前列腺IL-8、COX-2表達與組織增生伴炎癥的相關性研究*

陳帝昂俞旭君張培海李廣森常德貴**

1. 成都中醫藥大學（成都 610075）; 2. 成都中醫藥大學第二附屬醫院;

3. 成都中醫藥大學附屬醫院泌尿外科

前列腺IL-8、COX-2表達與組織增生伴炎癥的相關性研究*

陳帝昂1俞旭君2張培海3李廣森3常德貴1**

1. 成都中醫藥大學（成都 610075）; 2. 成都中醫藥大學第二附屬醫院;

3. 成都中醫藥大學附屬醫院泌尿外科

目的觀察良性前列腺增生（BPH）合并前列腺炎癥與前列腺液、前列腺組織中炎癥因子白介素-8（IL-8）、環氧化酶-2（COX-2）水平的相關性。方法 80例BPH擬行經尿道前列腺電切術（TURP）患者，根據術后病理學診斷分為單純性增生組（30例）和增生伴炎癥組（50例），兩組均于術前進行前列腺液IL-8、COX-2含量測定，術后前列腺組織IL-8、COX-2含量測定，進行統計學分析。結果分別對前列腺液、前列腺組織中IL-8和COX-2 OD值進行組間比較，組間差異性具統計學意義（P＜0.01）；組內比較IL-8和COX-2在前列腺液及前列腺組織中的水平變化，趨勢呈線性正相關（r＞0.5），其中，IL-8表達水平在兩種標本中呈高度相關（r＞0.08）。結論前列腺液中IL-8、COX-2水平能間接反映前列腺組織中IL-8、COX-2水平，通過檢測患者前列腺液中IL-8、COX-2水平可以初步判定BPH患者是否合并有前列腺組織學炎癥。

前列腺增生; 前列腺炎; 白細胞介素8; 環氧化酶2

良性前列腺增生癥（benign prostatic hyperplasia, BPH）是導致中老年男性排尿障礙原因中最常見的一種良性病變[1]。慢性前列腺炎（chronic prostatitis, CP）是中青年男性下尿路癥狀的主要原因。二者均是臨床泌尿外科常見疾病。對前列腺的病理檢查結果提示，大部分BPH患者伴有前列腺炎癥，因此，我們希望可通過前列腺液檢測初步診斷BPH是否伴發炎癥，為BPH伴炎癥患者的臨床診斷提供新的思路和方法。

資料和方法

一、研究對象及分組

收集2010年1月至2011年1月，在我院確診BPH并擬行經尿道前列腺電切術（transurethral resection of the prostate , TURP）的住院患者。期間共納入合符標準的病例共80例，術后經病理檢查分組，其中單純性增生組30例，年齡（75.67±7.16）歲；增生伴炎癥組50例，年齡（67.33±5.66）歲。

二、納入標準

1. 符合《中國泌尿外科疾病診斷治療指南》（2009）[1]中BPH的診斷標準；

2. 年齡50～80歲；

3. 擬行TURP；

4. 簽署知情同意書的患者。

三、診斷標準

（一）西醫診斷標準

參照《中國泌尿外科疾病診斷治療指南》（2009版）[1]。

（二）病情分級標準

IPSS評分：輕 0～7分；中：8～19分；重：20～35分。

四、排除標準

前列腺腫瘤；既往行前列腺手術者；長期留置尿管或手術前期留置尿管不能行前列腺按摩者；前列腺液難以按摩出或前列腺液達不到試驗要求者；精神病患者；不愿意參加本試驗者。

五、研究方法

（一）問卷調查

以國際前列腺癥狀評分（IPSS）為主。

（二）標本采集與保存

前列腺液的采集與保存：用新潔爾滅消毒尿道外口，患者膝胸位經直腸按摩采集前列腺液，并將前列腺液保存于無菌的Ependorff管中，注意無菌操作，并儲存于-20℃的冰箱中備用。前列腺組織的采集與保存：將足量的新鮮前列腺電切組織放入10%的甲醛中保存，石蠟包埋切片待測。

（三）環氧化酶-2（COX-2）、白介素-8（IL-8）的檢測

前列腺液IL-8、COX-2采用ABC ELISA法測定（單位：ng/ml），前列腺組織IL-8、COX-2采用酶聯免疫吸附法測定其光密度（OD值）。操作步驟嚴格按照說明書。IL-8 ELISA試劑盒購自深圳達科為生物技術有限公司，COX-2 ELISA試劑盒購自上海西唐生物科技有限公司；兔IL-8多克隆抗體試劑盒購自北京博奧森生物技術有限公司；兔COX-2多克隆抗體試劑盒購自美國SANTA CRUZ公司；鼠抗兔IL-8及COX-2二抗、三抗試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術有限公司。

