趙永玉 崔倡林 (山東省萊州市文昌獸醫站 261400)
2014年5月,山東省萊州市虎頭崖鎮一獺兔飼養戶,引進160只3月齡獺兔,爆發了以排膠凍樣和水樣糞便,腹部發黑,結膜蒼白,消瘦和痙攣死亡為特征的疾病,根據觀場調查,臨床診斷、剖解、實驗室診斷,確診為大腸桿菌與球蟲感染,將情況報告如下:
該兔場由于引種前準備不充分,兔子飼養在三層水泥制板的老兔舍,由于底板縫隙小,而且縫隙僅中央部分有,大部分兔子糞便都在兔窩角落。每窩飼養2~3只,兔體被毛污濁,地面潮濕,兔舍窗小,通風不好,整個兔舍糞尿味刺鼻。據畜主講,剛引進來10d時,兔群并無異常,正準備遷到新建兔舍,就有20只兔子死亡,雖然服了一些藥物,但病情繼續發展。
病兔體溫正常或低于正常體溫,精神沉郁,被毛粗亂,脫水,消瘦,貧血,腹部膨脹發黑,劇烈腹瀉,肛門和后肢的被毛附著一些粘液或稀糞,常帶有大量明膠樣和一些兩頭尖的干糞。病兔四肢發冷,經常磨牙,流涎。病程長短不一,有的不見任何癥狀很快死亡;有的死亡時突然側身倒地,肌肉痙攣,頭后仰,發出慘叫,迅速死亡;病程稍長的由于脫水、消瘦、貧血,最后衰竭死亡。
對病死的13只兔進行了剖檢,發現大部分腸黏膜發炎,有的有出血點或淡黃色的結節。胃膨脹,胃黏膜發炎,充滿多量液體和氣體;十二指腸充滿染有膽汁的粘液狀的液體;空腸擴張,內有半透明膠水樣液體;回腸內容物呈現粘液膠水樣液體,糞球細長,兩頭尖,外面包有粘稠液或灰白色膠凍樣分泌物;結腸擴張,有透明膠樣粘液;直腸有大量的膠凍樣液體,黏膜與漿膜充血,有出血斑點;大部分病例盲腸尤其是蚓突有大量淡黃色的結節。部分病例膽囊脹大,肝臟、心臟有小點壞死灶。膀胱積有黃色混濁尿液,膀胱黏膜脫落。
(1)涂片鏡檢用病死兔肝臟、心血、結腸內容物,分別涂片,革蘭氏染色鏡檢,鏡下發現有單個或呈短鏈狀排列,兩端鈍圓的短桿菌,無莢膜和芽孢,有鞭毛,有運動性,革蘭氏陰性。剪開盲腸,在結節性病灶處刮取少量腸黏膜,置于載玻片上,滴加一滴甘油飽和鹽水,調和均勻,加上蓋玻片,進行鏡檢,發現有許多艾美球蟲卵囊存在。(2)分離培養。用接種環無菌粘取或鉤取新鮮病死兔的肝臟、心血、結腸內容物,用劃線法接種于普通瓊脂平板培養基上,37℃恒溫箱中培養24h,挑選單個圓形、微隆起、濕潤半透明的灰白色的小菌落 進行純培養。將挑選的菌落分別接種到普通瓊脂培養基和肉湯培養基上,37℃恒溫箱中再培養24h,得到純培養物。普通瓊脂培養基上長出圓形、微隆起、濕潤半透明的灰白色的菌落;肉湯培養基生長豐盛,肉湯變得異常混濁并形成淡灰色沉淀。將得到的純培養物抹片革蘭氏染色鏡檢,其細菌的形態大小與鏡檢結果相同。生化試驗:用得到的細菌純培養物做生化試驗,結果是能產生靛基質,不分解尿素,不產生硫化氫,不液化明膠,m.R.試驗陽性,V-P陰性。能發酵葡萄糖、乳糖、甘露醇,并能產酸、氣。動物實驗:選健康無病的實驗用小豚鼠12只,分甲乙2組,甲組為試驗組,乙組為對照組。甲組用培養24h的肉湯培養物0.3ml/只腹腔注射;對照組用無菌生理鹽水0.3ml/只腹 腔注射,然后進行觀察。2d后試驗組開始有發病表現,第3天死亡4只,最后一只第5天死亡。對照組無發病表現。取病死小豚鼠的肝臟、心血、腹水分別涂片,革蘭氏染色后鏡檢,鏡檢結果與上述檢驗相同。
根據以上各種檢驗結果,可確定獺兔已被大腸桿菌感染。由于當時條件有限,不能鑒定大腸桿菌的血清型。
