酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物結果的對比分析

匡芳梅何偉業

（1 廣州市番禺區第二人民醫院檢驗科，廣東 廣州 511430；2 廣州中醫藥大學第一附屬醫院檢驗科，廣東 廣州 510405）

酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物結果的對比分析

匡芳梅1何偉業2

（1 廣州市番禺區第二人民醫院檢驗科，廣東 廣州 511430；2 廣州中醫藥大學第一附屬醫院檢驗科，廣東 廣州 510405）

目的 對比分析酶聯免疫法（ELISA）與電化學發光法（ECLIA）檢測血清中腫瘤標志物甲胎蛋白（AFP）的結果并評價其應用價值。方法 采用酶聯免疫法及電化學發光法對176份血清樣本進行AFP含量檢測，并對兩種檢測方法的結果進行比較和分析。結果 ELISA法與ECLIA法均能準確的檢測出血清中AFP的含量，統計學分析表明兩組檢測結果呈高度相關性，相關系數＞0.99，雙樣本均值分析t檢驗下雙尾檢驗P=0.307，表明兩組檢測結果比較無顯著差異，P＞0.05，不具有統計學意義。結論 酶聯免疫法與電化學發光法在檢測AFP結果上有較高的一致性，可為臨床腫瘤診斷及治療提供指導。

酶聯免疫法；電化學發光法；AFP腫瘤標志物

甲胎蛋白（AFP）在正常生理狀態下是一種胚胎肝組織細胞中產生的一種糖蛋白，一般情況下在新生兒出生后約2周左右血清中AFP消失，正常非妊娠期健康人血清中AFP含量應低于20 ng/mL，通過臨床研究表明，約80%的肝癌患者血清中AFP水平異常升高，同樣在其他腫瘤患者血清中AFP含量均表現為不同程度上的增高或增高趨勢，因此可將AFP作為原發性腫瘤的特異性診斷腫瘤標志物，因而AFP含量異常的準確檢出對腫瘤的早診斷、早治療及鑒別診斷具有重要意義[1]。ELISA法是一種經典的免疫學檢測法，其檢測精度及應用價值已獲臨床廣泛認可，而ECLIA法近年來應用發展迅速，該檢測方法具有快速、結果精確、重復性好、安全性高、無毒無輻射的優勢[2]。本組實驗對比分析ELISA法與ECLIA法檢測腫瘤標志物AFP的結果，判斷兩種檢測方法的應用價值。現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：篩選2013年1月至2014年6月各型腫瘤患者176例，作為研究對象。其中男性98例，女性78例，年齡在42～75歲，平均年齡為（50.4±7.5）歲，其中58例血清標本AFP指標處于正常范圍（AFP含量＜20 ng/mL），另118例血清標本AFP含量均高于20 ng/mL，含量檢測標本在0.55～286 ng/mL。

1.2 標本采集：常規采集患者靜脈血3 mL，離心后分離血清，制成雙份血清標本，-20 ℃下保存待檢。所有標本分四次分別進行ECLLIA法和ELISA法檢測，每次檢測于2 h內完成所有項目。

1.3 儀器與試劑：ECLLIA法使用羅氏Cobase 601型電化學發光自動分析儀及其配套試劑、質控品、定標液進行實驗，常規方法對血清AFP含量進行檢測；ELISA法使用美國寶特ELX800全自動酶標儀及鄭州安圖綠科生物工程有限公司甲胎蛋白定量檢測試劑盒，檢測流程及操作嚴格按照儀器、試劑盒說明書進行。采集兩種檢查方法結果并進行統計學分析。

1.4 統計學處理：兩組數據應用線性回歸方程進行相關性分析；所有數據采用SPSS 17.0統計軟件進行處理和分析，計量資料以（均數±標準差）表示，P＜0.05表示具有統計學意義，兩組數據存在顯著差異，P＞0.05表示不具有統計學意義，兩組數據具有高度一致性。

