海南兩種含笑屬植物葉中提取小白菊內酯的研究

夏偉 閆浩 杜金風

摘 要：大量的研究證實小白菊內酯具有多種藥理作用，包括抗炎免疫抑制作用、抗氧化、抗腫瘤、抑制血管平滑肌細胞的增殖、抑制破骨細胞的活性及抑制細胞核因子-κB的表達等。文章在對已有的香籽含笑、白花含笑兩種植物的葉提取物研究的基礎上進行了深入研究，其研究成果為后期海南地區小白菊內酯的研究和開發打下了堅實的基礎。

關鍵詞：小白菊內酯；提取方法；HPLC-MS分析

小白菊內酯（parthenolide， PAR，分子式C15H20O3，相對分子質量248.32，結構式見圖1）是從艾菊內純化出的一種倍半萜稀內酯化合物（sesquiterpene lactone），被證實為藥理活性最好的成分[1]。小白菊提取物具有很強的抗腫瘤活性，研究表明，小白菊內酯能夠摧毀急性骨髓性白血病細胞，對研制白血病新藥大有幫助；可有針對性地消滅引發急性和慢性骨髓性白血病的干細胞，從根本上遏制疾病的發生；可用于治從偏頭痛到風濕性炎等多種疾病；可用于驅風劑，治療腸胃脹；可用于通經劑，殺蟲劑（寄生蟲）可以用于減輕腎痛，頭暈和早上嘔吐現象；還可以幫助改善感冒、發燒時的不適癥狀等[2]。

就目前情況看，因植物中小白菊內酯的含量低且提取工藝復雜，國內外小白菊內酯的價格都普遍偏高，但需求情況仍呈現出供不應求的狀態，說明了小白菊內酯在醫藥領域的需求的是炙手可熱的，且貢獻非常重要。另外，海南省昌江縣霸王嶺保護區內大量生長著香籽含笑、白花含笑兩種植物，在已有的研究基礎上利用高效液相色譜與質譜聯用的分析方法對小白菊內酯標準品與上述兩種植物葉提取物進行了分析對照，確認了該兩種植物葉提取物中存在的類似化合物為小白菊內酯的事實。下面對該兩種植物研究小白菊內酯的進一步研究過程及結果做一綜述。

1 提取方法

將曬14天后的樣品干葉粉碎后，稱取10.0g粉碎置于250ml燒杯中，加入95%乙醇常溫超聲提取30min后取上清液，再重復2次提取，合并3次提取液。用30ml95%乙醇溶液分3次洗滌濾渣，將洗滌液合并到提取葉中，減壓旋蒸后制得浸膏，浸膏轉移至分液漏斗并分別用20mL、30mL、30mL20%的乙醇溶液溶解圓底燒瓶壁上的浸膏殘留，將溶解液依次轉移至分液漏斗內，用100mL乙酸乙酯萃取溶液三次并合并乙酸乙酯層萃取液，減壓旋蒸得到浸膏。此方法得到香梓浸膏0.0883g，白花浸膏0.1827g[3]。

2 檢測條件與方法

高效液相檢測條件，A相為0.1%磷酸，B相為乙腈，A：B=40：60，檢測波長為254nm，柱溫25℃，進樣量為10μL。檢測相近的保留時間內是否具有類似的吸收峰，通過HPLC-MS確定待測樣品中是否含有與標準品相同的化合物。

3 檢測結果

3.1 高效液相色譜與質譜聯用對小白菊內酯標準品的分析結果，如圖2所示：

3.2 高效液相色譜與質譜聯用對香梓含笑葉樣品的分析結果，如圖3所示：

3.3 高效液相色譜與質譜聯用對白花含笑葉樣品的分析結果，如圖4所示：

4 圖譜分析

圖2的小白菊內酯標準品HPLC-MS譜圖反應了在液相色譜中停留時間在10分鐘的位置有一明顯的吸收峰，對該吸收峰位置的化合物進行質譜分析時確定該化合物的分子量為231.4；同時對香梓含笑葉樣品和白花含笑葉樣品進行HPLC-MS分析，在相同吸收峰的位置的化合物情況基本一致，香梓含笑葉樣品及白花含笑葉樣品檢測分別得到分子量為231.3和231.9，認定為同一化合物，即確定該兩個樣品中均含有小白菊內酯。

參考文獻

[1]周惠瓊.小白菊內酯的生物特性與藥理作用研究進展[J].中國新藥雜志，2009.

[2]李申恒，李小云，等. 小白菊內酯及其衍生物藥理作用研究進展[J].中成藥，2012.

[3]閆浩，杜金風，等.海南含笑屬植物提取小白菊內酯的研究[J].生物制藥技術，2013.

作者簡介：夏偉（1984-），男，海南人，本科，助教，研究方向：化學分析、化工生產。

閆浩（1987-），男，內蒙古人，本科，助教、技師，研究方向：化學、自然科學。

杜金風（1983-），女，山東人，研究生，講師、技師，研究方向：自然科學，該項目負責人。