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連錢草水提物抗炎鎮痛實驗研究*

2014-03-27 07:05:52鄒佳峻費士杰
云南中醫中藥雜志 2014年2期
關鍵詞:小鼠劑量

何 平, 鄒佳峻, 費士杰

(右江民族醫學院, 廣西 百色 533000)

連錢草為唇形科多年生草本植物活血丹[Glechoma10ngituba(Nakai)Kupr.]的干燥地上部分,利濕通淋,清熱解毒,散瘀消腫之功效,用于黃疸型肝炎、腮腺炎、膽囊炎、膽石癥、疳積、腎結石、膀胱結實、多發性膿瘍、瘡癰腫痛、嬰兒濕疹、跌打損傷、瘧疾、產后驚風、腹痛、鵝掌風、牙痛等癥[1]。連錢草主要含有揮發油類、萜類、黃酮類、甾體類、有機酸類和生物堿類等活性成分,有著廣泛的藥理活性[2]。本實驗應用角叉菜膠致大鼠足趾腫脹法和棉球致大鼠肉芽腫法觀察連錢草水提物的抗炎作用;小鼠熱板法和小鼠醋酸扭體法觀察連錢草水提物的鎮痛作用。為進一步研究開發連錢草藥材提供藥理學依據。

1 材料

1.1 藥物和試劑 連錢草水提物,本單位自制;阿司匹林片(批號:20070215,桂林漓江制藥廠);羅通定片(廣州康和藥業有限公司,批號:080901);角叉菜膠(遼寧省藥物研究所)。

1.2 動物 昆明種小鼠,Wistar大鼠,均由廣西醫科大學實驗動物中心提供,動物合格證號:SCXK桂2003-2003。

1.3 主要儀器 GJ-8402熱板測痛儀,浙江寧海白石電子醫療儀器廠;JA1003型上皿電子天平,上海精科天平廠;SKP.01電熱恒溫培養箱,湖北黃石市醫療器械廠。

2 試驗方法

2.1 抗炎作用[3]

2.2.1 對角叉菜膠所致大鼠足腫的影響 取正常健康大鼠60只,雌雄各半,體重250~300 g。隨機分為6組,每組10只,即對照組,模型組,阿司匹林組(30 mg/kg),連錢草水提物(8、4、2 g/kg)3個劑量組。灌胃給藥體積均為0.2 mL/100 g,對照組給予等體積蒸餾水。連續灌胃給藥9 d,末次給藥后1 h,用1%角叉菜膠生理鹽水液每只0.1 mL左后足跖皮下注射,用千分卡尺測量致炎前和致炎后1、2、3、5、7 h足跖厚度,計算致炎后不同時間腫脹值。

2.2.2 對大鼠棉球肉芽組織增生的影響 取正常健康大鼠50只,雌雄各半,體重250~300 g。隨機分為5組,每組10只,即對照組,阿司匹林組(30 mg/kg),連錢草水提物(8、4、2 g/kg)3個劑量組。腹腔注射戊巴比妥鈉30 mg/kg麻醉,剪去大鼠蹊部鼠毛,用碘酒消毒,75%酒精棉脫碘后,切一1.0 cm長切口,用眼科鑷子將20 mg的高壓滅菌棉球從切口處植入皮下,隨即縫合皮膚。從手術當日開始,連續灌胃給藥7 d,灌胃給藥體積均為0.2 mL/100 g體重,模型對照組給予等體積蒸餾水。末次給藥后24 h,打開切口,將棉球連同周圍結締組織一起取出,剔除脂肪組織,在70℃烘箱中恒溫干燥48 h后,應用分析天平稱重,將稱得的重量減去棉球重量(20 mg),即得肉芽腫重量。

2.2 鎮痛作用[3]

2.2.1 小鼠熱板法 將50只預先經篩選的雌性小鼠(除去反應過敏<5 s 及遲鈍>30 s 的小鼠)隨機分5 組,即對照組(等體積蒸餾水),陽性藥羅通定組(30 mg/kg),連錢草水提物大中小劑量組(8、4、2 g/kg)。先測出各組小鼠給藥前的痛閾值后,分別灌胃給蒸餾水,羅通定及連錢草水提物,測30、60 、90、120 min 痛閾值。

