鹽脅迫下豌豆幼苗對內外源NO的生理生化響應

時振振，李勝＊，楊柯，馬紹英，劉會杰，張品南，楊曉明

（1.甘肅省干旱生境作物學重點實驗室 甘肅農業大學生命科學技術學院，甘肅 蘭州730070；2.甘肅省農業科學院作物研究所，甘肅 蘭州730070）

土壤鹽漬化也稱鹽堿化，是指土壤底層或地下水的鹽分隨毛管水上升到地表，當水分蒸發后，鹽分就積累在表層土壤中，對植物的生長發育造成脅迫。土壤鹽漬化已成為世界性的環境問題，嚴重威脅農業和畜牧業的生產。全球將近20%的耕地以及近半數的灌溉地都受到不同程度的鹽漬化影響［1－2］。中國鹽漬土面積約2億hm2，主要分布在東北濱海地區以及西北干旱半干旱地區［3－6］。鹽脅迫是影響植物生長的重要因子，也是影響作物產量的主要因素［7］。在鹽堿脅迫作用下，植物生長會受到抑制［8－10］，植物的光合過程受阻，產生過量活性氧，導致細胞內損傷，甚至死亡［11－13］。豌豆（Pisumsativum）屬豆科、豌豆屬，英文名Pea或Garden Field Pea，中文又名寒豆、畢豆、國豆、荷蘭豆等，是重要的豆科小雜糧作物［14］，中國是世界上第三大干豌豆生產國和第二大青豌豆生產國。近年來，豌豆因其適應性強、用途廣泛、營養價值高、經濟效益和種植效益好等優點被生產者和消費者越來越關注，種植面積也不斷擴大，主要分布在江蘇、浙江、湖北、甘肅、青海、內蒙古等20多個省（區、市）［15］。然而，我國西北地區淡水資源缺乏，土壤鹽漬化嚴重［16］，嚴重影響著豌豆產量和品質，所以探尋減緩豌豆生產中鹽脅迫的途徑是非常必要的。

一氧化氮（nitricoxide，NO）是一種最新發現且廣泛存在于植物細胞內和細胞間的信號分子，參與調節許多生理過程［17－18］。適量濃度的NO可以減輕鹽脅迫下植物幼苗生長的抑制作用［19］、維持鹽脅迫下細胞膜結構和功能的穩定性以及緩解植物葉片葉綠素的降解和氧化損傷［20－21］，還維持細胞滲透平衡和誘導植物細胞內多種抗氧化酶的活性［22］，從而提高植物的抗逆能力。王芳等［23］研究表明，外源NO對Cd脅迫下玉米（Zeamays）生長有一定的緩解作用，可以增強玉米幼苗對Cd毒害的抗性。張艷艷等［24］指出NO對鹽脅迫下玉米幼苗生長所受到的抑制具有緩解作用。張宋智等［25］研究表明，黃金樹（Catalpaspeciosa）種子在外源NO供體亞硝基鐵氰化鈉（SNP）浸種后萌發得到的幼苗耐鹽性較優。趙瀅等［26］研究表明，外源NO能顯著提升鹽脅迫下山葡萄（Vitis amurensis）葉片SOD和APX活性，減少 MDA的產生和積累，保護光合機構免受活性氧傷害，從而提高葉片葉綠素含量。謝英贊等［27］發現，在一定程度上緩解鹽脅迫對決明（Cassiaspectabilis）幼苗造成的傷害。劉建新等［28］研究表明，NO參與鹽脅迫下Pro積累的調控。雖然前人對NO已做較多的研究，但有關內外源NO對鹽脅迫下豌豆生長的調節效應及機理還鮮有報道。因此，本文以豌豆為試驗材料，研究內外源NO對鹽脅迫下豌豆生長的影響，以期揭示NO提高豌豆耐鹽的生理機制，為開展豌豆種質資源研究和確立豌豆鹽漬地優質高產穩產提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料與處理

