替米沙坦氫氯噻嗪片的溶出度研究

郭 焱

（鹽城市藥品檢驗所，江蘇鹽城224000）

替米沙坦氫氯噻嗪片的溶出度研究

郭 焱

（鹽城市藥品檢驗所，江蘇鹽城224000）

目的考察替米沙坦氫氯噻嗪片中替米沙坦和氫氯噻嗪在四種不同介質(zhì)中的溶出行為。方法參照日本《醫(yī)療用藥品品質(zhì)情報集》中的溶出度試驗條件，并根據(jù)替米沙坦氫氯噻嗪片處方成分的理化性質(zhì)對溶出介質(zhì)進行選擇，分別考察了替米沙坦氫氯噻嗪片在pH 1.2的人工胃液（含0.5%十二烷基硫酸鈉溶液）、pH 4.0醋酸鹽緩沖液（含0.5%十二烷基硫酸鈉溶液）、pH 6.8磷酸鹽緩沖液（含0.25%十二烷基硫酸鈉溶液）及水（含0.25%十二烷基硫酸鈉溶液）中的體外溶出行為，采用高效液相色譜法測定替米沙坦氫氯噻嗪片中替米沙坦和氫氯噻嗪的溶出度，并通過相似因子（f2）法對兩種成分的溶出度曲線進行相似性比較。結果替米沙坦和氫氯噻嗪的線性范圍分別為20～50μg·L－1和6～20μg·L－1；在以上四種介質(zhì)中，以替米沙坦為參比，替米沙坦氫氯噻嗪片中氫氯噻嗪的f2大于50。結論該方法簡便、準確，重復性好，可用于該片劑的溶出度測定；替米沙坦氫氯噻嗪片中替米沙坦和氫氯噻嗪具有相似的溶出特點。

替米沙坦氫氯噻嗪片；溶出曲線；高效液相色譜法；相似因子

替米沙坦氫氯噻嗪片為血管緊張素ⅡAT1受體拮抗劑替米沙坦和利尿劑氫氯噻嗪所組成的復方降壓制劑。替米沙坦和氫氯噻嗪的聯(lián)合應用能減少藥物的不良反應，增強降壓效果。替米沙坦氫氯噻嗪片中的兩主藥替米沙坦和氫氯噻嗪均為難溶性藥物，考察兩藥的溶出度有助于控制制劑的質(zhì)量。本實驗參考日本“藥品品質(zhì)再評價”工程在溶出度研究中所擬定的模擬人體消化道內(nèi)體液的4種介質(zhì)及相關文獻［1～4］，并根據(jù)替米沙坦氫氯噻嗪片主成分的理化性質(zhì)對溶出介質(zhì)進行適當調(diào)整，建立了適宜的溶出系統(tǒng)，并采用高效液相色譜法測定替米沙坦氫氯噻嗪片中兩主藥成分的體外溶出度，為評價和控制替米沙坦氫氯噻嗪片的質(zhì)量提供了依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Waters 2695高效液相色譜儀（美國waters公司）；Waters 2996二級管陣列檢測器；Empower色譜工作站；Capcell PAK C18柱（4.6 mm×250 mm，5μm，日本資生堂公司）；ZRS－8G智能溶出儀（天津天大天發(fā)科技有限公司）；AG－135型電子天平（梅特勒－托利多公司）。

1.2 試藥 替米沙坦對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：100629－201202）；氫氯噻嗪對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：100309－201103）；替米沙坦氫氯噻嗪片［遠大醫(yī)藥（中國）有限公司，批號：20131005、20140101、20140307］；其他試劑均為國產(chǎn)分析純，水為超純水。

2 方法與結果

2.1 溶出介質(zhì)的選擇［1］水：純凈水；pH 1.2的人工胃液：取氯化鈉2.0 g，加水適量溶解后，加鹽酸7 mL，再加水稀釋至1 000 mL，混勻，即得；pH 4.0醋酸鹽緩沖液：將0.05mol·L－1醋酸溶液與0.05mol·L－1醋酸鈉溶液按16.4∶3.6的比例混合，即得；pH 6.8磷酸鹽緩沖液：取磷酸二氫鉀1.7 g和無水磷酸氫二鈉1.775 g，加水溶解并定容至1 000 mL，即得。