2 結 果

應用最小二乘法擬合直線得：Y=-3.44953+1.19883X×（-6.14497）×（105.13567），比較酶聯免疫法（Y）與電化學發光法（X）檢測結果，是否具有相關性，結果表明：最終截距項t值大于臨界值，t=-6.14497，P＜0.05，在95%可信驗證下，截距項較為顯著；同時X前的系數項t值大于臨界值，t=105.13567，P＜0.05，在95%可信驗證下，X前的系數項顯著，說明X與Y線性關系成立，且相關系數為0.99579，相關系數＞0.99，接近于1，表明X與Y具有高度的線性相關性。

鑒于ELISA法與ECLIA法檢測結果呈正態分布，要反映ELISA法與ECLIA法在腫瘤標志物AFP的檢測差異是否具有統計學意義，還需要進一步做成對雙樣本均值分析的t檢驗，故以雙樣本均值t檢驗法進行統計學分析。結果顯示，雙樣本均值分析t檢驗下雙尾檢驗P值為0.307，表明兩組檢測結果比較無顯著差異，P＞0.05，不具有統計學意義。見表1。

3 討 論

甲胎蛋白（AFP）主要在胎兒時期肝臟中形成并分泌，胎兒發育13周時AFP含量約占血漿蛋白總量的1/3，并于妊娠30周時達到最高峰，其后AFP含量逐漸下降并在出生后2周消失或低于20 ng/mL，其中妊娠期AFP檢查用于胎兒產前檢測具有重要作用[3]。臨床研究表明，肝癌患者血清中AFP含量升高表現約占80%，生殖細胞腫瘤AFP陽性率為50%左右，在其他腫瘤患者中AFP均表現為不同程度的升高，因此準確檢測血清AFP含量對早期腫瘤診斷、鑒別診斷及病情評價具有重要意義[4]。

表1 ELISA法與ECLIA法檢測數據統計學分析結果

本組實驗結果表明兩種檢測方案檢查結果具有高度一致性，均能準確的檢測出患者血清AFP含量，差異不顯著，不具有統計學意義。分析腫瘤患者AFP含量異常升高機制可知，當機體細胞發生癌變時恢復了AFP蛋白質生成功能，因而導致血清中AFP含量異常升高并隨著病情的進展AFP含量會急劇升高，可作為腫瘤診斷的特異性標志物。ECLIA法是一種新一代標記免疫分析技術，通過結合電化學發光與免疫測定兩方面的有點實現快速檢測、結果精確、檢測無毒無放射性、自動化程度高的特點，但其應用設備及試劑較為昂貴；而ELISA法為經典免疫檢測法，操作簡單且試劑、儀器低廉，適用于基層醫院或疾控中心，但其穩定性、精確度尚存在不足[5]。而本組實驗結果顯示兩組方法比較無顯著差異，即可在某些狀況下替代檢測，但具體應用檢測需結合實際情況。

綜上所述，酶聯免疫法與電化學發光法均可有效、準確的檢測出腫瘤患者血清中腫瘤標志物甲胎蛋白的異常情況，并且二者檢測結果具有高度一致性，均可用作腫瘤標志物的檢測，可為臨床腫瘤診斷及評價提供指導[6]。

[1] 王利強.酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物結果的對比分析[J].中國實用醫藥,2014,9(15):48-49.

[2] 吳光遠.酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物結果的對比分析[J].中國實用醫藥,2014,9(9):68-69.

[3] 黃延平.電化學發光免疫分析(ECLIA)檢測甲胎蛋白(AFP)對原發性肝癌的臨床診斷[J].中國民康醫學,2010,22(9):1127.

[4] 邢福軍,楊巧林,田衛花.酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物結果的對比分析[J].國際檢驗醫學雜志,2011,32(17):1997-1998.

[5] 杜忠芳,陳燕,婁良文.放射免疫法同電化學發光法檢測血清AFP效果分析[J].吉林醫學,2010,31(33):5993.

[6] 王倩.酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物結果的對比分析[J].臨床醫學,2014,34(5):96-97.