試驗于2013年3－6月在甘肅農業大學植物細胞工程實驗室進行。供試豌豆品種為耐鹽性較弱的“隴豌一號”，由甘肅省農業科學院作物所提供。選取大小一致且無病蟲害、顆粒飽滿的豌豆種子，流水沖洗20min，1%的84消毒液消毒10min，無菌水沖洗4次，吸水紙吸干后播種于盛有滅過菌的蛭石培養缽中（直徑15cm），移至光照培養箱［光照12h/d，溫度（23±1）℃，空氣相對濕度80%，光通量密度400μmol/m2·s］進行發芽培養，每2 d澆灌一次1/2Hoagland營養液。待4、5片真葉展開后，挑選長勢一致的幼苗，開始以下澆灌處理（處理液的pH 均為7）：1）CK （1/2Hoagland 營養液）；2）NO （100μmol/L SNP）；3）NaCl（100mmol/L NaCl）；4）NaCl＋NO （100mmol/L NaCl＋100μmol/L SNP）；5）NaCl＋SF（100mmol/L NaCl＋100μmol/L亞鐵氰化鈉）；6）NaCl＋c－PTIO（100mmol/L NaCl＋100μmol/L 2－4－羧苯基四甲基咪唑烷－1－氧－3－氧化物）；7）NaCl＋c－PTIO＋NO （100mmol/L NaCl＋100μmol/L c－PTIO＋100μmol/L SNP）。每次每盆澆50mL，連續處理8d后取豌豆幼苗植株進行各項生理指標測定。

1.2 測定指標與方法

處理結束后，每處理隨機選取30株幼苗，分別測量胚根長和胚芽長（胚根、胚芽長采用精度0.1mm的游標卡尺直接測量），測定地上部和地下部干重（95℃殺青10min，65℃下烘至恒重并稱重），求平均值，根冠比通過根系干重/地上部干重計算。葉綠素含量測定采用丙酮乙醇混合法［29］；可溶性蛋白測定采用考馬斯亮藍G－250法［29］；可溶性糖含量測定采用蒽酮比色法［29］；超氧化物歧化酶（SOD）測定采用氮藍四唑（NBT）法［30］；過氧化物酶（POD）測定采用愈創木酚法［30］；過氧化氫酶（CAT）測定采用紫外分光光度法［30］。葉片質膜相對透性的測定采用電導儀法［30］。相對電導率＝R1/R2×100%，R1為處理后測得的電導率；R2為處理并煮沸后測得的總電導率；丙二醛（MDA）含量測定采用硫代巴比妥酸（TBA）顯色法［31］；脯氨酸（Pro）含量測定采用茚三酮顯色法［31］，每處理重復3次。

1.3 數據分析

用Excel 2003軟件處理數據和繪圖，SPSS 13.0軟件進行統計分析，用Duncan’s新復極差法進行差異顯著性檢驗（P＜0.05）。

2 結果與分析

2.1 鹽脅迫下豌豆幼苗生長對NO的響應

在幼苗生長過程中，胚根長和胚芽長是反映幼苗生長的關鍵指標。由表1可知，與對照CK相比，外源NO對豌豆幼苗胚芽和胚根生長無顯著影響，而鹽脅迫則顯著抑制了胚根和胚芽的生長。與NaCl處理相比，添加外源NO能顯著提高胚根長和胚芽長，NaCl＋NO處理使胚芽長增加25.34%，胚根長增加38.26%（P＜0.05），而NaCl＋c－PTIO＋NO處理較NaCl＋NO抑制了胚芽及胚根的伸長，說明外源NO能緩解鹽脅迫對二者的抑制作用。此外，鹽脅迫下用NO清除劑c－PTIO處理胚芽長顯著低于NaCl處理，這表明內源NO可能也參與鹽脅迫的緩解作用。

鹽脅迫和NO處理對豌豆幼苗的干重和根冠比也有顯著影響。與CK相比，添加外源NO對豌豆幼苗的干重和根冠比無明顯效應。NO能顯著增加鹽脅迫下豌豆地上部和地下部干重以及根冠比。NaCl處理明顯降低了豌豆幼苗的干重（P＜0.05），而NaCl＋c－PTIO＋NO處理使地上部干重高于NaCl處理但低于NaCl＋NO處理，但其地下部干重無明顯差異。說明外源NO能緩解鹽脅迫阻礙豌豆幼苗干重的增加。NaCl＋c－PTIO處理使干重顯著低于NaCl處理（P＜0.05），表明內源NO也參與了該緩解過程。同時，與NaCl處理相比，添加NO顯著增加了鹽脅迫下的根冠比。

表1 NO對鹽脅迫下豌豆幼苗胚芽和胚根長的影響Table 1 Effects of NO on length of germ and radical of pea seedling under salt stress