由于該制劑中的替米沙坦和氫氯噻嗪均為親水性較差的化合物，所以本實驗選擇采用十二烷基硫酸鈉為表面活性劑，分別采用含有1%，0.5%，0.25%十二烷基硫酸鈉溶液［5］的四種溶出介質(zhì)（pH 1.2、pH 4.0、pH 6.8和水）1 000 mL進行實驗。

根據(jù)實驗結果及國家藥典委員會對國家藥品標準中溶出度及釋放度應用指導原則的修改建議指南，最終選擇pH 1.2的人工胃液（含0.5%十二烷基硫酸鈉溶液）、pH 4.0醋酸鹽緩沖液（含0.5%十二烷基硫酸鈉溶液）、pH 6.8磷酸鹽緩沖液（含0.25%十二烷基硫酸鈉溶液）及水（含0.25%十二烷基硫酸鈉溶液）1 000 mL作為替米沙坦氫氯噻嗪片的溶出度考察介質(zhì)。

2.2 溶出度方法的選擇 分別按溶出度測定法（《中國藥典》2010年版附錄ⅩC籃法和槳法）測定［7］，取樣品6片，依法測定，精密量取續(xù)濾液20 μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積，計算兩主成分溶出百分率。結果表明，當采用籃法，經(jīng)45 min取樣測定，替米沙坦和氫氯噻嗪的溶出度均超過了80%，且溶出均勻，而采用槳法測定，溶出度都只有70%左右，且溶出均一性較差，故選擇籃法作為樣品溶出度的測定方法。

2.3 取樣時間的選擇 經(jīng)實驗，經(jīng)45 min時，替米沙坦氫氯噻嗪片中兩主成分在四種不同溶出介質(zhì)中的溶出率均超過了80%，因此，取樣時間確定為45 min。

2.4 轉(zhuǎn)速的選擇 取同批次的替米沙坦氫氯噻嗪片樣品6片，分別在轉(zhuǎn)速為50、75和100 rpm時，經(jīng)45 min時取樣分別測定溶出度，替米沙坦和氫氯噻嗪在四種介質(zhì)中的溶出程度均以100 rpm時最完全，故采用轉(zhuǎn)速100 rpm。

經(jīng)過上述實驗篩選，確定最終的溶出試驗條件：以上述四種不同溶出介質(zhì)為溶媒，采用籃法，轉(zhuǎn)速為100 rpm，取樣時間為45 min。

2.5 溶出度測定方法的建立

2.5.1 色譜條件［2，6］Capcell PAK C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5μm），流動相：乙腈－氫氧化四丁銨磷酸鹽緩沖溶液（取磷酸二氫銨0.43 g，10%氫氧化四丁銨溶液5 mL，加水至1 000 mL，用磷酸調(diào)節(jié)至pH 2.26）（22∶78），流速為1.0 mL·min－1，檢測波長為230 nm，柱溫：30℃，進樣體積為20μL。在此色譜條件下測定對照品、替米沙坦氫氯噻嗪片供試品及陰性樣品，結果顯示，陰性樣品無干擾，兩主成分峰與其他成分峰分離度良好，供試品溶液色譜圖見圖1。

圖1 供試品溶液高效液相色譜圖

2.5.2 線性實驗 分別精密稱取替米沙坦和氫氯噻嗪對照品約40 mg和12.5mg，置100mL量瓶中，用以上四種溶出介質(zhì)溶解并稀釋至刻度，即得對照品儲備液，精密量取對照品儲備液適量，用溶出介質(zhì)稀釋制成濃度為20、30、40、45、50μg·mL－1和6、8、12.5、15、20μg·mL－1的溶液，精密量取上述溶液各20μL，分別進樣分析。記錄色譜圖，以替米沙坦和氫氯噻嗪的濃度（C）為橫坐標，以相應的峰面積（A）為縱坐標，進行線性回歸，替米沙坦和氫氯噻嗪在20～50μg·mL－1和6～20μg·mL－1的濃度范圍內(nèi)線性關系均良好。

2.5.3 回收率試驗 取相當于1／2片的陰性樣本量，置500 mL量瓶中，精密加入替米沙坦和氫氯噻嗪對照品適量，分別用以上四種溶出介質(zhì)溶解制成相當于標示量80%（替米沙坦：32μg·mL－1，氫氯噻嗪：10μg·mL－1），100%（替米沙坦：40μg·mL－1，氫氯噻嗪：12.5μg·mL－1），120%（替米沙坦：48 μg·mL－1，氫氯噻嗪：15μg·mL－1）的溶液，每個濃度各3份，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，精密量取各續(xù)濾液20μL進樣分析，計算分別為按外標法以峰面積計算替米沙坦和氫氯噻嗪的平均回收率，結果表明，各溶出介質(zhì)中回收率試驗結果均良好，兩主成分峰的平均回收率均在99.5%以上，RSD均小于1.0%。