2.2.2 小鼠扭體法 取昆明種小白鼠50只,雌雄各半,隨機分為5組,每組10只。分組、給藥同2.2.1。連續灌胃給藥7 d,末次給藥后1 h,各鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只,5min后計數15 min內各鼠出現的扭體反應次數。

3 實驗結果

3.2 抗炎作用

3.2.1 對角叉菜膠所致大鼠足腫的影響 和對照組比較,模型對照組致炎后足趾腫脹率顯著增高,提示模型復制成功。和模型組比較,連錢草水提物8 g/kg劑量組在致炎后1、2 、3、5 h,4 g/kg劑量在組致炎后2 h,可顯著降低大鼠對角叉菜膠所致足趾腫脹率(P<0.01,P<0.05),結果見表1。

表1 連錢草水提物對角叉菜膠所致大鼠足腫的影響

注:與對照組比較,*P<0.05,**P<0.01。

3.2.2 對大鼠棉球肉芽組織增生的影響 和對照組比較,連錢草水提物8、4 g/kg劑量組可明顯抑制大鼠棉球肉芽組織干重(P<0.05),結果見表4。

表4 連錢草水提物對大鼠棉球肉芽組織增生的影響

注:與對照組比較,*P<0.05,**P<0.01。

3.3 鎮痛作用

3.3.1 對醋酸所致小鼠扭體實驗的影響 和對照組比較,連錢草水提物8 g/kg劑量對小鼠扭體次數明顯少于對照組,差異有顯著性意義(P<0.01)。結果見表3。

表3 連錢草水提物對醋酸所致小鼠扭體實驗的影響

注:與對照組比較,*P<0.05,**P<0.01。

3.3.2 對小鼠熱板痛閾的影響 和對照組比較,連錢草水提物8 g/kg劑量對小鼠在藥后60 min、90min,4 g/kg劑量組在藥后60 min,可顯著延長小鼠熱板痛閾,(P<0.01,P<0.05)。結果見表4。

表4 連錢草水提物對小鼠熱板痛閾的影響

注:與對照組比較,*P<0.05,**P<0.01。

4 討論

炎癥是一種防御反應,表現為紅、腫、熱、痛和功能障礙。在炎癥過程中,一方面損傷因子直接或間接造成組織和細胞的破壞,另一方面通過炎癥充血和滲出反應,以稀釋、殺傷和包圍損傷因子,同時通過實質和間質細胞的再生使受損的組織得以修復和愈合,炎癥是損傷和抗損傷的統一過程。在有些情況下,炎癥是潛在有害,炎癥反應是一些疾病的發病基礎,如嚴重的超敏反應炎癥過于劇烈時可以威脅病人的生命。目前,臨床上使用的抗炎藥物分甾體抗炎藥和非甾體抗炎藥,臨床效果顯著,但是存在著嚴重的不良反應而限制其在臨床上的使用。某些中藥或中藥的復方試劑具有良好的抗炎作用,且具有高效低毒的特點[4-6]。

實驗結果表明,連錢草水提物能顯著抑制角叉菜膠致大鼠足趾腫脹率和大鼠棉球肉芽組織重量,能顯著減少醋酸引起的小鼠扭體反應次數和延長小鼠熱板痛閾值具有顯著的抗炎和鎮痛作用。其詳實作用的分子機制,還有待進一步研究。

參考文獻:

[1]國家中醫藥管理局,中華本草[M]上海:上海科技出版社,1999.6058.

[2]張前軍,楊小生,朱海燕,等.活血丹屬植物的化學成分及藥理研究進展[J].中草藥,2006,37(6):950-952.

[3]李儀奎.中藥藥理實驗方法[M].上海:上海科學技術出版社,2006,764-771.

[4]韋桂寧,劉智生,周 軍,等.炎見寧片抗菌、抗炎及鎮痛作用的實驗研究[J].2009,31(12):1873-1875.

[5]楊玉琪,倪凱,王曙光,等.復方抗炎膠囊的抗菌抗炎藥效作用試驗研究[J].云南中醫中藥雜志,2009,30(9):51-52.

[6]付雪嬌,鄒坤,王桂萍,等.吉祥草乙酸乙酯提取物抗炎作用及機制研究[J].時珍國醫國藥.2013,24(4):822-825.

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