2.2 NO對鹽脅迫下豌豆幼苗葉綠素含量的影響

由圖1可以看出，與CK相比，添加外源NO對豌豆幼苗葉片的葉綠素含量沒有影響。NaCl處理顯著降低了葉綠素含量，添加外源NO能顯著提高鹽脅迫下豌豆幼苗葉片的葉綠素含量，NaCl＋c－PTIO＋NO處理下葉綠素含量顯著低于NaCl＋NO處理，NaCl＋NO處理較NaCl處理和NaCl＋c－PTIO＋NO處理下葉綠素含量分別增加了44.23%和19.68%（P＜0.05）。這說明外源 NO能緩解鹽脅迫對豌豆植株光合的抑制作用。NaCl處理與NaCl＋c－PTIO處理葉綠素含量無顯著差異，表明內源NO對豌豆植株光合作用無明顯調節作用。

圖1 NO對鹽脅迫下豌豆幼苗葉綠素含量的影響Fig.1 Effects of NO on chlorophyll content of pea seedling under salt stress

2.3 NO對鹽脅迫下豌豆幼苗可溶性蛋白含量、可溶性糖含量和Pro含量的影響

由圖2可以看出，非鹽脅迫下，添加NO對豌豆幼苗葉片中可溶性蛋白含量無明顯影響。NaCl處理使豌豆葉片中可溶性蛋白含量降低22.43%，鹽脅迫下添加外源NO可使豌豆幼苗葉片可溶性蛋白含量顯著增加。NaCl＋c－PTIO＋NO處理較NaCl脅迫對可溶性蛋白含量無明顯影響，說明外源NO參與可溶性蛋白合成的調節。而NaCl＋c－PTIO處理與NaCl處理下可溶性蛋白含量無顯著差異，表明內源NO對可溶性蛋白合成無明顯調節作用。

與CK相比，添加NO對豌豆幼苗葉片中可溶性糖含量無明顯影響。NaCl脅迫下可溶性糖含量降低25.43%（P＜0.05），添加外源NO可使鹽脅迫下豌豆幼苗葉片中可溶性糖含量顯著增加（P＜0.05）。NaCl＋c－PTIO＋NO處理較NaCl脅迫對可溶性糖含量無明顯影響，說明外源NO參與可溶性糖合成的調節。NaCl＋c－PTIO處理時可溶性糖的含量急劇下降，與NaCl處理差異顯著且添加NO能逆轉鹽脅迫下c－PTIO對豌豆葉片可溶性糖含量的影響，表明內源NO參與可溶性糖含量的調節。

外源NO處理與CK相比，豌豆幼苗葉片脯氨酸含量無顯著變化。NaCl處理明顯提高了豌豆葉片的脯氨酸含量（P＜0.05），NaCl＋NO處理也明顯提高了鹽脅迫時豌豆葉片的脯氨酸含量（P＜0.05），且比NaCl處理高23.63%，而NaCl＋c－PTIO＋NO處理下脯氨酸含量顯著低于NaCl＋NO處理。由此說明外源NO促進了鹽脅迫下豌豆葉片脯氨酸的合成。NaCl＋c－PTIO處理下脯氨酸含量與NaCl處理無顯著差異，表明內源NO對脯氨酸的合成無明顯調控作用。

圖2 NO對鹽脅迫下豌豆幼苗可溶性蛋白（A）含量、可溶性糖（B）含量和Pro（C）含量的影響Fig.2 Effects of NO on soluble protein（A）content，soluble sugar（B）content and Pro（C）content of pea seedling under salt stress

