氣相色譜法測定吡喹酮及片劑的殘留溶劑

鄭 靜，王小兵，徐志洲

（山東省食品藥品檢驗(yàn)所，山東濟(jì)南250101）

氣相色譜法測定吡喹酮及片劑的殘留溶劑

鄭 靜，王小兵，徐志洲

（山東省食品藥品檢驗(yàn)所，山東濟(jì)南250101）

目的建立氣相色譜法測定吡喹酮及片劑中的四種殘留溶劑。方法采用DB－624（30 m×0.5 mm，0.5μm）色譜柱，柱溫箱程序升溫，采用FID檢測器對乙醇和乙酸乙酯進(jìn)行檢測，采用ECD檢測器對三氯甲烷和二氯甲烷進(jìn)行檢測。結(jié)果乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、二氯甲烷四種殘留溶劑分別在0.051 0～5.102 4 mg·mL－1，0.050 0～4.995 0 mg·mL－1，0.515 8～51.58μg·mL－1，5.008 0～500.8μg·mL－1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均大于0.999 5。結(jié)論建立的氣相色譜法簡單、快速、準(zhǔn)確，可用于吡喹酮原料及其制劑中的殘留溶劑的檢測，為國家評價性抽驗(yàn)工作提供技術(shù)支持。

吡喹酮；殘留溶劑；氣相色譜法

吡喹酮片為國家基本藥物，主要是政府采購，作為衛(wèi)生部、國家戰(zhàn)略儲備藥物，免費(fèi)發(fā)放使用。現(xiàn)主要用于治療各種血吸蟲病、華支睪吸蟲病、肺吸蟲病、姜片蟲病以及絳蟲病和囊蟲病［1，2］。《中國藥典》2010年版及各國外藥典吡喹酮原料及其制劑均未在各論中規(guī)定殘留溶劑檢查。但吡喹酮原料及制劑在生產(chǎn)過程中所使用的殘留溶劑有乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷及二氯甲烷［3～5］。其中，乙醇、乙酸乙酯是第三類溶劑，限度均是0.5%，三氯甲烷、二氯甲烷是第二類溶劑，限度分別為0.006%、0.06%。因此，本文建立了氣相色譜法對吡喹酮及其片劑中的殘留溶劑進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的檢測。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 7890氣相色譜儀（含F(xiàn)ID、ECD，美國Agilent公司），BP211D電子天平（德國Sartorius公司）。

1.2 試藥 吡喹酮原料：2個生產(chǎn)廠家，共2批；吡喹酮片：2個生產(chǎn)廠家，共12批，均為0.2 g規(guī)格，其中相同批號2批為不同使用單位取得；試劑：均為色譜純，天津市康科德科技有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液配制 對照品溶液A：分別精密稱取乙醇及乙酸乙酯各50 mg置同一100 mL量瓶中，加二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻。

對照品溶液B：分別精密稱取三氯甲烷6 mg及二氯甲烷60 mg置同一10 mL量瓶中，加二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻，精密量取1mL置100mL量瓶中，加二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻。

供試品溶液：精密稱取片粉或原料約1 g置10 mL量瓶中，加二甲基甲酰胺溶解并稀釋至刻度，搖勻，過濾，取續(xù)濾液。

2.2 色譜條件

2.2.1 條件1 適用于測定乙醇及乙酸乙酯，色譜柱：Agilent DB－624（30 m×0.5 mm，0.5μm）；柱溫：初始溫度為50℃，保持10 min，以30℃·min－1升溫至200℃，保持5 min；其余色譜參數(shù)見表1。

2.2.2 條件2 適用于測定三氯甲烷及二氯甲烷，色譜柱：Agilent DB－624（30 m×0.5 mm，0.5 μm）；柱溫：初始溫度為70℃，保持3.5 min，以50℃·min－1升溫至200℃，保持3 min，平衡時間：1 min；其余色譜參數(shù)見表1。

表1 氣相參數(shù)設(shè)置表

2.3 線性關(guān)系

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配制 分別精密稱取乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、二氯甲烷適量，用二甲基甲酰胺稀釋至刻度，使?jié)舛确謩e為5.102 4、4.995 0、0.051 58、0.500 8 mg·mL－1，作為標(biāo)準(zhǔn)儲備液。

2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液的配制 分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)儲備液0.1、0.5、1.0、2.0、10 mL分別置10 mL量瓶中，加二甲基甲酰胺稀釋至刻度，作為標(biāo)準(zhǔn)曲線工作溶液。分別精密量取1μL進(jìn)樣，記錄色譜圖，以峰面積（A）對其濃度（C）進(jìn)行線性回歸，得線性方程，見表2。

表2 各殘留溶劑的線性方程及相關(guān)系數(shù)

2.4 進(jìn)樣精密度 取對照品溶液A、對照品溶液B，照“2.2”項(xiàng)下的色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣5次，分別計(jì)算各殘留溶劑的峰面積的RSD，分別為0.5%、0.7%、1.2%、1.0%。

2.5 溶液穩(wěn)定性考察 取供試品溶液，照“2.2”項(xiàng)下的色譜條件，于0、1、2、4、6、8 h，分別注入氣相色譜儀，計(jì)算各殘留溶劑的峰面積的RSD，結(jié)果均小于2.0%。