表1 新生兒低血糖癥的高危因素

2.3 治療效果：經積極有效治療后93例新生兒低血糖癥患兒均治愈，有效率為100%。

3 討 論

新生兒低血糖癥是由于機體對糖的利用與生成及調控之間失衡所致。常見原因包括葡萄糖的利用增加，生成或儲備減少，或者二者兼而有之[2]。低血糖可直接影響腦的能量代謝，從而影響一系列病理生理活動，如未得到及時糾正會造成永久不可逆的腦損傷[3]。故對所有高危兒進行動態血糖監測是非常必要的。

新生兒低血糖的臨床表現缺乏特異性，本研究顯示93例新生兒低血糖癥患兒中無癥狀者占62.4%，有癥狀者僅占37.6%，主要表現為反應低下、吸吮力差，興奮、煩躁，震顫，嗜睡，發紺，呼吸暫停等。在臨床工作中，如出現上述臨床表現應及時測血糖，以期早發現，早治療，避免導致中樞神經系統損傷。對于無癥狀的新生兒低血糖患兒，若不能及早發現和治療，持續的低血糖可能會出現上述的非特異癥狀，并會造成機體損傷。

有研究顯示，胎兒的病理生理狀況和合并癥以及圍生期孕婦的血糖水平等因素均可影響新生兒的糖代謝[4]。本研究提示：早產兒、足月小于胎齡兒、新生兒窒息、糖尿病母親嬰兒、咽下綜合征、敗血癥、紅細胞增多癥、新生兒溶血癥、新生兒胎糞吸入綜合征等是新生兒低血糖癥的高危因素。如早產兒、足月小于胎齡兒的肝糖原儲存少，糖異生途徑中的酶活力較低，糖原分解能力差，而皮下脂肪少，供能量少，但腦細胞代謝需糖量大，故易發生低血糖。本例中上述危險因素共出現43例，是新生兒低血糖的主要危險因素。圍生期缺氧或生產時窒息，低氧和酸中毒的環境下體內兒茶酚胺分泌增多，肝糖原分解加快，加之無氧酵解使葡萄糖利用增多，從而導致低血糖。糖尿病母親嬰兒是由于胎兒暫時性高胰島素血癥，胰島素-血糖激素分泌失衡，而生后母親供給糖原突然中斷導致低血糖發生。咽下綜合征等往往會出現嘔吐頻繁，喂養較困難，導致葡萄糖攝入減少，常會發生低血糖，本例危險因素出現10例，也是新生兒低血糖不容忽視的危險因素。

綜上所述，新生兒低血糖癥的臨床表現隱匿，在臨床工作中應給予足夠重視，對所有高危兒應動態監測血糖，早發現，早治療，做到預防與治療相結合，盡量減輕低血糖程度及縮短低血糖持續時間，避免造成神經系統損傷。

參考文獻：

[1] 邵肖梅,葉鴻瑁,丘小汕.實用新生兒學[M].4版.北京:人民衛生出版社,2011:755-758.

[2] 劉志偉,陳惠金.新生兒低血糖的診斷與治療[J].臨床兒科雜志,2010,28(3):212-219.

[3] 徐琦新.新生兒低血糖危險因素及防治[J].實用兒科臨床雜志, 2001,6(2):109.

[4] 陳萍.新生兒低血糖癥76例臨床分析[J].中國婦幼保健,2011, 26(19):59-60.

Comparison and Analysis of ELISA Method and Electrochemical Method on Detecting of AFP Tumor Marker

KUANG Fang-mei1, HE Wei-ye2
(1 Department of Laboratory, Fanyu District Second People's Hospital of Guangzhou, Guangzhou 511430, China; 2 Department of Laboratory, First Affiliated Hospital, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510405, China)

Objective To compare and analyze ELISA method and electrochemical method on detecting of AFP tumor marker as well as evaluate its application value. Methods Tested AFP content detection of 176 serum samples using ELISA method and electrochemical luminescence method, compared and analyzed the results between two kinds of detection method. Results ELISA method and ECLIA method can accurate content detection in blood serum of AFP, the statistical analysis showed that the two groups of test results were highly correlated, the correlation coefficient＞0.99, analysis of the double sample mean test two tailed test P=0.307, two group of comparison of the test results showed that there were no significant difference, P＞0.05, with no statistically significant. Conclusion ELISA method and the electrochemical luminescence method has high consistency on detecting AFP, which can provide guidance for clinical tumor diagnosis and treatment.

ELISA method; Electrochemical method; AFP tumor marker

R446.6

：B

：1671-8194（2014）31-0045-02