2.4 NO對鹽脅迫下豌豆幼苗SOD、POD、CAT活性的影響

由表2可看出，與CK相比，NO處理下豌豆葉片中SOD活性無明顯變化。NaCl處理下，豌豆幼苗葉片中SOD活性明顯低于對照CK（P＜0.05），NaCl＋NO處理則明顯增加了鹽脅迫下豌豆幼苗葉片SOD活性（P＜0.05），而NaCl＋c－PTIO＋NO處理下SOD活性則顯著低于NaCl＋NO，說明外源NO提高了鹽脅迫下豌豆幼苗葉片SOD的活性。NaCl＋c－PTIO處理加劇了鹽脅迫對SOD活性的抑制，說明內源NO也參與SOD活性的調節。NO處理和NaCl脅迫均使豌豆幼苗POD活性低于CK。與NaCl處理相比，NaCl＋NO處理使得POD活性顯著增加，而NaCl＋c－PTIO＋NO處理下POD活性與NaCl處理無顯著差異，表明外源NO提高了鹽脅迫下豌豆幼苗葉片中POD的活性。NaCl＋c－PTIO處理與NaCl處理下POD活性無顯著差異，表明內源NO對豌豆幼苗葉片中POD活性無明顯調節作用。NO處理對豌豆幼苗葉片中CAT活性較CK無明顯效應。在NaCl處理下，豌豆幼苗葉片CAT的活性明顯降低（P＜0.05），NaCl＋NO處理使CAT活性明顯增高。NaCl＋c－PTIO＋NO處理下CAT活性顯著低于NaCl＋NO處理，說明外源NO增加了鹽脅迫下豌豆幼苗葉片的CAT活性。NaCl＋c－PTIO處理下CAT活性顯著低于NaCl處理，表明內源NO也參與了鹽脅迫下豌豆幼苗葉片中CAT活性的調控。

表2 NO對鹽脅迫下豌豆幼苗SOD、POD、CAT活性的影響Table 2 Effects of NO on the activity of SOD，POD and CAT of pea seedling under salt stress

2.5 外源NO對鹽脅迫下豌豆幼苗葉片質膜相對透性和丙二醛含量的影響

由圖3A可知，NO處理下豌豆幼苗葉片質膜相對透性與CK無顯著差異。NaCl脅迫使質膜相對透性增大，且明顯高于CK（P＜0.05），NaCl＋NO處理較NaCl脅迫使豌豆葉片的質膜相對透性降低，降低了32.62%（P＜0.05），NaCl＋c－PTIO＋NO處理下質膜相對透性顯著低于NaCl＋NO處理，說明外源NO能緩解鹽脅迫下豌豆幼苗葉片質膜的相對透性。而NaCl處理與NaCl＋c－PTIO相比，質膜相對透性無顯著差異，表明內源NO對豌豆幼苗葉片質膜相對透性無明顯調控作用。從圖3B可以看出，NO處理下豌豆葉片MDA含量與CK差異不顯著。NaCl處理下，豌豆幼苗葉片的MDA含量顯著高于CK（P＜0.05）。而NaCl＋NO處理可以明顯降低鹽脅迫下豌豆葉片MDA的含量（P＜0.05），并且NaCl＋NO處理下MDA含量顯著低于NaCl＋c－PTIO＋NO，說明外源NO可以緩解鹽脅迫造成的豌豆幼苗葉片中MDA含量的增加。NaCl＋c－PTIO處理促進了鹽脅迫下MDA含量的增加，表明內源NO也參與鹽脅迫下豌豆葉片中MDA合成的調控。

圖3 不同處理下豌豆幼苗葉片質膜相對透性（A）和MDA（B）含量的變化Fig.3 The membrane relative permeability and MDA content of pea seedlings leaves with different treatments

3 討論

鹽脅迫能對幼苗生長產生一定抑制作用，破壞細胞膜的完整性、影響有關物質的積累，改變某些酶的功能［32］。而外源NO能作為一種信號分子促進胚芽和胚根生長，增加生物量，減少非生物脅迫下植物體內ROS的積累，緩解各種脅迫造成的氧化損傷，從而增強植物的適應能力［33］。

1）鹽脅迫下，植物的生長及生理指標會受到一定的影響。實驗表明，外源NO供體SNP能顯著促進鹽脅迫下豌豆種子胚根和胚芽生長，增加幼苗干物質積累以及根冠比，并且顯著增加了豌豆葉片葉綠素含量，表明外源NO有助于維持豌豆葉片的葉綠素含量，提高了葉片細胞的滲透調節能力和耐鹽能力，蔣明義等［34］證實滲透脅迫下葉綠素的降解主要由活性氧的氧化損傷引起，所以NO消除了大量的活性氧，從而緩解了鹽脅迫帶來的氧化損傷，促進了葉綠素的合成。