2.6 回收率與重復(fù)性 取空白輔料，按處方比例制備模擬樣品，并于供試品溶液中分別加入對照品溶液A及對照品溶液B，分別配置低、中、高3個濃度，每個濃度3份，以確定本法的回收率及重復(fù)性，結(jié)果見表3。

表3 回收率與重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.7 樣品測定 取吡喹酮原料2批，吡喹酮片12批，按“2.1”項(xiàng)下方法處理，精密量取1μL注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得，結(jié)果二氯甲烷與乙酸乙酯均未檢出，乙醇、三氯甲烷檢驗(yàn)結(jié)果見表4。

表4 各殘留溶劑檢測結(jié)果表

續(xù)表4：

3 討論

3.1 吡喹酮原料及其片劑中，乙酸乙酯和二氯甲烷檢出率為0，經(jīng)分析，這兩種溶劑為原料合成過程中上游反應(yīng)所涉及的溶劑，在后續(xù)試驗(yàn)過程中已基本沒有殘留，我們的試驗(yàn)結(jié)果與廠家測試結(jié)果一致。

3.2 乙醇和三氯甲烷的檢出率則為100%，其中乙醇在原料的合成過程及薄膜衣的包衣過程中均有使用，而三氯甲烷是吡喹酮原料合成過程中所用到的有機(jī)溶劑，且在后續(xù)處理過程中不易除去。

3.3 該方法操作簡便、測定準(zhǔn)確、數(shù)據(jù)可靠，為吡喹酮及片劑中殘留溶劑的測定提供一種有效的測定方法。

［1］黃一心，肖樹華.抗蠕蟲藥吡喹酮的研究與應(yīng)用［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008.

［2］楊振坤，汪偉，梁幼生.吡喹酮抗血吸蟲的免疫機(jī)制研究進(jìn)展［J］.中國熱帶醫(yī)學(xué)，2013，13（2）：240－244.

［3］王東升，沙娜，陳勇.吡喹酮合成新方法研究［J］.化學(xué)世界，2013，54（11）：666－669.

［4］馬麗霞，陳偉利，劉陽，等.吡喹酮緩釋植入劑的研制［J］.藥學(xué)研究，2013，32（6）：342－344.

［5］王風(fēng)軍，馬淑濤，翟吉勝.吡喹酮中間體N－苯乙基氯乙酰胺的合成工藝改進(jìn)［J］.藥學(xué)研究，2013，32（12）：740－741.

表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果顯示：本品回收率均在95.0%～105.0%之間，RSD＝1.39%，回收率良好。

結(jié)論：經(jīng)驗(yàn)證，本方法線性、精密度、溶液穩(wěn)定性、重復(fù)性、回收率良好，可以用于補(bǔ)氣活血膠囊中芍藥苷的含量測定。

2.2.9 樣品含量測定及限度的確定 按上述測定方法，測定9批樣品中芍藥苷的含量，結(jié)果見表2。

根據(jù)上述測定結(jié)果，考慮到實(shí)際生產(chǎn)中赤芍的來源及產(chǎn)地不同，暫定本品每粒含芍藥苷不得少于1.10 mg。

表2 9批樣品中芍藥苷的含量測定結(jié)果

3 討論

在補(bǔ)氣活血膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中，黃芪、赤芍、紅花的薄層鑒別斑點(diǎn)清晰，效果較好，陰性無干擾；用HPLC法測得的芍藥苷含量較高，且在本條件下，其HPLC峰不受雜質(zhì)峰的干擾，測定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，可用于本品的質(zhì)量控制。

參考文獻(xiàn)：

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版（一部）［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

［2］王藝純，王東平，王明翠，等.痔康膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J］.齊魯藥事，2011，30（10）：567－569.

Determ ination of residual solvents in praziquantel and its tablets by GC

ZHENG Jing，WANG Xiao-bing，XU Zhi-zhou
（Shandong Institute for Food and Drug Control，Jinan 250101，China）

ObjectiveTo establish an GCmethod for the determination of residual solvents in praziquantel and its tablets.MethodsAgilent DB－624（30 m×0.5 mm×0.5μm）column was used，the column temperature was programmed.Ethanol and ethyl acetate were detected by FID，chloroform and methylene chloride were detected by ECD.ResultsThe calibration curve of four residual solvents was linear in the concentration range of 0.051 0～5.102 4 mg·mL－1，0.050 0～4.995 0 mg·mL－1，0.515 8～51.58μg·mL－1，5.008 0～500.8μg·mL－1，respectively.The correlation coefficient r＞0.999 5.ConclusionThemethod was simple，rapid，accurate and can be used for the determination of residual solvents in praziquantel and its tablets.

Praziquantel；Residual solvents；GC

R927.1

：A

2095－5375（2014）03－0145－003

國家藥品評價性抽驗(yàn)項(xiàng)目（No.2011－57）

鄭靜，女，主管藥師，研究方向：藥品檢驗(yàn)，藥品標(biāo)準(zhǔn)起草、復(fù)核，E－mail：13573142128＠163.com

徐志洲，男，主任藥師，研究方向：藥品標(biāo)準(zhǔn)起草、復(fù)核，Tel：0531－81216555，E－mail：sdyjxzz＠163.com