張紀媛鐘建玲何 惠
(1.廣東省廣州市白云區疾病控制預防中心檢驗科,510445;2.廣州中醫藥大學第一附屬醫院)
免疫熒光法檢測細菌性陰道炎臨床分析
張紀媛1鐘建玲2何 惠2
(1.廣東省廣州市白云區疾病控制預防中心檢驗科,510445;2.廣州中醫藥大學第一附屬醫院)
目的 評價免疫熒光法檢測細菌性陰道炎的臨床價值。方法 80例疑似細菌性陰道炎患者取宮頸口分泌物3份標本,并標記為A、B和C。A標本均采用線索細胞檢查法檢測,B標本均采用免疫熒光法檢測,C標本采用細菌培養法檢測。A和B檢測結果均參考C標本檢測結果進行評價。結果 線索細胞法的特異度和準確度均顯著低于免疫熒光法(P均<0.05),兩種檢測方法的靈敏度差異無統計學意義(P>0.05)。結論 采用免疫熒光法檢測細菌性陰道炎具有更高的檢測價值,而且檢測方法簡單快速,有利于提高醫院競爭力,值得檢驗臨床考慮。
免疫熒光法;線索細胞法;細菌性陰道炎
陰道炎是婦科常見疾病,細菌性陰道炎亦占一定比例。細菌性陰道炎主要是由加德納菌與以些厭氧菌混合感染引起的[1]。該病不僅給患者帶來身心痛苦,而且還可能誘發宮頸癌或導致不育,因此早期及時準確的診斷,對于患者能更快更準確的接受治療具有重要意義。為了選擇合適的診斷方法,我們對患者分別采用線索細胞檢查法和免疫熒光法進行檢測。現報告如下。
1.1 一般資料 選擇2013年8月—2014年1月在廣州中醫藥大學第一附屬醫院就診的80例疑似細菌性陰道炎患者。入選標準:①符合以下項目中的任意兩項,pH>4.5,均質、稀薄的陰道分泌物,氨試驗陽性;②檢測期間無月經和妊娠,最近48 h內無性生活[2]。本組病例年齡(32.7±6.5)歲;病程(4.3±0.7)個月。
1.2 方法 所有患者均在消毒條件下用無菌棉簽取宮頸口分泌物3份標本,并標記為A、B和C。A標本均采用線索細胞檢查法檢測:將標本采用滾動式方法薄而均勻地涂于玻璃片,自然干燥。然后進行革蘭染色。然后在鏡下直接查找線索細胞,陽性:染色不定或革蘭陰性小桿菌或球桿菌覆蓋于陰道鱗狀上皮細胞表面。B標本均采用免疫熒光法檢測:免疫熒光檢測試劑盒為華大基因集團提供。滴加磷酸鹽緩沖液(pH為7.4,濃度為0.01 mol/L)于待檢標本片上,保持10 min后清除,然后滴加適當稀釋的抗體溶液(含熒光標記)完全覆蓋標本。恒溫下保持一段時間后,取出玻片,磷酸鹽緩沖液沖洗,之后在磷酸鹽緩沖液中浸泡8~10 min。取出玻片,濾紙吸去多余水分,加甘油1滴,蓋玻片覆蓋,熒光顯微鏡下觀察。陽性:成堆發亮綠色熒光。C標本采用細菌培養法檢測,兩種檢測方法的結果均參考細菌培養法結果進行評價。統計兩種檢測方法的特異度、靈敏度和準確度。

表1 兩種檢測方法效果比較
1.3 統計分析 采用SPSS 12.0軟件處理相關數據,計數資料采用檢驗,P<0.05表示差異有統計學意義。
本次細菌培養法共確診73例。線索細胞法的特異度和準確度均顯著低于免疫熒光法(P均<0.05),兩種檢測方法的靈敏度差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。
加德納菌是細菌性陰道炎的主要致病菌,該菌為革蘭陰性或有變異的球菌樣小桿菌,適于在pH>4.5的環境下生長。細菌性陰道炎的診斷標準主要為4項[3]:①pH>4.5;②均質、稀薄的陰道分泌物;③氨試驗陽性;④存在加德納菌。符合任意3項即可確診,但臨床上常常遇到符合前3項中的任意兩項,還需要進一步確定是否加德納菌,這時就有必要選擇合適的檢測方法,以提高加德納菌的檢出率。
線索細胞法是目前臨床上廣泛應用的檢測方法,是利用加德納菌能否被染色的物理性質。線索細胞即陰道上皮細胞,若存在加德納菌,可大量附著其表面,從而在鏡下被觀測到。但線索細胞法受標本采集、顯微鏡質量和操作者經驗等諸多因素影響[4];此外,陰道內環境較為復雜,可能也存在著一些其他的革蘭陰性菌,從而導致線索細胞法的特異度降低[5],出現假陽性誤診的情況,如本次線索細胞法的特異度為86.3%,處于一個相對較低的水平。
免疫熒光法的原理是利用特異抗體與抗原(加德納菌)結合,通過觀察特異抗體所帶熒光的分布和強度[6],從而判斷是否存在加德納菌。由于抗原是針對加德納菌特制的,可有效避免其他雜菌的非特異度結合,因此具有很高的特異度[7]。而且抗原可高效的結合于抗原,因此也具有很高的靈敏度[8],有效避免了漏診。本次免疫熒光法的特異度達到了97.3%,靈敏度達到了100.0%。
從觀察結果來看,免疫熒光法的特異度和準確度均顯著高于線索細胞法,而且具有很高的靈敏度,顯示了更好的檢測效果。我們認為,采用免疫熒光法檢測細菌性陰道炎具有更高的檢測價值,而且檢測方法簡單快速,有利于檢測人員在保證準確度的基礎上提高工作效率,對于提高醫院競爭力具有積極意義,值得檢驗臨床考慮。
[1] 石一復.外陰陰道疾病[M].北京:人民衛生出版社,2005:256.
[2] 袁宏.單克隆抗體免疫熒光法快速檢測加德納菌[J].實用醫技雜志,2006,13(16):2899.
[3] 崔海洋.免疫熒光法檢測細菌性陰道炎的應用評價[J].檢驗醫學與臨床,2013,10(16):2124-2124.
[4] 田永紅,熊承良,官黃濤,等.直接免疫熒光法檢測陰道毛滴蟲[J].中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志,2003,2l(4):242-244.
[5] 肖華英.陰道炎986例陰道分泌物檢測結果分析[J].中國藥物經濟學,2012,4(5):116-117.
[6] 王會平,李巖,李斌,等.細菌性陰道炎臨床檢測及分析[J].國際檢驗醫學雜志,2011,32(8):900-901.
[7] 馬瑞亮,劉維琴,韓保良.婦科門診陰道分泌物常規檢測2634例分析[J].菏澤醫學專科學校學報,2011,23(3):37-38.
[8] 賴煒玲,李麗,郝曉瑩.2930例應用兩種實驗方法診斷細菌性陰道炎的比較[J].中國微生態學雜志,2009,21(12):1114-1115.
1672-7185(2014)12-0046-02
10.3969/j.issn.1672-7185.2014.12.026
2014-01-03)
R711
A