2）植物通過可溶性蛋白和可溶性糖的積累來維持細胞的滲透平衡，從而緩解鹽離子的毒害作用［35］。本試驗中，鹽脅迫顯著降低了豌豆幼苗葉片中可溶性蛋白和可溶性糖含量，添加外源NO能使可溶性蛋白和可溶性糖含量顯著升高。脯氨酸積累是植物對逆境脅迫的一種重要的防護機制，脯氨酸不僅作為滲透調節物質，還包括在清除ROS，提高抗氧化能力，穩定大分子結構，降低細胞酸性以及解除氨毒等方面起重要作用［36］。本研究表明，NO處理可明顯提高NaCl脅迫下豌豆幼苗葉片的脯氨酸含量，這和吳雪霞等［37］的結論一致。這表明外源NO緩解了鹽脅迫對豌豆幼苗的抑制作用。

3）逆境脅迫下，植物體內產生大量活性氧（ROS），對植物造成傷害，SOD是清除生物體內O2－·的唯一酶類，POD和CAT是植物體內H2O2的清除酶。SOD、POD、CAT等保護酶類在植物體內協同作用，在逆境脅迫中清除過量的ROS，維持ROS的代謝平衡，保護膜結構，從而使植物在一定程度上忍耐、減緩或抵御逆境脅迫傷害［38］。最近研究發現，NO作為一種信號分子對植物逆境生理起重要作用，主要與其對ROS代謝的調節有關，外源NO可以誘導植物細胞內多種抗氧化酶類的活性，從而提高植物的抗逆能力［39］。本研究發現，0.1mmol/L SNP可不同程度地提高鹽脅迫下豌豆葉片SOD、POD、CAT的活性，這與焦娟等［40］和郁繼華等［41］報道結論一致。但NO對鹽脅迫下豌豆葉片3種保護酶的誘導效果并不相同，這可能與鹽脅迫下SOD、POD和CAT在膜脂過氧化途徑中產生的位置以及NO對3種保護酶活性的調節機制不完全相同有關［42－43］。

4）細胞膜是受逆境脅迫最敏感的部位之一，鹽脅迫會對細胞膜造成膜脂過氧化傷害，并使膜的透性增大，導致膜內物質向外滲漏，并最終引起細胞死亡，而MDA是膜脂過氧化的指標。本研究結果表明，外源NO供體SNP處理明顯降低了NaCl脅迫下豌豆幼苗葉片的質膜相對透性，同時明顯降低葉片中MDA的含量，這與肖強和鄭海雷［44］的結論一致。從而證實了外源NO可以緩解鹽脅迫造成的豌豆幼苗葉片的膜脂過氧化，對細胞膜具有保護和修復作用，可減輕或防止膜系統的過氧化傷害，這與蘆翔等［45］的研究結果一致。

5）亞鐵氰化鈉是SNP的類似物，在生物體中分解后除不產生NO外，其他產物與SNP相同，結果表明：鹽脅迫下用亞鐵氰化鈉處理豌豆幼苗對胚芽和胚根生長、干物質積累、葉綠素含量、可溶性蛋白和可溶性糖含量、抗氧化酶活性（SOD、POD、CAT）與NaCl脅迫均無明顯差異，說明緩解鹽脅迫對植物生長抑制發揮作用的是NO，這與郁繼華等［41］、周萬海等［46］、樊懷福等［47］的研究結果相同。用NO清除劑c－PTIO處理加劇了鹽脅迫對豌豆幼苗生長的抑制，如胚芽干重、SOD活性、CAT活性、可溶性糖含量均降低，MDA含量增高。

4 結論

內外源NO均能緩解鹽脅迫對豌豆幼苗生長的抑制。非鹽脅迫下，外源NO對豌豆胚芽和胚根生長、幼苗干重以及葉片中葉綠素含量、可溶性蛋白和可溶性糖含量、MDA和Pro含量、SOD和CAT的活性及質膜相對透性均無顯著影響。NaCl脅迫下，施加外源NO促進了胚芽、胚根的生長并增加了幼苗干重、根冠比和葉綠素的含量；顯著降低了豌豆幼苗葉片中膜脂過氧化產物MDA的含量，維持鹽脅迫下細胞膜結構和功能的穩定，增加了豌豆幼苗葉片中Pro含量以提高細胞內滲透調節物質的含量和組織持水能力，來緩解鹽脅迫對豌豆幼苗的傷害。此外外源NO通過可溶性蛋白和可溶性糖的累積來協調細胞與外界的滲透平衡，從而緩解鹽離子的毒害。內源NO對鹽脅迫下豌豆幼苗生長也有一定的調控作用，如胚芽生長和干重的調節，可溶性糖、膜脂過氧化產物MDA含量的調節以及SOD、CAT活性的調節。

［1］ Zhu J K.Plant salt tolerance［J］.Trends in Plant Science，2001，6（2）：66－71.