六、統計學分析

結 果

一、一般情況比較

試驗總入組109例，其中單純性增生組31例，占28.4%，增生伴炎癥組78例，占71.6%；因課題為術前取前列腺液，根據術后病理觀察結果分組，即在獲取前列腺液前患者已入組課題，而IL-8、COX-2指標的測定對前列腺液有一定量要求，量過少則無法測定，故被迫剔除，因此單純性增生組剔除1例，增生伴炎癥組剔除28例，總剔出率為26.6%，脫落0例，脫落率0%。符合方案分析集80例。

經成組t檢驗，兩組患者最大尿流率（maximal urinary flow rate, MUF）比較無統計學差異，但在年齡、病程、前列腺體積、IPSS評分及前列腺特異性抗原方面差異性均具有統計學意義（P＜0.05）。其中，單純性增生組患者的年齡較增生伴炎癥組患者年齡大，病程更長，而前列腺體積、IPSS癥狀評分、前列腺特異性抗原值（prostate specif c antigen, PSA）方面較增生伴炎癥組小，見表1。

二、炎性因子IL-8、COX-2水平比較

經成組t檢驗，單純性增生組的前列腺液和前列腺組織中IL-8、COX-2水平均低于增生伴炎癥組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

三、相關性研究

經線性回歸分析，IL-8、COX-2在前列腺組織中的表達均與各自組內前列腺液的表達值呈正相關，詳見表3。

表1 兩組受試者年齡、病程、前列腺體積、IPSS、MUF、PSA差異性比較

表2 兩組IL-8、COX-2分別在前列腺液和前列腺組織中的表達情況

表3 IL-8、COX-2分別在前列腺液與前列腺組織中含量線性分析

討 論

BPH 是中老年男性最常見的泌尿科疾病。其主要病理變化表現為前列腺尿道周圍移行帶的間質和上皮細胞的增生。然而，誘發這一過程的原因至今尚不完全清楚。近年來，炎癥在BPH發病過程中所起的病理變化引起了人們的關注。臨床上，中老年男性BPH常合并炎癥[2,3]，BPH與前列腺炎的臨床癥狀有很多重疊之處[4]，且伴有組織學炎癥的患者其臨床癥狀明顯[5]，因為炎癥可以加重纖維化，并促進結節形成[6]，使前列腺管腔更加狹窄[7]，而通過抗炎治療后，癥狀能夠得到明顯改善。新近研究[8]亦發現，免疫球蛋白SIgA及組織受體α++-AR的表達在伴炎癥BPH標本中含量明顯增高。因此學者普遍認為，免疫炎癥反應有可能參與了BPH的發病，炎癥對BPH的病理變化有促進作用。

因此，在臨床上判斷出哪些患者伴有炎癥，對治療和提高患者生活質量具有明顯益處。但當前臨床判定往往需要活檢來證實，如對前列腺電切術后的電切組織進行病理學檢査[9]，具創傷性，故臨床較少采用該方法，因此尋找相對無創的檢查方法成為當務之急。本課題通過觀察前列腺液與前列腺組織中炎性因子的變化相關性來進行研究，為尋找組織學炎癥提供依據。IL-8是Yoshimura等[10]從脂多糖（LPS）、植物凝集素（PHA）刺激人單核細胞培養上清液中純化而來，是一種多源性、多功能性的細胞因子，能夠吸引T淋巴細胞聚集，導致炎性反應發生，有啟動和促進炎癥反應的作用[11]，是診斷前列腺組織的炎癥狀況最可信和最有預見性的生化標記分子[12]。COX-2是環氧化酶的一種異構酶，它參與了炎癥及腫瘤的發生、發展等多種病理生理過程。最近研究發現，包括COX-2在內的炎癥網絡參與了BPH的發生發展[13]：炎性細胞能夠通過釋放炎性因子誘導COX-2在BPH上皮細胞中的表達，COX-2表達增加前列腺素2（PGE2）的合成，PGE2誘導細胞增殖并刺激BcL-2蛋白表達，后者抑制細胞凋亡，使得細胞增生，提示COX-2對BPH有誘導作用。

本文研究結果顯示，BPH伴炎癥在中老年男性中普遍存在，檢出率高達71.6%，這與國內外對BPH伴炎癥的研究現狀基本相符[14]。另外，單純BPH與合并炎癥的患者相比較，合并炎癥者平均年齡較小，病程較短，前列腺體積也較大，PSA值較高，這一系列數據也與當前其他學者研究發現相一致。

通過對前列腺組織與前列腺液的指標分析，增生伴炎癥組前列腺組織及前列腺液中IL-8、COX-2水平較單純性增生組高，差異具有統計學意義（P＜0.05）。經線性回歸分析，我們發現前列腺液中IL-8、COX-2水平變化趨勢與前列腺組織中IL-8、COX-2水平含量變化趨勢呈線性正相關，說明前列腺液中IL-8、COX-2水平能間接反映前列腺組織中IL-8、COX-2的水平。

通過本研究，我們認為檢測患者前列腺液中IL-8、COX-2水平含量并結合患者癥狀評分可以初步判定BPH患者是否合并有前列腺組織學炎癥。但由于研究的樣本量較小，可能存在一定的不確定性，但為進一步的研究奠定了基礎。

