不同外植體激素對引鳥花楸組培繁育的影響

王喆,盧正茂

(1.遼寧省林業基金管理總站,遼寧 沈陽110036;2.遼寧省森林經營研究所,遼寧 丹東118002)

引鳥花楸(Sorbus aucuparia),亦稱歐洲花楸,薔薇科(Rosaceae)花楸屬(Sorbus)喬木,高可達5 m,廣散分布于北溫帶,因果形美觀而栽作觀賞植物,是最常見的栽培品種之一。[1]由于近幾年花楸市場供不應求,繁殖手段多樣導致市場苗木質量差別很大,組培是一種無性繁殖的生物技術,能較好地保持原種的優良經濟性,繁殖系數高,便于工廠化生產和集約化經營[2]。近年來在園林和花卉產業等領域得到了廣泛的應用,并收到了巨大的經濟效益和社會效益。為提高引鳥花楸育苗質量和速度,本文著重對花楸組培中不同外植體的分化情況、污染情況進行逐一論述,并對不同培養基中瓶苗的生長狀況進行調查,為以后的生產提供借鑒。

1　試驗材料

試驗外植體于2008年12月中旬采自遼寧省本溪縣偏嶺鎮新農村(123°57′E,41°24′N)多年生引鳥花楸成熟母樹,取回后直接洗凈樹干,貯藏于室內水培1個月,嫩枝在自來水下沖洗2 h,無菌操作臺內用0.1%的HgCl溶液消毒8 min,用無菌水漂洗5次,取出外植體直接接種于MS和WPM啟動培養基中,培養30 d后便已萌出新鮮生長點,這時進行轉瓶繁殖,在已形成完整植株的情況下選出達到下述各要求的外植體進行試驗：(1)具3片淡綠色葉片,1支主脈;(2)基部沒有愈傷組織形成;(3)生長體長度均為0.1～0.5 cm。本次試驗每瓶均放置2個外植體,每個處理接種10瓶且培養4個周期。

2　試驗方法

2.1　生長素和分裂素濃度調試

各外植體接種完成后帶到培養室觀察,包括外植體顏色、長、寬、愈傷組織質量等。培養基的處理按在 MS培養基中分別添BA0.1、0.2、0.3、0.4、0.5和 KT0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg L-1[3],編號A1～A50,B1～B50共100個處理。處理用的白糖濃度均為20 mg L-1,p H值5.8,光照為1 600 lx,溫度為20℃的環境培養,培養時間設置為21 d,相對濕度70%～80%,空調房育苗,精心管護。

2.2　不同外植體培養設計

設置的不同外植體均來自同一株母樹的不同位置材料,分別采腋芽、頂芽、嫩枝和葉片,設置MS+BA0.5培養基,p H值5.8,砂糖濃度20 mg L-1,瓊脂8 g L-1,乙烯膜封口,溫度為20℃的環境培養。

2.3　數據處理

試驗數據利用Excel2003進行數據歸集處理：

分化率=(誘導出的叢生芽數/接種外植體總數)×100%

污染(褐化)苗發生率=污染(褐化)發生苗/該外植體誘導出的不定芽總數×100%

3　結果與分析

3.1　啟動培養基不同繁殖速度不同

本試驗中分別設置MS和WPM培養基為基本培養基,培養過程中發現WPM培養基的萌發速度和MS培養基要相差8 d左右,得到的分化芽統計表明,MS和WPM幾乎沒有差別,培養基中大量元素的分量對引鳥花楸的組織還是有影響的。所以從繁殖效率的角度考慮,生產中用MS作為啟動培養基有利于提高生產率。

3.2　不同的培養材料結果不同

組織培養過程中以MS+BA0.5培養基為基質,設置了4種不同位置的培養外植體,分別觀察瓶苗的分化率、分化周期、污染率和褐化率,每個周期培養25 d,4個周期后調查結果如表1。

表1　不同培養材料的培養結果

由表1可見：分化率最好的是頂芽,其次是腋芽、嫩枝和葉片;分化周期最短的是腋芽,但各部位的外植體經過啟動后,其生長速率幾乎差不多,只是平均分化周期中啟動時間長短不一而已;污染率最低的是頂芽;褐化率最高的是嫩枝[4]。

3.3　不同外源激素對花楸組培苗的影響

花楸組培苗在添加不同激素以后的生長表現如表2。MS培養基在添加BA和ZT后的生長表現各有不同,如添加BA0.1以后的分化率為67%,在添加0.2～0.3以后的分化率在逐次下降,試驗證明BA0.5的分化率最高,達到90%;而添加ZT培養基的生長表現不如BA好,證明只有添加最適濃度的培養基其生長狀態才能達到最佳。

表2　不同外源激素瓶苗的生長表現

4　結論與討論

4.1引鳥花楸的組織培養,最適合的啟動培養基為MS培養基,WPM培養基的萌分速度和MS培養基要相差8 d左右,培養基中大量元素的分量對引鳥花楸的組織還是有影響的。所以從繁殖效率的角度考慮,生產中用MS作為啟動培養基有利于提高生產率。

4.2不同位置的培養外植體,分化率最好的是頂芽,其次是腋芽、嫩枝和葉片;分化周期最短的是腋芽,但各部位的外植體經過啟動后,其生長速率幾乎差不多,只是平均分化周期中啟動時間長短不一而已;污染率最低的是頂芽;褐化率最高的是嫩枝。生產中采用頂芽有利于提高生產率。

4.3不同外源激素對花楸組培苗有不同的影響,實驗證明,花楸組培苗在MS培養基上以添加BA,BA0.5的分化率最高,達到90%,而添加ZT培養基的生長表現不如BA好,證明只有添加最適濃度的培養基其生長狀態才能達到最佳。

參考文獻：

[1]余治家,于澎濤,王緒芳,等.多用途樹種歐洲花楸及其引種[J].中國城市林業,2007,5(6)：56-58

[2]劉瑋,李長海,莊倩,等.歐洲花楸引種及生物學特性[J].東北林業大學學報,2007,35(2)29-30

[3]高曄華,郭朋偉,吳榮哲.黑果腺肋花楸組培苗增殖的初步研究[J].北方園藝,2012(17)：119-121

[4]趙春莉,李金英.植物組織培養中污染原因及其控制方法[J].吉林農業科學,2010,35(6)：11-13