［2］ 趙可夫.作物抗鹽生理［M］.北京：農業出版社，1990：249－313.

［3］ 馬獻發，張繼舟，宋鳳斌.植物耐鹽的生理生態適應性研究進展［J］.科技導報，2011，29（14）：76－79.

［4］ 景艷霞，袁慶華.NaCl脅迫對苜蓿幼苗生長及不同器官中鹽離子分布的影響［J］.草業學報，2011，20（2）：134－139.

［5］ 張永鋒，梁正偉，隋麗，等.鹽堿脅迫對苗期紫花苜蓿生理特性的影響［J］.草業學報，2009，18（4）：230－235.

［6］ 王遵親.中國鹽漬土［M］.北京：科學出版社，1993.

［7］ Toshio Yamaguchi，Eduardo Blumwald.Developing salt tolerant crop plants：challenges and opportunities［J］.Trends in Plant Science，2005，10（12）：616－620.

［8］ 秦峰梅，張紅香，武祎，等.鹽脅迫對黃花苜蓿發芽及幼苗生長的影響［J］.草業學報，2010，19（4）：71－78.

［9］ 劉愛榮，張遠兵，鐘澤華，等.鹽脅迫對彩葉草生長和滲透調節物質積累的影響［J］.草業學報，2013，22（2）：211－218.

［10］ 劉晶，才華，劉瑩，等.兩種紫花苜蓿苗期耐鹽生理特性的初步研究及其耐鹽性比較［J］.草業學報，2013，22（2）：250－256.

［11］ Zhang J L，Flowers T J，Wang S M.Mechanisms of sodium uptake by roots of higher plant［J］.Plant and Soil，2010，326（1）：45－60.

［12］ Zhang J L，Shi H Z.Physiological and molecular mechanisms of plant salt tolerance［J］.Photosynthesis Research，2013，115（1）：1－22.

［13］ 鄒麗娜，周志宇，顏淑云，等.鹽分脅迫對紫穗槐幼苗生理生化特性的影響［J］.草業學報，2011，20（3）：84－90.

［14］ 鄭卓杰，王述民，宗緒曉.中國食用豆類學［M］.北京：中國農業出版社，1997.

［15］ 宗緒曉，王志剛，關建平，等.豌豆種資源描述規范和數據標準［M］.北京：中國農業出版社，2005.

［16］ 渠曉霞，黃振英.鹽生植物種子萌發對環境的適應對策［J］.生態學報，2005，25（9）：2389－2398.

［17］ Lamattina L，Garca M C，Graziano M，etal.Nitricoxide：the versatility of an extensive signal molecule［J］.Annual Review of Plant Biology，2003，54：109－136.

［18］ Beligni M V，Lamattina L.Nitricoxide counteracts cytotoxic processes mediated by reactive oxygen species in plant tissues［J］.Planta，1999，208：337－344.

［19］ Zhao M G，Tian Q Y，Zhang W H.Nitric oxide synthase dependent nitric oxide productions associated with salt tolerance inArabidopsis［J］.Plant Physiology，2007，144（1）：206－217.

［20］ 王憲葉，沈文飚，徐朗萊.外源一氧化氮對滲透脅迫下小麥幼苗葉片膜脂過氧化的緩解作用［J］.植物生理與分子生物學學報，2004，30（2）：195－200.

［21］ Akio U，Andre T J，Takashi H，etal.Effects of hydrogen peroxide and nitric oxide on both salt and heat stress tolerance in rice［J］.Plant Science，2002，163（3）：515－523.

［22］ 雍山玉.外源一氧化氮對鹽脅迫下辣椒種子萌發和幼苗生理特性的影響［D］.蘭州：甘肅農業大學，2007.

［23］ 王芳，常盼盼，陳永平，等.外源NO對鎘脅迫下玉米幼苗生長和生理特性的影響［J］.草業學報，2013，22（2）：178－186.

［24］ 張艷艷，劉俊，劉友良.一氧化氮緩解鹽脅迫對玉米生長的抑制作用［J］.植物生理與分子生物學學報，2004，30（4）：455－459.

［25］ 張宋智，李平英，王軍輝，等.外源NO供體SNP浸種對鹽脅迫下黃金樹幼苗生長的影響［J］.種子，2013，32（7）：22－24.