2.5.4 精密度試驗 量取用以上四種溶出介質(zhì)稀釋制成的40μg·mL－1的替米沙坦、12.5μg·mL－1的氫氯噻嗪對照品溶液分別連續(xù)進樣6次，每次20 μL，記錄色譜圖，計算各組峰面積的RSD，替米沙坦和氫氯噻嗪在四種介質(zhì)（pH 1.2、pH 4.0、pH 6.8和水）中的峰面積RSD分別為0.3%和0.5%、0.5%和0.7%、0.9%和0.8%、0.7%和0.9%，表明本方法精密度良好。

2.5.5 穩(wěn)定性試驗 取精密度試驗中濃度為40μg· mL－1的替米沙坦對照品溶液和濃度為12.5μg·mL－1的氫氯噻嗪對照品溶液，室溫放置，分別在0、2、4、6、8、24 h進樣20μL，記錄色譜峰面積，替米沙坦、氫氯噻嗪在四種介質(zhì)（pH 1.2、pH 4.0、pH 6.8，水）中的峰面積RSD分別為1.2%和1.0%、1.3%和1.1%、1.2%和1.5%、1.1%和1.3%，表明替米沙坦和氫氯噻嗪在各溶出介質(zhì)中24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.5.6 濾膜的干擾試驗 取替米沙坦、氫氯噻嗪對照品溶液，考察經(jīng)濾膜（0.45μm）過濾前后的峰面積變化情況，結果表明濾膜沒有干擾。

2.5.7 陰性干擾試驗 按替米沙坦氫氯噻嗪片工藝方法制備缺替米沙坦、氫氯噻嗪的替米沙坦氫氯噻嗪陰性片，分別加以上四種溶出介質(zhì)1 000mL，在37℃水浴中超聲（200 W，45 kHz）15 min，放冷，用0.45μm的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液20μL進樣分析，記錄色譜圖，結果表明，各溶出介質(zhì)條件下陰性樣本均不干擾本品溶出度的測定。

2.5.8 溶出曲線的均一性 取替米沙坦氫氯噻嗪片樣品6片，照上述溶出度試驗方法進行試驗，考察溶出均一性。計算累計替米沙坦、氫氯噻嗪溶出量與時間的溶出曲線，結果在四種溶出介質(zhì)中，6片樣本中的兩種主成分溶出度RSD均小于2%，表明樣品溶出度的均一性良好。

2.5.9 樣品溶出度檢測 取3批樣品進行溶出度試驗（批號：131005、140101、140307），兩種成分在四種不同的溶出介質(zhì)中的累計溶出數(shù)據(jù)（平均值）見表1。

表1 供試品在四種不同的溶出介質(zhì)中的累計溶出量（%）

2.5.10 兩主藥成分溶出行為的相似度比較 按“2.5.1”項下色譜條件測定替米沙坦氫氯噻嗪片中替米沙坦、氫氯噻嗪含量，計算兩種成分在四種不同介質(zhì)中的體外溶出度，繪制溶出曲線，如圖2～5所示。

圖2 兩者在pH 1.2介質(zhì)中的溶出曲線

圖3 兩者在pH 4.0介質(zhì)中的溶出曲線

采用相似因子（f2）法評價替米沙坦氫氯噻嗪片中替米沙坦、氫氯噻嗪的溶出度差異。f2值在50～100時兩種制劑釋放度相似，f2值越接近100相似程度越大。

圖4 兩者在pH 6.8介質(zhì)中的溶出曲線

圖5 兩者在介質(zhì)水中的溶出曲線

其中Rt為對照制劑t時間的累積釋藥率，Tt為試驗制劑t時間的累積釋藥率，n為釋放度試驗的取樣次數(shù)。結果以替米沙坦為參比，在四種介質(zhì)（pH 1.2，pH 4.0，pH 6.8，水）中氫氯噻嗪的f2分別為51.27，52.02，52.75和52.83，表明替米沙坦、氫氯噻嗪兩種有效成分的溶出具有相似性。