涂片鏡檢在載玻片上先滴一滴50%的甘油水溶液,放入火柴頭大小的新鮮病兔糞便,用竹簽加以涂抹,去掉硬固渣子,蓋上蓋玻片,顯微鏡下鏡檢。共做抹片5張,其中3張視野中發現有多個艾美球蟲卵囊。為了確診,又用漂浮法進一步檢查。糞便漂浮法蟲卵檢驗,取多個病兔的新鮮糞便共2Og,放在玻璃杯中,用玻璃棒將兔糞搗爛,加入100ml飽和生理鹽水,再將此糞液用雙層紗布過濾到另一個燒杯中,濾液靜置30min左右,如果有球蟲卵囊就會浮到液面上來。用10mm左右的小鐵絲圈,平著接觸液面,沾取一層水膜,抖在載玻片上,蓋上蓋玻片,顯微鏡下觀察,發現有大量的艾美球蟲卵囊存在。
以上實驗表明,獺兔不僅感染了大腸桿菌,同時也被艾美球蟲所感染。
選用12種抗菌藥物( 青霉素、鏈霉素、慶大霉素、丁胺卡那霉素、環丙沙星、蒽諾沙星、紅霉素、強力霉素、諾氟沙星、痢特靈、土霉素、氯霉素),用常規紙片法對分離的大腸桿菌進行藥敏試驗,所用藥敏試紙為本站實驗室自備。判定標準以抑菌圈大小而定。直徑小于10mm的為耐藥,10~15mm的為中度敏感,15mm以上的為高度敏感。結果對環丙沙星、強力霉素、慶大霉素高度敏感;對紅霉素、氯霉素、丁胺卡那霉素、蒽諾沙星中度敏感;對其他藥物都表現一定程度的耐藥性。
(1)隔離消毒:確診后迅速將病兔進行隔離,并將環境、籠舍徹底清掃,用5%熱火堿水噴灑消毒,1次/d,連續1周;用具清洗后,用0.01%高錳酸鉀消毒,并放在陽光下照射。(2)預防性用藥:對健康獺兔全部采用藥物預防,飲水中加入0.5%鹽酸環丙沙星,2次/d,連用5d。同時飼料中加入磺胺二甲嘧啶以預防球蟲的感染。(3)大腸桿菌治療:根據藥敏試驗,選用硫酸慶大霉素每只2萬IU肌肉注射,2次/d,連用5d。體質較差的配合靜脈注射5%葡萄糖生理鹽水20~50ml。(4)球蟲治療:采用中西結合方法,提高治療效果。用磺胺二甲嘧啶0.2mg/d·kg體重,分2次內服,首次劑量加倍,連用5d。中藥用仙鶴草根150g、黃柏50g、大黃30g、白頭翁30g、黃芩20g、甘草20g,共研細末,3g/d·只拌于飼料內服,連用5d。經過1周的治療,除病重的12只死亡之外,其他的均痊愈。
(1)根據現場調查、臨床癥狀、剖檢病變,特別是通過病原菌的培養及各種鏡檢結果,可以確診獺兔為大腸桿菌與球蟲混合感染。家兔的混合感染性疾病比較常見,而且容易造成誤診,延誤治療時機。因此,要早發現、早診斷、早治療,以減少死亡。(2)家兔的大腸桿菌病發生原因一般是由于飼養條件和氣候環境條件的變化而導致植物神經系統的擾亂,腸道中本來以革蘭氏陽性菌為主的細菌群,被革蘭氏陰性細菌群(主要是大腸桿菌)所代替,以致于發生劇烈腹瀉甚至死亡。兔的球蟲病是危害嚴重的一種疾病,尤其對1~4月齡的兔危害嚴重,當氣溫在10℃以上時,如果飼養管理條件惡化,隨時都可發病。1~4月齡的兔發病時主要以腸型為主,死亡率更高,如不采取相應措施,死亡率會達到100%。(3)該場獺兔發病的主要原因是由于舍內通風不良, 獺兔直接接觸糞尿,舍內地面長期潮濕,致使空氣污濁,室內空氣濕度過大,造成環境條件的惡化,促進了大腸桿菌病及球蟲病的發生。發病時由于畜主防疫衛生意識不強,使用具、飼料飲水、環境被病原微生物及球蟲卵囊所污染,更加重了本病的傳播流行。(4)藥敏試驗結果表明,大腸桿菌對部分抗生素有一定的耐藥性。因此,要選擇敏感藥物使用,才能得到顯著的防治效果,避免浪費藥物和延誤防治時機,減少損失。對于球蟲病的治療,因其易產生耐藥性,在選擇用藥時最好幾種藥物交替使用,或使用中藥治療會收到滿意的效果。(5)預防本病主要從飼養管理人手,在飼養上注意喂給全價配合飼料,滿足營養需要,增強抵抗力。管理上,注意加強舍內通風,保持空氣新鮮;加強衛生管理,保持舍內干燥,定期消毒,必要時采用藥物預防等。發病時做到及早發現、及早處理,只有這樣才能有效地降低本病造成的損失。