陳道海,文 菁,趙玉燕,賴(lài)建財(cái)
(1.湛江師范學(xué)院 環(huán)北部灣海洋藥用動(dòng)物資源保護(hù)與利用研究所,廣東 湛江 524048;2.湛江師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,廣東 湛江 524048)
虎斑烏賊(Sepia pharaonis)隸屬于軟體動(dòng)物門(mén)(Mollusca),頭足綱(Cephalopoda),十腕目(Decapoda),烏賊科(Sepiidae),烏賊屬(Sepia),分布于菲律賓群島,馬來(lái)群島,大洋洲北部、東部和西部,印度近海,紅海以及我國(guó)的南海海域[1]。虎斑烏賊個(gè)體大、肉細(xì)嫩 、味道鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富,是一種經(jīng)濟(jì)價(jià)值很高的漁獲物。由于其具有餌料轉(zhuǎn)換率高、適合高密度養(yǎng)殖、抗病力強(qiáng)、生長(zhǎng)快等優(yōu)點(diǎn),是一種極具養(yǎng)殖前景的經(jīng)濟(jì)頭足類(lèi)[2]。隨著生活水平的提高,人們對(duì)食品的要求不再是僅僅滿(mǎn)足于溫飽,而是對(duì)食品的營(yíng)養(yǎng)和品質(zhì)有越來(lái)越高的要求。烏賊作為一種營(yíng)養(yǎng)豐富的高蛋白、低脂肪食品,正越來(lái)越受到人們的重視和喜愛(ài)。據(jù)《本草綱目》記載,烏賊肉具有活血化淤、補(bǔ)氣、補(bǔ)血、滋陰之功效;經(jīng)常食用可聰明延智、延緩衰老、提高造血和免疫功能[3]。
目前,國(guó)內(nèi)外相繼報(bào)道了金烏賊(Sepia esculenta)[3]、日本槍烏賊(Loligo japonica)[4]、曼氏無(wú)針烏賊(Sepia Maindroni)[5]、擬目烏賊(Sepia lycidas)[6]的營(yíng)養(yǎng)成分,也有對(duì)虎斑烏賊繁殖生物學(xué)方面的報(bào)道[7],但有關(guān)養(yǎng)殖類(lèi)型和野生虎型斑烏賊營(yíng)養(yǎng)成分與品質(zhì)評(píng)價(jià)的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究擬對(duì)養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊肌肉基本營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行分析,旨在對(duì)兩者營(yíng)養(yǎng)價(jià)值進(jìn)行綜合比較和評(píng)價(jià),為人工育苗與養(yǎng)殖提供理論依據(jù)。
在繁殖季節(jié)(2012年4月),選擇性成熟的養(yǎng)殖和野生的虎斑烏賊各3~5只,新鮮的野生虎斑烏賊購(gòu)于湛江市農(nóng)貿(mào)市場(chǎng),養(yǎng)殖類(lèi)型的虎斑烏賊取自本單位烏賊人工養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)基地,樣品取回實(shí)驗(yàn)室后,瀝干體表水分后稱(chēng)其鮮質(zhì)量10 kg。
所用常規(guī)試劑均為分析純;色譜分析用色譜純?cè)噭?/p>
A300型自動(dòng)氨基酸分析儀 德國(guó)曼默博爾公司;7890A型氣相色譜儀 美國(guó)安捷倫科技公司;SZC-C型脂肪測(cè)定儀 上海壘固儀器有限公司;SX2-2.5-12型高溫箱式電阻爐 上海索域試驗(yàn)設(shè)備有限公司;101A-2型電熱恒溫干燥箱 上海軋艮儀器設(shè)備有限公司;B-324型凱氏定氮儀 瑞士Buchi公司;TU-1800S型紫外分光光度計(jì) 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司。
1.2.1 取樣
將樣品的內(nèi)殼和內(nèi)臟去除,取其外套膜肌肉備用。
1.2.2 生化成分測(cè)定
水分含量測(cè)定采用恒溫烘干失水法,先在70~80 ℃條件下干燥約12 h,然后在105 ℃烘至恒質(zhì)量;蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法測(cè)定(GB/T 5009.5—1985《食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定方法》),以測(cè)得的總氮量乘6.25即得蛋白質(zhì)含量;粗脂肪含量采用索氏抽提法測(cè)定(GB/T 2479—2003《普通磨料國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》);灰分含量測(cè)定采用灼燒法(550 ℃)。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)重復(fù)測(cè)定3次。