［26］ 趙瀅，艾軍，王振興，等.外源NO對NaCl脅迫下山葡萄葉片葉綠素熒光和抗氧化酶活性的影響［J］.核農學報，2013，27（6）：867－872.

［27］ 謝英贊，何平，王朝英，等.外源Ca2＋，SA，NO對鹽脅迫下決明幼苗生理特性的影響［J］.西南大學學報，2013，35（3）：36－42.

［28］ 劉建新，胡浩斌，王鑫，等.一氧化氮參與鹽脅迫下黑麥草幼苗脯氨酸積累的調控［J］.草地學報，2010，18（6）：787－791.

［29］ 李合生，孫群，趙世杰，等.植物生理生化實驗原理和技術［M］.北京：高等教育出版社，2000：164－169，260.

［30］ 牛俊義，楊祈峰.作物栽培學研究方法［M］.蘭州：甘肅民族出版社，1998：85－88.

［31］ 張志良，瞿偉菁.植物生理學指導［M］.北京：高等教育出版社，2003.

［32］ Bohra J S，Drffling H，Drffling K.Salinity tolerance of rice with reference to endogenous and exogenous abscisic acid［J］.Journal of Agronomy and Crop Science，1995，174：79－86.

［33］ 王鳳華，陳雙臣，李春花，等.外源一氧化氮供體SNP對鹽脅迫下甘藍種子萌發的影響［J］.種子，2010，29（2）：9－12.

［34］ 蔣明義，楊文英，徐江，等.滲透脅迫下水稻幼苗中葉綠素降解的活性氧損傷作用［J］.植物學報，1994，36（4）：289－295.

［35］ 李文一，徐衛紅，胡小鳳，等.Zn脅迫對黑麥草幼苗生長、生理生化及Zn吸收的影響［J］.農業工程學報，2007，23（5）：190－194.

［36］ 阮海華，沈文飚，葉茂炳，等.一氧化氮對鹽脅迫下小麥葉片的氧化損傷的保護效應［J］.科學通報，2001，46（23）：1993－1997.

［37］ 吳雪霞，朱月林，朱為民，等.外源一氧化氮對NaCl脅迫下番茄幼苗葉片氧化損傷的保護效應［J］.中國農業科學，2006，39（3）：575－581.

［38］ 張義凱，崔秀敏，楊守祥，等.外源NO對鎘脅迫下番茄活性氧代謝及光合特性的影響［J］.應用生態學報，2010，21（6）：1432－1438.

［39］ 朱曉軍，梁永超，楊勁松，等.鈣對鹽脅迫下水稻幼苗抗氧化酶活性和膜脂過氧化作用的影響［J］.土壤學報，2005，42（3）：453－458.

［40］ 焦娟，王秀峰，楊鳳娟，等.外源一氧化氮對硝酸鹽脅迫下黃瓜幼苗生長及抗氧化酶活性的影響［J］.應用生態學報，2009，20（12）：3009－3012.

［41］ 郁繼華，雍山玉，張潔寶，等.外源NO對NaCl脅迫下辣椒幼苗氧化損傷的保護效應［J］.西北植物學報，2007，27（9）：1801－1806.

［42］ 馮瑞章，魏琴.外源NO對NaCl脅迫下燕麥幼苗氧化損傷的緩解效應［J］.草原與草坪，2012，32（6）：7－10.

［43］ 吳雪霞，陳建林，查丁石，等.外源一氧化氮對NaCl脅迫下番茄幼苗活性氧代謝的影響［J］.植物營養與肥料學報，2009，15（2）：422－428.

［44］ 肖強，鄭海雷.一氧化氮與植物脅迫響應［J］.植物生理學通訊，2004，40（3）：379－384.

［45］ 蘆翔，石衛東，王宜倫，等.外源NO對NaCl脅迫下燕麥幼苗抗氧化酶活性和生長的影響［J］.草業科學，2011，28（12）：2150－2156.

［46］ 周萬海，師尚禮，寇江濤.一氧化氮對NaCl脅迫下苜蓿種子萌發的影響［J］.核農學報，2012，26（4）：710－716.

［47］ 樊懷福，郭世榮，段九菊，等.外源NO對NaCl脅迫下黃瓜幼苗生長和谷胱甘肽抗氧化酶系統的影響［J］.生態學報，2008，28（6）：2511－2517.