1 那彥群主編. 中國泌尿外科疾病診斷治療指南. 2011版.北京:人民衛生出版社, 2011: 128-137

2 張江磊, 侯建全, 溫端改, 等. 組織學前列腺炎與良性BPH 臨床進展的關系. 江蘇醫藥 2010; 36(4): 406-408

3 Mishra VC, Allen DJ, Nicolaou C,et al. Does intraprostatic inflammation have a role in the pathogenesis and progression of benign prostatic hyperplasia.BJU Int2007; 100(2): 327-331

4 沙鍵, 唐來坤, 酈俊生, 等. 前列腺增生癥與慢性前列腺炎臨床關系的研究. 中華現代外科學雜志 2009; 6(1): 6-8

5 郭勇, 張俊良, 孫奎俊. 良性前列腺增生合并慢性前列腺炎癥的臨床分析. 齊齊哈爾醫學院學報 2012; 33(23): 3218-3219

6 高衛軍, 王長海, 王養民. 良性前列腺增生合并慢性前列腺炎的研究進展. 西北國防醫學雜志 2012; 33(4): 453-455

7 揭曉, 莫曾南. 前列腺炎癥與前列腺增生的關系. 實用醫學雜志 2008; 24(20): 3608-3610

8 高衛軍, 王養民, 王長海, 等. 良性前列腺增生合并慢性前列腺炎組織中SIgA、α1-AR的表達與意義. 中華男科學雜志 2013; 19(4): 315-320

9 Piovesan AC, Freire Gde C, Torricelli FC. Incidence of histological prostatitis and its correlation with PSA density.Clinics (Sao Paulo)2009; 64(11): 1049-1051

10 Yoshimura T, Matsushima K, Oppenheim JJ,et a1. Neutrophil chemotactic factor produced by lipopolysaccharide (LPS)-stimulated human blood mononuclear leukocytes: partial characterization and separation from interleukin 1 (IL-1).J Immunol1987; 139(3): 788-793

11 Hoheisel G, Izbicki G, Roth M,et al. Pro-inf ammatory cytokine levels in patients with lung cancerand carcinomatous pleurisy.Respiration1998; 65(3): 183-186

12 Penna G, Mondaini N, Amuchastegui S,et al. Seminal plasma cytokines and chemokinesin prostate inf ammation: interleukin 8 as a predictive biomarker in chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome and benign prostatic hyperplasia.Eur Urol2007; 51(2): 524-533

13 Konig JE, Seng T, Allhoff EP,et a1. Analysis of the inf ammatory network in benign prostate hyperplasia and prostate cancer. Prostate,2004,58(2):121-129.

14 Nickel JC, Roehrborn CG, O＇Leary M,et al. Examination of the relationship between symptoms of prostatitis and histological: Baseline data from the REDUCE chemoprevention trial.J Urol2007; 178(3 Pt 1): 896-900

（2013-11-05收稿）

Correlation between the level of IL-8, COX-2 in prostate and benign prostatic hyperplasia with prostatitis*

Chen Diang1, Yu Xujun2, Zhang Peihai3, Li Guangsen3, Chang Degui1**
1. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu, Sichuan 610075 2. Department of Andrology, the Second Aff liated Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; 3. Department of Urology, Aff liated Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

Chang Degui, E-mail: cdg998@sina.com

ObjectiveTo investigate the relationship between benign prostatic hyperplasia (BPH) with inf ammation and level of interleukin-8 (IL-8) and cyclooxygenase-2 (COX-2) in prostate tissue and expressed prostatic secretions.MethodsA total of 80 BPH patients who would be treated by transurethral resection of the prostate (TURP) were divided into simple hyperplasia group (30 patients) and huperplasia with inf ammation group (50 patients) identif ed by postoperative pathologic diagnosis. Preoperative levels of IL-8 and COX-2 in expressed prostatic secretions and postoperative levels of IL-8 and COX-2 in prostate tissue were detected and comparatively analyzed.ResultsThe levels of IL-8 and COX-2 from prostate tissue and expressed prostatic secretions were higher in huperplasia with inf ammation group than those in simple hyperplasia group (P<0.01). The levels of IL-8 and COX-2 in prostate tissue were positively correlated with those in expressed prostatic secretions(r>0.05), and IL-8 level in prostate tissue was highly correlated to that of expressed prostatic secretions (r>0.8).ConclusionThe levels of IL-8 and COX-2 in prostate f uid could indirectly ref ect the levels of IL-8 and COX-2 in prostate tissue. A BPH patient with prostatitis can be def ned by analyzing the levels of IL-8 and COX-2 in expressed prostatic secretions.

prostatic hyperplasia; prostatis; interleukin-8; cyclooxygenase 2

10.3969/j.issn.1008-0848.2014.03.008

R 697.33; R 697.32

*資金項目資助: 四川省衛生廳課題（編號: 090124）; 四川省人事廳課題（編號: Z006）**

, E-mail: cdg998@sina.com