1.2.3 氨基酸含量測(cè)定
參照GB/T 5009.124—2003《食品中氨基酸的測(cè)定》,樣品經(jīng)6 mol/L HCl水解后用A300自動(dòng)氨基酸分析儀測(cè)定氨基酸含量。參照GB/T 15400—94《飼料中色氨酸測(cè)定》方法,另取樣品經(jīng)10%KOH水解后采用TU-1800S型分光光度計(jì)測(cè)色氨酸含量。
1.2.4 脂肪酸含量測(cè)定
勻漿樣品冷凍干燥后,經(jīng)皂化、甲酯化、萃取,用Agilent 7890A氣相色譜儀測(cè)定,色譜條件:DB-23石英毛細(xì)管柱進(jìn)樣口溫度220 ℃,程序升溫:色譜柱起始溫度170 ℃,以4 ℃/min程序升溫至210 ℃,恒溫10 min。以標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯進(jìn)行定性,按歸一化法計(jì)算脂肪酸含量。
1.2.5 營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的評(píng)價(jià)
根據(jù)聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織(Food and Agriculture Organization,F(xiàn)AO)/世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)(1973年)提出的人體必需氨基酸均衡模式[8]和中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所(1991年)提出的雞蛋蛋白模式[9],進(jìn)行必需氨基酸計(jì)分(amino acid score,AAS)、化學(xué)評(píng)分(chemical sore,CS)和必需氨基酸指數(shù)(essential amino acid index,EAAI)[10]的評(píng)分。計(jì)算公式分別為。

式中:n為比較的必需氨基酸樣本數(shù);A、B、CE,…,H為虎斑烏賊肌肉蛋白質(zhì)的必需氨基酸含量/(mg/g);AE、BE、CE,…,HE為全雞蛋蛋白質(zhì)的必需氨基酸含量/(mg/g)。


表1 野生虎斑烏賊和養(yǎng)殖虎斑烏賊的一般營(yíng)養(yǎng)成分分析Table 1 Nutritional components in the muscle of cultured and wild cuttlefish %
從表1可知,人工養(yǎng)殖的虎斑烏賊肌肉營(yíng)養(yǎng)成分大致相同:鮮樣中水分、粗蛋白含量沒(méi)差異,但是人工養(yǎng)殖的烏賊粗灰分比野生虎斑烏賊少,粗脂肪比野生虎斑烏賊高,養(yǎng)殖樣本的脂肪酸的種類(lèi)比野生樣本少一種(見(jiàn)脂肪酸組成分析部分)。
無(wú)論是養(yǎng)殖型還是野生型虎斑烏賊,都含有較高的粗蛋白質(zhì),分別為20.24%和20.15%,都高于金烏賊(13.37%)[3]、日本槍烏賊(9.29%)[4]、曼氏無(wú)針烏賊(14.28%)[5]、擬目烏賊(14.8%)[6]等烏賊目類(lèi)和真蛸(18.00%)[11]等一些八腕目類(lèi);但兩者脂肪的含量較低,養(yǎng)殖虎斑烏賊肌肉中脂肪含量為0.97%,野生虎斑烏賊為0.81%,低于曼氏無(wú)針烏賊(1.20%)[5]、日本槍烏賊(1.43%)[4],但略高于擬目烏賊(0.17%)[6]和真蛸(0.50%)[11],這可能與養(yǎng)殖環(huán)境和所攝食的飼料有關(guān)。由此可見(jiàn),無(wú)論是野生的還是養(yǎng)殖的虎斑烏賊,它們的蛋白質(zhì)成分高于其他頭足類(lèi)、脂肪含量低于大多數(shù)頭足類(lèi)。
2.3.1 養(yǎng)殖型與野生型虎斑烏賊總氨基酸含量分析

表2 人工養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊肌肉的氨基酸組成及含量分析Table 2 Amino acid composition and contents in the muscle of cultured and wiilldd Sepia pharaonis %
由表2可知,無(wú)論是養(yǎng)殖型還是野生型虎斑烏賊肌肉中,氨基酸總量、必需氨基酸含量、鮮味氨基酸含量都很相近。養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊肌肉中都以谷氨酸含量最高,其次為天冬氨酸、亮氨酸和賴(lài)氨酸。養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊的呈鮮味氨基酸都將近占氨基酸總量的40%,因此,虎斑烏賊味道鮮美。
