)。21.0 (3-CH3，CH3)，20.0 (1'-CH3，CH3)，16.4 (5'-CH3，CH3)。其1H NMR 和13C NMR 數據和文獻報道相一致［11］，可以確定化合物5 為二氫紅花菜豆酸。

化合物6 無色油狀(MeOH)，C15H20O5;1H NMR (CD3OD，500 MHz)δ:5.79 (1H，s，H-2)，8.09(1H，d，J=15.9 Hz，H-4)，6.44 (1H，d，J=15.9 Hz，H-5)，2.36 (2H，m，H-2')，2.40 (2H，m，H-2')，1.83 (2H，m，H-4')，3.94 (2H，dd，J=7.63，2.87 Hz，H-6')，3.66 (2H，d，J=7.63 Hz，H-6')，2.06(3H，m，3-CH3)，1.21 (3H，s，1'-CH3)，1.00 (3H，s，5'-CH3);13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:170.0 (C-1，qC)，120.2 (C-2，CH)，150.7 (C-3，qC)，133.0(C-4，CH)，133.4 (C-5，CH)，87.8 (C-1'，qC)，211.0 (C-2'，CH)，53.2 (C-3'，CH)，44.5 (C-4'，CH2)，49.3 (C-5'，qC)，78.5 (C-6'，CH2)，83.0 (C-8'，qC)，21.2 (3-CH3，CH3)，19.4 (1'-CH3，CH3)，15.8 (5'-CH3，CH3)。其1H NMR 和13C NMR 數據和文獻報道相一致［12］，可以確定化合物6 為紅花菜豆酸。

化合物7 無色油狀(MeOH)，C10H16O3;1H NMR (CD3OD，500 MHz)δ:7.00 (1H，t，J=2.63 Hz，H-2)，2.04 (2H，m，H-3)，1.79 (2H，m，H-3)，1.71 (1H，m，H-4)，1.74 (2H，m，H-5)，1.49 (2H，m，H-5)，2.01 (2H，m，H-6)，1.91 (2H，m，H-6)，1.24 (3H，s，H-9)，1.27 (2H，s，H-10);13C NMR(CD3OD，125 MHz)δ:167.6 (C-1，qC)，130.8 (C-2，qC)，141.0 (C-3，CH)，28.1 (C-4，CH2)，45.0(C-5，CH)，24.1 (C-6，CH2)，26.0 (C-7，CH2)，71.7 (C-8，qC)，27.3 (C-9，CH3)，26.8 (C-10，CH3)。其13C NMR 數據和文獻報道相一致［13］，可以確定化合物7 為7-Carboxyl-8-carveol。

化合物8 無色針狀晶體 (MeOH)，C13H8O7;1H NMR (CD3OD，500 MHz)δ:8.43 (1H，d，J=9.0 Hz，H-1)，6.75 (1H，d，J=9.0 Hz，H-2)，7.37 (1H，s，H-7);13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:119.1 (C-1，CH)，113.0 (C-2，CH)，146.8 (C-3，qC)，146.4 (C-4，qC)，144.0 (C-4a，qC)，164.0 (C-6，qC)，112.4 (C-7，CH)，141.8 (C-8，qC)，141.0(C-9，qC)，133.3 (C-10，CH)，112.1 (C-10a，CH)。其1H NMR 和13C NMR 數據和文獻報道相一致［14］，可以確定化合物8 為3，4，8，9，10-Pentahydroxydibenzo［b，d］pyran-6-one。

化合物9 黃色針狀結晶(MeOH)，C16H18O10;1H NMR (CD3OD，500 MHz)δ:7.03 (2H，s，H-2 和H-6)，4.26 (2H，q，J=7.2 Hz，H-1')，1.33(3H，t，J=7.2 Hz，H-2')。其1H NMR 數據和文獻報道相一致［15］，可以確定化合物9 為3，4，5-三羥基苯甲酸乙酯。

化合物10 白色固體(MeOH)，C7H6O2;1H NMR (CD3OD，500 MHz)δ:9.76 (1H，s，H-7)，7.77(2H，d，J=8.5 Hz，H-2 和H-6)，6.91 (2H，d，J=8.5 Hz，H-3 和H-5)。其1H NMR 數據和文獻報道相一致［16］，可以確定化合物10 為對羥基苯甲醛。

化合物11 黃色固體(MeOH)，C8H8O4;1H NMR (CD3OD，400 MHz)δ:7.53 (1H，s，H-2)，6.81(1H，d，J=7.9 Hz，H-5)，7.55 (1H，d，J=7.9 Hz，H-6)，3.88 (3H，s，7-OMe)。其1H NMR 數據和文獻報道相一致［17］，可以確定化合物11 為3，4-二羥基苯甲酸甲酯。

化合物12 黃色油狀(CHCl3)，C6H6O3;1H NMR (CDCl3，500 MHz)δ:4.66 (2H，s，5-CH2OH)，6.48 (1H，d，J=3.4 Hz，H-4)，7.22 (1H，d，J=3.4 Hz，H-3)，9.51 (1H，s，2-CHO)。其1H NMR 數據和文獻報道相一致［18］，可以確定化合物12 為5-羥甲基糠醛。

3 討論

比較此前及本次的結果發現，云南金錢槭各部位、云南金錢槭與同屬的金錢槭(D.sinensis)相同部位(果實)、金錢槭屬與槭樹屬(Acer)中所分離到的化合物的類型，都存在較大的差異。

云南金錢槭枝條部分所分化合物的結構類型主要有三萜脂皂甙，木脂素等［6，7］，從云南金錢槭葉子部位所分的化合物的結構類型主要是酚酸類和單寧類化合物［8］。本研究從云南金錢槭果實中所分的化合物結構類型涉及酚酸類，與枝條部位所分的化合物相差甚遠，但分離到的酚酸類成分與云南金錢槭葉子中的相似。

云南金錢槭與金錢槭果實中所含的化合物類型也不同，金錢槭果實中分到的主要為三萜類，而此類型卻未從云南金錢槭果實中分到，而且也未從金錢槭果實中分到生物堿。

同科槭屬植物中主要含有二芳基庚烷衍生物類化合物和三萜皂甙類［19］，在金錢槭屬中我們分到與槭樹屬類似的齊敦果烷型三萜，卻沒有分離到二芳基庚烷衍生物類化合物。

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