3 討論

3.1 替米沙坦氫氯噻嗪片為降壓類復方制劑，其溶出度測定方法之前雖有報道，但未報道其在四種溶出介質(zhì)中的溶出情況，且未對其中兩主藥成分進行過溶出度差異比較分析，本文參照日本《醫(yī)療用藥品品質(zhì)情報集》中的溶出度試驗條件，并根據(jù)替米沙坦氫氯噻嗪片處方成分的理化性質(zhì)對溶出介質(zhì)進行選擇，分別考察了替米沙坦氫氯噻嗪片在pH 1.2的人工胃液、pH 4.0醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液及水中的體外溶出行為，采用高效液相色譜法，參考文獻中含量測定項下的色譜條件測定替米沙坦氫氯噻嗪片中替米沙坦和氫氯噻嗪的溶出度，兩主成分峰與制劑中其他成分峰分離度符合規(guī)定；并通過相似因子（f2）法對兩主成分的溶出度曲線進行相似性比較，整個方法簡單、結果準確，可適用于替米沙坦氫氯噻嗪片的溶出度測定及質(zhì)量控制。

3.2 本實驗開始采用日本《醫(yī)療用藥品品質(zhì)情報集》中的溶出度試驗條件，轉(zhuǎn)速為100 rpm，考察了替米沙坦氫氯噻嗪片在pH 1.2的人工胃液、pH 4.0醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液及水中的溶出情況，分別于5、10、15、20、30、45、60 min時取樣，研究發(fā)現(xiàn)替米沙坦氫氯噻嗪片中的兩主成分替米沙坦和氫氯噻嗪的溶出情況均不理想，60 min時的溶出百分率均未超過65%。考慮到替米沙坦和氫氯噻嗪均為親水性較差的化合物，故實驗采取了在溶出介質(zhì)中加入表面活性劑的方法，結果證明方法可行，可用于控制替米沙坦氫氯噻嗪片的質(zhì)量。

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［2］石巧娟，陳琴華，王佩賢，等.復方替米沙坦膠囊中替米沙坦和氫氯噻嗪的HPLC測定［J］.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2005，36（3）：165－166.

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［5］張錦，龔士學，董曉蓉.環(huán)扁桃酯膠囊溶出度測定方法的研究［J］.藥物分析雜志，2011，31（10）：2001－2004.

［6］吳善霞，劉延鳳.HPLC法同時測定纈沙坦氫氯噻嗪片中兩組分的含量［J］.藥學研究，2013，32（3）：153－154，161.

［7］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版（二部）［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄85.

Study on dissolution test of Telm isartan and Hydrochlorothiazide Tablets

GUO Yan
（Yancheng Institute for Drug Control，Yancheng 224000，China）

ObjectiveTo study the dissolution behavior of telmisartan and hydrochlorothiazide in Telmisartan and Hydrochlorothiazide Tablets in four differentdissolutionmedia.M ethodsAccording to the dissolution test conditions in Japans＂quality ofmedical drugs information set＂andmake choice of the dissolutionmedium in accordance with the physicochemical properties of Telmisartan and Hydrochlorothiazide Tablets，different Telmisartan and Hydrochlorothiazide Tablets were inspected in pH 1.2 solution（containing 0.5%twelve sodium dodecyl sulfate），pH 4.0 acetate buffer（containing 0.5%twelve sodium dodecyl sulfate），pH 6.8 phosphate buffer（containing 0.25%twelve sodium dodecyl sulfate）and water（containing 0.25%twelve sodium dodecyl sulfate）by HPLC，and the resemblance of release curves were compared with similarity factors（f2）method.ResultsThe assay displayed a good linearity over the concentration range of 20～50μg· L－1，6～20μg·L－1for telmisartan and hydrochlorothiazide；In 4 different dissolutionmedia，compared with telmisartan，f2of hydrochlorothiazide was greater than 50.ConclusionThemethod was simple，accurate and reproducible for the dissolution determination of this tablet；The dissolution of telmisartan had similar characteristicswith hydrochlorothiazide in Telmisartan and Hydrochlorothiazide Tablets.

Telmisartan and Hydrochlorothiazide Tablets；Dissolution curves；HPLC；Similarity factor

R927.11

A

2095－5375（2014）12－0707－004

郭焱，男，主管藥師，研究方向：藥品檢驗，E－mail：7661685＠qq.com