2.3.2 養(yǎng)殖型與野生型虎斑烏賊必需氨基酸組成及評(píng)價(jià)
AAS和CS從不同角度反映了蛋白質(zhì)構(gòu)成和利用率的關(guān)系, EAAI是一種評(píng)價(jià)蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的常用指標(biāo),反映了蛋白源的必需氨基酸組成與標(biāo)準(zhǔn)蛋白必需氨基酸組成的擬合程度。由表3可知,養(yǎng)殖虎斑烏賊的EAAI為72.67,其肌肉必需氨基酸含量(2 496.60 mg/g)高于FAO/WHO氨基酸標(biāo)準(zhǔn)模式(2 250 mg/g),但低于雞蛋蛋白模式(3 059 mg/g)。養(yǎng)殖虎斑烏賊的第一限制性氨基酸都是蛋氨酸,第二限制性氨基酸都是纈氨酸。
野生虎斑烏賊的EAAI為69.29,其肌肉必需氨基酸含量(2 358.85 mg/g)高于FAO/WHO氨基酸標(biāo)準(zhǔn)模式(2250 mg/g),但低于雞蛋蛋白模式(3 059 mg/g)。根據(jù)AAS和CS可知,野生虎斑烏賊的第一限制性氨基酸都是蛋氨酸,第二限制性氨基酸都是纈氨酸。

表3 養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊肌肉中必需氨基酸組成的評(píng)價(jià)Table 3 Evaluation of essential amino acid composition in the muscle of cultivated and wildd Sepia pharaoonniiss

表4 虎斑烏賊肌肉脂肪酸含量比較Table 4 Comparison of fatty acid composition in the muscle of Seeppiiaa pharaaoonniiss and other cephalopods %
由表4可知,養(yǎng)殖虎斑烏賊肌肉組織中含21種脂肪酸。其中,飽和脂肪酸7種,分別為豆蔻酸(C14∶0)、十五烷酸(C15∶0)、棕櫚酸(C16∶0)、十七烷酸(C17∶0)、硬脂酸(C18∶0)、花生酸(C20∶0)和二十四烷酸(C24∶0);不飽和脂肪酸(UFA)14種,其中單不飽和脂肪酸6種,分別為十五碳烯酸(C15∶1)、棕櫚油酸(C16∶1)、十七碳烯酸(C17∶1)、油酸(C18∶1)、花生一烯酸(C20∶1)和芥酸(C22∶1),多不飽和脂肪酸8種,分別為亞油酸(C18∶2)、反亞油酸(C18∶2t)、α-亞麻酸(C18∶3)、花生二烯酸(C20∶2)、花生四烯酸(C20∶4)、順-11,14,17-二十碳三烯酸(C20∶3)、二十碳五烯酸EPA(C20∶5)和二十二碳六稀酸DHA(C22∶6)。而野生虎斑烏賊肌肉組織含有22種脂肪酸,除了比養(yǎng)殖虎斑烏賊多了一種單不飽和脂肪酸反油酸(C18∶1t)外,其他的種類(lèi)一樣。野生型的EPA+DHA總含量比養(yǎng)殖型的高。
2.4.1 野生型與養(yǎng)殖型虎斑烏賊脂肪酸含量和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值分析
養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊肌肉中的脂肪酸主要以C14~C24為主。從表4可以看出,C22∶6(DHA)、C16∶0、C18∶0、C20∶5(EPA)和C20∶4(AA)5 種脂肪酸為虎斑烏賊主要脂肪酸,這5種脂肪酸含量總和占脂肪酸總含量分別為70.49%和74.47%。養(yǎng)殖虎斑烏賊肌肉中共檢測(cè)的脂肪酸種類(lèi)比野生虎斑烏賊少一種。虎斑烏賊和烏賊(S.officinalis)[9]、歐洲槍烏賊(L.vulgaris)[9]一樣多,略多于真蛸(O.vulgaris)[9];野生虎斑烏賊肌肉中共檢測(cè)的脂肪酸種類(lèi)略多于真蛸(O.vulgaris)、烏賊(S.officinalis)、歐洲槍烏賊(L.vulgaris)[9];養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊兩者的種類(lèi)均明顯多于已知的其他頭足類(lèi)如金烏賊(S.esculenta)[3]和日本槍烏賊(L.japonica)[4]。
