縣級獸醫實驗室承擔著口蹄疫、高致病性禽流感、豬瘟、雞新城疫等重大動物疫病的監測、檢測任務及一般動物疫病的臨床診斷化驗工作。做好日常消毒滅菌是實現獸醫實驗室生物安全的重要措施之一,也是保護人員和環境不被病原微生物感染和污染的重要手段。筆者憑著多年從事獸醫實驗室工作的經驗,現將獸醫實驗室日常消毒滅菌方法及其注意事項匯總如下。
1 物理消毒滅菌
主要包括熱力消毒滅菌(包括干烤、火焰、灼燒、焚燒、煮沸、壓力蒸汽等)、紫外線消毒滅菌、高效過濾器(HEPA)過濾除菌等。
熱力消毒滅菌。加熱是最常用的清除病原體污染的物理手段。高溫能使菌體蛋白凝固變性,抑制細菌酶的活性,使其代謝障礙,結構改變,功能喪失或死亡,從而達到消毒與滅菌的目的。加熱可分為干熱和濕熱兩大類。干熱可用來消毒滅菌耐受160℃或更高溫度2~4小時的物品,沒有腐蝕性。濕熱適用于耐濕熱物品的消毒滅菌,濕熱穿透力強。一般微生物在干熱80~100℃中經1小時可以殺死,芽孢需160~170℃經2小時即可殺死。干烤是相對濕度在20%以下的高熱,由空氣導熱,傳熱慢。燃燒法滅菌簡單、迅速、徹底,但是對物品的破壞性較大,故應用范圍較窄。火焰燒灼僅用于金屬、搪瓷類等耐高溫的器械的消毒滅菌。焚燒適用于處理動物尸體、解剖組織、某些特殊感染材料(如破傷風、綠膿桿菌、氣性壞疽感染的輔料)和其他實驗室廢棄物,以及沒有任何保留價值的物品,如污紙、垃圾等。煮沸適用于玻璃器皿、金屬器械的消毒滅菌,是一種簡單、有效的消毒方法。一般病原微生物煮沸1小時即可殺滅,56℃作用30分鐘即可滅活。壓力蒸汽滅菌徹底、高效,適用于耐高溫高壓,耐濕物品的消毒與滅菌,如被微生物污染的廢水、固體廢物,防護服、手術器械、藥品、細菌培養基等。所有培養物、廢棄物、防護用品等在出實驗室之前必須經壓力蒸汽處理,常用滅菌溫度、時間是121℃作用15分鐘、115℃作用25分鐘、134℃作用4分鐘。使用高壓滅菌器應注意以下事項:生產廠家是否有資質,根據不同待滅菌物品裝載要求、滅菌溫度、時間等,規范操作與安全防護,定期監測滅菌效果,設備維修與保養。
紫外線消毒滅菌。紫外線最佳殺菌波長是253.7納米,簡單、高效消毒。適用于室內空氣、物體表面的消毒??諝庀荆覂让?0平方米安裝30瓦紫外線燈管1支,有效距離不超過2米,照射30~60分鐘,照射前清掃塵埃,照射時關閉門窗,人員離開。物品消毒,如選用30瓦紫外線燈管,有效照射距離為25~60厘米,照射25~30分鐘(物品要攤開或掛起,以擴大照射面)。紫外線消毒應注意以下事項:①紫外線對人體皮膚、眼睛、黏膜有刺激作用,并產生臭氧,因此應在無人時消毒,必要時做好人體防護(如穿戴防紫外線服裝、鞋帽、眼鏡等)。②紫外線燈管安裝數量。③紫外燈的殺菌強度隨使用時間逐漸衰減,應定期進行強度監測,當殺菌強度降至70%后要及時更換紫外燈燈管,通常紫外燈使用1 400小時后更換燈管。④紫外線對不同微生物有不同的致死劑量,應根據不同的微生物種類選擇適宜的照射時間。
高效過濾器(HEPA)過濾除菌。高效過濾除菌適用于生物安全柜和生物安全實驗室的空氣凈化除菌。對空氣中小于等于0.3微米顆粒與微生物的阻留率可達99.97 %以上。高效過濾除菌注意事項:定期更換高效過濾器(HEPA),更換前應先用甲醛或過氧乙酸進行熏蒸消毒,更換時嚴格做好工作人員防護,換下的過濾裝置裝入密封袋內由具有資質的單位焚燒處理。
2 化學消毒滅菌方法
主要是通過液體化學試劑殺滅微生物繁殖體或芽孢。利用化學藥物的滲透作用,破壞菌體蛋白,干擾菌酶活性,抑制細菌代謝、損害菌膜結構,改變其滲透性,破壞其生理機能來達到消毒滅菌的目的。用于物體表面、空氣、污染物品的消毒滅菌。常用擦洗、熏蒸、噴霧、浸泡等消毒方法。
化學消毒滅菌應注意以下事項:①根據微生物種類和數量選擇消毒劑的種類和濃度。②不同設備和物品,根據需要可采取不同的消毒方法、相應的消毒劑。③嚴格掌握消毒劑有效滅菌濃度、作用時間、溫度、酸堿度。