養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊肌肉中飽和脂肪酸均以C16∶0和C18∶0為主要成分,占飽和脂肪酸總含量分別為90.14%和87.70%。在不飽和脂肪酸中,養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊以C20∶4(AA)、C20∶5(EPA)和C22∶6(DHA)為主要成分,三者的含量分別為6.78%、13.01%和20.62%及7.61%、8.49%和28.64%。在不飽和脂肪酸的種類(lèi)中,養(yǎng)殖虎斑烏賊的C20∶5(EPA)含量(13.01%)高于野生虎斑烏賊的(8.49%);野生虎斑烏賊在C22∶6(DHA)的含量(28.64%),明顯高于養(yǎng)殖的虎斑烏賊(20.62%)。但養(yǎng)殖虎斑烏賊的飽和脂肪酸總量比野生的略低,而不飽和脂肪酸總量比野生的高。
2.4.2 虎斑烏賊亞油酸含量與其他頭足類(lèi)的比較
由圖1可見(jiàn),養(yǎng)殖虎斑烏賊不飽和脂肪酸含量占總脂肪酸的56.60%,亞油酸C18∶2的含量占脂肪酸總量1.37%,高于野生虎斑烏賊、烏賊(S.officinalis)和歐洲槍烏賊(L.vulgaris)[9],而低于真蛸(O.vulgaris)[9]、金烏賊(S.esculenta)[3]和日本槍烏賊(Loligo japonica)[4]。

圖1 虎斑烏賊亞油酸含量與其他頭足類(lèi)的比較Fig.1 Comparison of linoeic acid content in the muscle of Sepia pharaonis and other cephalopods
2.4.3 虎斑烏賊EPA+DHA含量與其他頭足類(lèi)的比較

圖2 虎斑烏賊EPA+DHA含量與其他頭足類(lèi)的比較Fig.2 Comparison of EPA+DHA content in the muscle of Sepia pharaonis and other cephalopods
由圖2可看出,養(yǎng)殖類(lèi)型虎斑烏賊脂肪酸中EPA+DHA的含量占總脂肪酸的33.63%,明顯高于日本槍烏賊(Loligo japonica)[4],略低于野生虎斑烏賊和真蛸(O.vulgaris)[9]。養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊的EPA+DHA都明顯低于烏賊(S.officinalis)、歐洲槍烏賊(L.vulgaris)[9]和金烏賊(S.esculenta)[3]。
虎斑烏賊含有4種呈味氨基酸。烏賊味道鮮美,是人類(lèi)和許多海洋生物喜歡取食的對(duì)象,烏賊加工后呈現(xiàn)獨(dú)特的風(fēng)味,與其肌肉中含有多種呈味氨基酸有關(guān)。如谷氨酸不僅是重要的呈味物質(zhì),還參與人體內(nèi)腦蛋白和碳水化合物的代謝,促進(jìn)氧化過(guò)程,是腦組織代謝作用的活躍成分;天冬氨酸對(duì)心臟和肝臟具有保護(hù)作用,且具有顯著的抗疲勞功效[13];亮氨酸能促進(jìn)睡眠,降低對(duì)疼痛的敏感性,緩解偏頭痛,緩和焦躁及緊張情緒,減輕因酒精而引起生化反應(yīng)失調(diào)的癥狀并有助于控制酒精中毒[12];虎斑烏賊肌肉中賴(lài)氨酸的含量超過(guò)FAO/WHO模式和雞蛋蛋白質(zhì)模式。賴(lài)氨酸是人體主要的限制性氨基酸,具有增強(qiáng)免疫力、提高中樞神經(jīng)組織等功能,但在谷物中含量極低,日常飲食中賴(lài)氨酸的攝取往往不足[10]。因此,虎斑烏賊有助于人體獲得必需的外源氨基酸,是一種健康優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)源。
虎斑烏賊的EAAI 比較高。養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊肌肉中都含有8種人體必需氨基酸和2種半必需氨基酸:精氨酸和組氨酸,精氨酸在人饑餓、創(chuàng)傷或應(yīng)激下轉(zhuǎn)變成為必需氨基酸。養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊的EAA必需氨基酸/總氨基酸分別為42.83%和42.00%,高于40%的普通蛋白質(zhì)正常比例,屬于優(yōu)質(zhì)的人體所需的蛋白質(zhì),對(duì)維持防御和神經(jīng)肌肉功能方面特別重要。因此,虎斑烏賊是一種具有較高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的海產(chǎn)品。
養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊都是色氨酸最高,色氨酸在人體中是一種非常重要的氨基酸,在抗抑郁癥、改善睡眠、抗高血壓、提高免疫力等方面起到重要的作用;其次為賴(lài)氨酸和苯丙氨酸+酪氨酸,而最低的是蛋氨酸+胱氨酸。CS中,賴(lài)氨酸、色氨酸、亮氨酸都較高,最低的仍然是蛋氨酸+胱氨酸。從AAS及CS評(píng)分中可以看出二者的第一限制氨基酸均為蛋氨酸,第二限制性氨基酸都是纈氨酸。這些限制氨基酸是決定和限制虎斑烏賊肌肉營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的關(guān)鍵氨基酸,若能在虎斑烏賊肉質(zhì)食品中添加這些限制氨基酸,則可進(jìn)一步提高其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。因此,配制虎斑烏賊人工配合飼料時(shí),應(yīng)考慮適當(dāng)添加蛋氨酸和纈氨酸。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明脂肪酸有降血脂、降血壓、抗血栓、影響那神經(jīng)、視神經(jīng)功能、還具有抗癌、免疫調(diào)節(jié)作用,對(duì)過(guò)敏反應(yīng)和炎癥有抑制效果[12-14],特別是某些多不飽和脂肪酸,對(duì)人體具有多種重要的生理功能。飽和脂肪酸還對(duì)某些疾病尤其是酒精性肝病有防治作用[15-17]。亞油酸是一種公認(rèn)的必需脂肪酸。具有降低血脂、軟化血管、降低血壓、促進(jìn)微循環(huán)的作用,具有防治動(dòng)脈粥樣硬化及心血管疾病的保健效果。
花生四烯酸是人體大腦和視神經(jīng)發(fā)育的重要物質(zhì),對(duì)提高智力和增強(qiáng)視敏度具有重要作用。養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊的花生四烯酸含量都比較高。說(shuō)明虎斑烏賊肌肉具有酯化膽固醇、增加血管彈性、降低血液黏度,調(diào)節(jié)血細(xì)胞功能、預(yù)防心血管疾病、糖尿病和腫瘤等重要功效。
EPA和DHA具有降低血脂含量、減少脂肪在血管壁的沉積以及提高血管的韌性,從而可以降低心血管疾病的發(fā)生;同時(shí)EPA和DHA還具有抗衰老、促進(jìn)大腦的健康發(fā)育等功能。EPA是人體常用的幾種ω-3脂肪酸之一,DHA俗稱(chēng)“腦黃金”,是益智脂肪酸之王。DHA在增強(qiáng)記憶與思維、提高智力等作用更為顯著,還有預(yù)防近視和改善視力的作用,對(duì)嬰兒的腦發(fā)育及學(xué)習(xí)、記憶功能有重要作用[18-19]。
虎斑烏賊肌肉中EPA+DHA含量占脂肪酸含量的都高于30%,優(yōu)于許多陸生動(dòng)物和海鮮食材。說(shuō)明虎斑烏賊具有較高的營(yíng)養(yǎng)和藥用價(jià)值。
從脂肪酸的種類(lèi)來(lái)看,養(yǎng)殖類(lèi)型的不飽和脂肪酸總量比野生型的高,說(shuō)明人工養(yǎng)殖的烏賊人工養(yǎng)殖的烏賊更適合人類(lèi)營(yíng)養(yǎng)需求。同時(shí)也發(fā)現(xiàn),野生類(lèi)型虎斑烏賊比養(yǎng)殖型多檢測(cè)到1種脂肪酸,人工養(yǎng)殖的樣本中EPA+DHA含量比野生型的小,說(shuō)明養(yǎng)殖過(guò)程中食物提供的營(yíng)養(yǎng)素還不夠全面,因此,在養(yǎng)殖虎斑烏賊時(shí),可以考慮添加相應(yīng)的一些脂肪酸,以增加虎斑烏賊肌肉的脂肪酸種類(lèi)和EPA+DHA含量。
有些人誤認(rèn)為烏賊是一種高脂肪食品不宜多食用,檢測(cè)結(jié)果表明,烏賊肌肉中不僅脂肪含量低,而且脂肪中富含14種不飽和脂肪酸,EPA+DHA比大多數(shù)海產(chǎn)品高,是一種營(yíng)養(yǎng)素全面的海珍品。
從營(yíng)養(yǎng)成分組成上來(lái)分析,虎斑烏賊是一種高蛋白,低脂肪的海產(chǎn)品。人工養(yǎng)殖虎斑烏賊與野生虎斑烏賊均含有高比例的蛋白質(zhì)(20.24%和20.15%)和低比例的脂肪(0.97%和0.81%);氨基酸種類(lèi)豐富,含量高,養(yǎng)殖和野生虎斑烏賊都有8種人體必需氨基酸和2種半必需氨基酸成分,其中必需氨基酸/總氨基酸分別為42.83%和42.00%,高于40%的普通蛋白質(zhì)正常比例,屬于優(yōu)質(zhì)的人體所需的蛋白質(zhì)。虎斑烏賊不飽和脂肪酸比例大,其中EPA+DHA含量占脂肪酸含量的都高于30%。因此,虎斑烏賊的確是一種營(yíng)養(yǎng)豐富、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高的海味佳品。與其他海洋動(dòng)物相比,其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值更豐富、更均衡,更適合人類(lèi)的營(yíng)養(yǎng)需求,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。
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